韩凤连
- 作品数：21 被引量：30H指数：3
- 供职机构：解放军第302医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HBV Pre S2单链抗体基因在大肠杆菌中的克隆及初步表达被引量：3
- 1996年
- 利用基因重组技术，在成功构建ＨＢＶ ＰｒｅＳ２单链抗体基因基础上，引入ＥｃｏＲⅠ和ＳａｌⅠ酶切位点，克隆到原核高效表达质粒ｐＢＶ２２０中，筛选到２个重组克隆，经转染大肠杆菌ＤＨ５α，４２℃热敏诱导５￣６小时后，超声裂解细菌产物在包被有Ｐｒｅ Ｓ２抗原的阻断ＥＬＩＳＡ中，有明显的阻断亲本３Ｂ９单抗对ＰｒｅＳ２抗原的亲和活性，在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中，分子量２．８×１０＾４处显示一条表达产物带。
- 程云汪力亚季伯安李靖曹阳张建宗杨守纯韩凤连周继文
- 关键词：克隆乙型肝炎病毒
- 慢性HBVC基因启动子变异的检测被引量：3
- 2000年
- 目的 了解慢性乙型肝炎病毒 (HBV)C基因启动子变异的情况以及对病毒血清学的影响。方法 应用错配聚合酶链反应特异性扩增含有HBVC基因启动子的片段 ,扩增产物用限制性内切酶BcLⅠ酶切 ,琼脂糖凝胶电泳后 ,观察酶切后的限制性片段长度多态性 (RFLP)图谱 ,分析C基因启动子区段的核苷酸 (nt) 176 2由碱基A→T和 (nt) 176 4碱基由G→A的变异 ,并经直接测序分析证实RFLP结果。结果 110例慢性乙型肝炎病人中HBVDNA阳性 89例 ,其中HBeAg阳性组 43例 ,检测出T 176 2 /A 176 4变异株 2 1例 ;46例抗 HBe阳性组中检出T 176 2 /A 176 4变异 2 6例 ,两组相比 ,差异无显著性 (P >0 0 5 )。同时对 15例中、重型慢性乙型肝炎病人血清检测 ,发现T 176 2 /A 176 4变异11例 ,在 5例发生变异株与野生株的混合感染中 ,变异株有优势积累趋势。结论 HBVC基因启动子变异特别是T 176 2 /A 176 4联合位点变异在我国慢性乙型肝炎患者中普遍存在 ,变异的发生只是降低了HBV前CmRNA的转录效率 ,而不是完全中止HBeAg的复制 ,这种变异明显不同于前C区终 2 8变异对血清学的影响 ,且随着病情的发展 ,变异株发生优势积累。提示 ,这一变异似乎与病理变化轻重程度有一定关系。
- 邢利和朱传琳施红韩凤连
- 关键词：乙型肝炎病毒RFLPC基因启动子
- 丙型肝炎患者血清抗丙型肝炎病毒抗体IgM及HCVRNA检测结果的比较被引量：1
- 1997年
- 用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对住院病人抗丙型肝炎病毒抗体（抗－ＨＣＶ）阳性血清标本进行抗－ＨＣＶＩｇＭ的检测，并与ＨＣＶＲＮＡ检测结果比较。结果表明，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阳性，ＨＣＶＲＮＡ阳性、抗－ＨＣＶ阴性及ＨＣＶＲＮＡ阴性、抗－ＨＣＶ阳性三种类型中均有抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性者。结果还表明ＨＣＶＲＮＡ阳性病例的抗－ＨＣＶＩｇＭ阳性率明显高于ＨＣＶＲＮＡ阴性的病例（Ｐ＜０．０５），在临床诊断上ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性病例的肝病大多数为急性肝炎（ＡＨ）和慢性活动性肝炎（ＣＡＨ），ＨＣＶＲＮＡ阳性与阴性比较，各类肝病的病例数无明显差别。
- 雷周云逯好英韩凤连逯好英韩凤连
- 关键词：丙型肝炎丙型肝炎病毒病毒抗体
- 对PCR扩增片段克隆操作的几点体会被引量：5
- 1997年
- 徐东平施红韩凤连
- 关键词：聚合酶链反应基因片段扩增克隆
- 抗HBV Pres2单链抗体基因的构建、克隆、表达及鉴定
- 1997年
- 3B9是一株分泌HBV Pres2抗原的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞系。为了构建基因工程抗体并从分子水平分析3B9株McAb,我们用分子生物学技术提取3B9杂交瘤细胞总RNA,经反转录和聚合酶链式反应(PCR)技术分离获得了3B9McAb的轻、重链可变区基因(VL/VH)。
- 程云汪力亚杨守纯罗清华韩凤连曹阳张建宗周继文
- 关键词：重链可变区基因杂交瘤细胞系高效表达载体单链抗体基因
- 针对乙型肝炎病毒前S2基因核酶的设计及体外切割活性研究被引量：3
- 1998年
- 目的体外研究核酶对乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｓ２基因的作用。方法设计合成一针对ＨＢＶａｙｗＤＮＡ前Ｓ２区第１１０，１２２和１３２位碱基的三靶位串联锤头状核酶基因，体外转录核酶基因和靶基因并进行切割实验；将核酶基因与逆转录病毒重组，转导２．２．１５细胞，观察转导细胞聚人血清白蛋白受体（ｐＨＳＡ－Ｒ）的表达水平。结果核酶在体外可有效切割靶基因转录物，在转入２．２．１５细胞后４周内对ｐＨＳＡ－Ｒ表达抑制率为５１．４５±４．５７％～４１．０１±４．１６％。结论本文设计合成的针对乙型肝炎病毒前Ｓ２基因的核酶在体外具有相应的生物学活性。
- 徐东平韩凤连施红雷周云金磊刘妍
- 关键词：乙型肝炎病毒核酶基因治疗
- 兔内毒素血症肺组织诱生型一氧化氮合酶基因表达的原位检测
- 1998年
- 本实验观察了家兔内毒素的主要成分脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈｒｉｄｅ，ＬＰＳ）注入后１小时和５小时，诱生型一氧化氮合酶ｉＮＯＳ蛋白和基因表达的肺内分布。一、材料与方法图１阳性信号可见于ＬＰＳ注入后５小时组肺内的巨噬细胞，棕黄色ＡＢＣ法×４００图...
- 万梅凌亦凌金磊金磊王俊霞韩凤连
- 关键词：内毒素血症肺组织一氧化氮合酶基因表达
- 人α-干扰素与乙型肝炎病毒前S2嵌合蛋白的表达纯化和鉴定被引量：5
- 2000年
- 目的 重组表达人α 干扰素与乙型肝炎病毒前S2融合蛋白 (IFN PreS2 ) ,探索治疗HBV感染的特异性免疫药物。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)技术扩增出人IFN α2b和HBVPreS2基因片段 ,分步克隆获取融合基因 ,构建pBV IFN PreS2重组表达载体 ,转化E .coli后诱导表达IFN PreS2融合蛋白。结果 在E coli中表达了相对分子质量为 2 70 0 0的目标蛋白 ,后者以包含体形式存在 ,表达量占菌体总蛋白的 15 %。经过反相高效液相色谱 (RP HPLC)等步骤纯化后 ,目标蛋白纯度达到 95 %。复性的表达产物在体外测定具有相应的生物活性和免疫学特性 ,干扰素生物比活达到 10 8IU/mg蛋白质。融合蛋白能与抗IFN α抗体、抗HBVPreS2抗体及多聚人血清白蛋白 (PH SA)结合。结论 在原核系统中有效表达了具有高生物活性的IFN PreS2融合蛋白。
- 徐东平韩凤连施红王福生程云金磊雷周云刘明旭
- 关键词：乙型肝炎病毒干扰素Α
- 急慢性肝病患者全血及血清中bcl-2的检测及其临床意义
- 1998年
- 目的:研究与细胞凋亡相关的bcl-2在急慢性肝病患者全血中存在情况及其临床意义,以及判断是否在血清中存在bcl-2;方法:选择46例患者为研究对象,其中男37例,女9例,年龄17岁～67岁,平均38.1岁。急性肝炎4例,慢性肝炎轻度8例,中度4例(慢性肝炎均经病理证实),肝炎肝硬变20例,慢性重型肝炎10例。乙型肝炎41例。
- 邹正升辛绍杰张占红施红徐东平韩凤连
- 关键词：BCL-2病毒性肝炎全血
- 人免疫缺陷病毒感染的第二受体
- 1998年
- 趋化因子是一类对炎性细胞具有趋化作用,且结构类似的小分子量蛋白。趋化因子通过与靶细胞膜上相应的受体结合而发挥其生物学作用。人免疫缺陷病毒(HIV)的感染不仅需要有第一受体CD4分子的表达,而且还要借助趋化因子受体作为第二受体的参与。HIV病毒株对不同细胞的嗜性也是由其靶细胞膜上表达的趋化园子受体结构性质决定的。趋化因子对HIV感染具有一定的抵抗作用。
- 成军韩凤连
- 关键词：人免疫缺陷病毒趋化因子受体CD4分子
