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小鼠4-细胞胚OPS法冷冻保存技术的研究: 本实验在37℃条件下,利用玻璃化冷冻溶液EFS30、EFS40、EDFS30或EDFS40,对小鼠4-细胞胚进行玻璃化冷冻保存,解冻后培养72h时的囊胚发育率为其体外发育能力的考核指标,同时对解冻后培养1~3h的胚胎进行...; 周光斌金方侯云鹏杨中强闫长亮朱士恩; 关键词：OPS法玻璃化冷冻细胞胚胎小鼠繁殖生物技术; 文献传递

小鼠桑椹胚的玻璃化冷冻保存及分割技术的研究: 本实验对小鼠桑椹胚的玻璃化冷冻保存、胚胎分割及胚胎移植技术进行了系统的研究。首先对小鼠桑椹胚细管、OPS冷冻法进行了比较研究。采用EFS40细管二步法冷冻，解冻后其囊胚发育率最高为96.40％，优于细管一步法(88.7...; 金方; 文献传递

小鼠孵化囊胚细管法和OPS法玻璃化冷冻保存技术的研究被引量：8: 2004年; 利用小鼠孵化囊胚为模型 ,为猪孵化囊胚的冷冻保存摸索适宜的方法和条件 :在 2 5和 37℃条件下 ,用不同含量的玻璃化溶液 (EFS和EDFS) ,对小鼠孵化囊胚实施细管法和OPS法冷冻保存。在 2 5℃条件下 ,细管一步法冷冻保存后的囊胚恢复率仅为 32 5 %～ 74 4 % ,与对照组 (10 0 % )差异极显著 (P <0 0 1) ;而细管二步法冷冻组用方法C解冻后 ,孵化囊胚恢复率达 87 0 % ,为细管法最佳组 ,但仍与对照组有显著差异 (P <0 0 5 )。在 37℃条件下 ,改用OPS法冷冻后 ,以方法A脱出抗冻保护剂 ,孵化囊胚恢复率最高值为 87 2 % (P <0 0 5 )。当采用EDFS30和EDFS4 0对孵化囊胚冷冻保存后 ,以方法C脱出抗冻保护剂 ,恢复率分别高达 97 8%和 93 3% (P >0 0 5 )。利用细管法和OPS法 2种最佳冷冻 -解冻组获得的 133和 15 4枚胚胎 ,分别移植给 12和 10只假妊娠 3～4d的受体母鼠。使 2种冷冻方法均有 6只妊娠 ,各产仔 2 2和 36只 ,产仔率分别为 35 5 %和 39 1% ,与对照组(39 8% )差异均不显著 (P >0 0 5 )。证明 2种方法对胚胎冷冻后均起到了保护作用。; 周崇侯云鹏周光斌吴通义金方洪琼花朱士恩; 关键词：小鼠细管法 OPS法玻璃化冷冻

小鼠4-细胞胚胎OPS法冷冻保存技术被引量：2: 2006年; 在25℃室温和37℃恒温台条件下，利用玻璃化冷冻溶液EFS30、EFS40、EDFS30或EDFS40，对小鼠4-细胞胚胎进行玻璃化冷冻保存．以解冻后培养72h的囊胚发育率为其体外发育能力的考核指标，同时对解冻后培养1～3h的胚胎进行移植以判定其体内发育潜力。开放式拉长塑料细管（OPS）二步法冷冻保存，即胚胎首先移入预处理液（10％EG或10％EG＋10％DMSO）中平衡30s，再移入玻璃化溶液中洗涤后吸入OPS管中，分别经35、30或25s后直接投入液氮中冷冻保存。一步法冷冻保存则无需预处理液处理。结果表明，小鼠胚胎4-细胞一步法和二步法冷冻后囊胚最高发育率分别为87．7％和88.6％，与对照组（93.0％）差异不显著（P〉0．05）。利用最佳冷冻组获得的143枚胚胎移植于12只假妊娠50～60h的受体母鼠，结果有4只妊娠产仔17只，妊娠产仔率为42．5％（17／40），与对照组59．4％（19／32）差并不显著（P〉0.05）。; 周光斌金方侯云鹏杨中强刘国世田见晖朱士恩; 关键词：OPS法玻璃化冷冻小鼠

小鼠卵母细胞OPS法冷冻保存后体外受精的研究: 本实验采用EDFS玻璃化溶液对小鼠卵母细胞进行OPS法冷冻保存。在EDFS30中平衡25s冷冻·解冻后形态正常率为92.1%～92.5%,与对照组(98.9%)无显著差异(P>0.05)。EDFS30和EDFS40冷冻组...; 朱士恩吴道义周崇侯云鹏金方刘国世田见晖曾申明; 关键词：OPS 玻璃化冷冻体外受精; 文献传递

小鼠胚胎徒手分割技术的研究被引量：5: 2004年; 目的　研究不同分割液和分割前胚胎去致密化与否对昆明白系小鼠的桑椹胚和囊胚的徒手分割以及分割后胚胎移植的影响。方法　在mPBS、1 2 5 %蔗糖液和进口分割液三种不同分割液中对桑椹胚和囊胚进行徒手分割。结果和结论　在蔗糖液与进口分割液中分割桑椹胚 ,成功率显著高于mPBS处理组 (6 9 5 3%、77 4 0 %vs5 6 82 % ) (P <0 0 5 ) ,而半胚的囊胚发育率及囊胚细胞数三组差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;在蔗糖液与进口分割液中分割囊胚 ,分割后半胚培养的囊胚发育率显著高于mPBS处理组 (72 38%、74 2 9%vs 5 6 2 0 % ) (P <0 0 1 ) ,而分割成功率及囊胚细胞数三组差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;各处理组半胚的囊胚发育率及囊胚细胞数都显著低于对照组体外培养桑椹胚的囊胚发育率 (98 70 % )和囊胚细胞数 (6 3 6 7± 5 78) (P <0 0 1 ) ;桑椹胚经去致密化处理后分割 ,其分割成功率显著高于未处理组 (82 90 %vs 5 6 6 0 % ) (P <0 0 1 ) ,处理组半胚培养的囊胚发育率也显著高于未处理组 (73 80 %vs 4 6 80 % ) (P <0 0 1 ) ;共移植 1 4 2枚 2分胚形成的囊胚移植于 1 1只受体 ,其中 3只妊娠 ,分别产仔 2只、3只和; 金方侯云鹏周光斌赵学明朱士恩; 关键词：胚胎桑椹胚囊胚胚胎移植

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金方