顾有方 作品数:391 被引量:1,324 H指数:17 供职机构: 安徽科技学院动物科学学院 更多>> 发文基金: 安徽省自然科学基金 安徽省优秀青年科技基金 安徽省高校省级自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
猪CD8B基因编码区克隆和序列分析 2020年 本研究旨在克隆猪CD8B基因的编码区及检测其碱基变异,并利用生物信息学对CD8B基因及其编码的蛋白质序列进行分析。提取大白猪脾脏总RNA后,用RT-PCR扩增CD8B基因。结果表明,扩增得到长785 bp猪CD8B基因序列,包含完整的630 bp编码区(共编码209个氨基酸),并检测到1个同义突变(c.204 A/G)。经预测,猪CD8β蛋白的分子式为C1053H1702N296O279S10,分子量为23293.51,理论等电点为10.24,不稳定系数为50.40,平均亲水性系数为-0.041;二级结构以无规卷曲、延伸链为主,含1个Ig V样结构域;存在1个长21个氨基酸残基的信号肽和1个跨膜区;含1个N-糖基化位点和4个O-糖基化位点。同源性分析表明,猪CD8β蛋白与8个哺乳动物(普通牛,水牛,山羊,绵羊,猫,狗,小鼠,大鼠)的相似性在49%以上。分子进化分析表明,猪CD8β蛋白与普通牛、水牛、山羊、绵羊的亲缘关系最近,其次是猫、狗,最远的是小鼠、大鼠。本试验为研究猪CD8B基因的结构和免疫功能提供基础资料。 许金根 顾有方 王重龙 李升和 李庆岗关键词:编码区 表达柔嫩艾美耳球虫HMGB1基因质粒DNA的免疫效果分析 被引量:4 2016年 旨在评价表达柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)HMGB1基因质粒DNA免疫对同源株攻虫的免疫保护效果。将EtHMGB1基因插入pcDNA3.1(-)/myc-His A真核表达载体中,并在Hela细胞中进行体外瞬时表达。设计了pcDNA3.1(-)/myc-EtHMGB1免疫组、pcDNA3.1(-)/myc-His A免疫组、重组蛋白质+FCA佐剂免疫组、pcDNA3.1(-)/myc-EtHMGB1+重组蛋白质联合免疫组、FCA佐剂免疫组、未免疫攻虫组和未免疫未攻虫组7个试验组。分别于14和21日龄对鸡进行两次免疫,28日龄时除未免疫未攻虫组外各组用1×104个E.tenella孢子化卵囊攻虫,以平均增重、卵囊产量和病变记分作为免疫保护效果的评价指标。结果显示,成功构建了pcDNA3.1(-)/myc-EtHMGB1重组质粒,转染后该质粒可在Hela细胞中进行瞬时表达。该重组质粒单独免疫、重组蛋白质单独免疫或重组质粒与重组蛋白质联合免疫均对鸡肠道病变改善效果不明显,但可显著提高增重,降低卵囊产量,尤以重组质粒与重组蛋白质联合免疫效果最佳,显示Prime-boost免疫策略可提高该重组质粒的免疫保护效果。上述结果显示HMGB1可作为未来球虫疫苗研制的良好候选抗原之一。 顾有方 李文超 汪凯 靳二辉 胡倩倩 李升和 陈会良关键词:柔嫩艾美耳球虫 真核表达 免疫保护 微小隐孢子虫感染对大鼠心、脑抗氧化功能的影响 2009年 80只SPF级SD系大鼠随机分成地塞米松免疫抑制感染组和对照组(n=40),免疫抑制感染组大鼠一次性接种1×106/L微小隐孢子虫卵囊液1mL,对照组接种1mL生理盐水。于感染前(0d)和感染后2,7,13,19d分别宰杀10只大鼠,采集心脏?大脑,检测其GSH-Px、CuZn-SOD、Mn-SOD、总SOD、CAT活性和MDA含量的变化。结果表明,与对照组相比,大鼠感染微小隐孢子虫后,心脏组织的GSH-Px、总SOD、CuZn-SOD、Mn-SOD和CAT活性极显著下降(P<0.01);MDA含量极显著高于对照组(P<0.01)。脑组织的GSH-Px、总SOD活性在感染后与对照组相比极显著下降(P<0.01);MDA含量在感染后极显著升高(P<0.01),而脑组织CAT活性在感染后变化不明显。 刘德义 顾有方 陈会良 李升和 商常发 张海燕关键词:微小隐孢子虫 抗氧化功能 饮水硼对固始鸡空肠发育的影响 由饮水途径添加硼,研究硼对固始鸡空肠发育的影响。试验取240只1日龄固始鸡,随机分为4组, 分别在饮水中添加0、100、200、400mg.L-1硼,试验期42d,每周末每组取试验鸡6只,颈静脉放血致死, 取空肠Boui... 王珏 顾有方 金光明 李升和 商常发 陈会良关键词:硼 固始鸡 空肠 发育 文献传递 鸡球虫病疫苗的研究及其临床应用 被引量:6 2015年 鸡球虫病是一种分布广泛,严重危害鸡生长发育的肠道原虫病。长期以来,主要依靠药物来控制鸡球虫病,由于球虫耐药虫株的出现,政府对抗球虫药使用的限制或禁止,使得用疫苗来控制鸡球虫病日益受到重视。本文对球虫疫苗的研究进展做一综述。 汪凯 李文超 顾有方关键词:鸡球虫病 疫苗 微量元素硼对固始鸡肝组织结构的影响 被引量:4 2012年 240羽1日龄固始鸡随机分为对照组与试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,对照组饮用自来水,各试验组饮水中硼含量分别为100、200和400 mg/L,试验期6周,研究微量元素硼对固始鸡肝组织结构的影响。每周末每组取固始鸡10羽,颈动脉和静脉放血致死,立即解剖取肝,Bouin液固定,制作石蜡切片,HE染色,显微观察与摄影。结果表明:试验Ⅰ组,鸡临床症状和剖检变化不明显;肝的组织结构在1~2周呈现轻微损伤,3~6周则表现出明显的促进作用。试验Ⅱ组,鸡可见轻微临床症状和剖检变化;1~2周,肝的病理组织学变化较明显,其后随周龄增加,肝的组织结构逐渐恢复。试验Ⅲ组,鸡的临床症状和剖检变化最为明显;1~2周肝的病理组织学变化最为明显,肝细胞肿胀或空泡样变,肝血窦狭小。结果表明:饮水中添加硼100 mg/L对固始鸡肝的组织结构发育有轻微抑制和损伤作用;对后期(3~6周)则有明显改善和促进作用;高剂量硼(饮水中硼含量≥200 mg/L)对固始鸡(尤其是早期)肝的组织结构发育有明显的不良影响,甚至表现出明显的毒性作用。 诸亚平 李升和 顾有方关键词:硼 固始鸡 饮水硼对动物空肠发育的影响 被引量:12 2007年 由饮水途径添加硼,研究硼对动物空肠发育的影响。实验取240只1日龄固始鸡,随机分为4组,分别在饮水中添加0、100、200、400 mg/L硼,试验期42 d,每周末每组取试验鸡6只,颈静脉放血致死,取空肠Bouin液固定,制作石蜡切片,HE染色,显微观测、摄影。结果:100 mg/L组空肠绒毛和肠腺的长度显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)大于同日龄对照组。400 mg/L组空肠绒毛和肠腺的长度显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)小于同日龄对照组(P<0.01)。7~28日龄400 mg/L组空肠出现绒毛上皮细胞肿胀、结缔组织水肿、毛细血管扩张、肠腺囊肿等病变。实验表明:饮水添加100 mg/L硼对固始鸡空肠绒毛及肠腺发育有明显的促进作用;添加400 mg/L硼会引起机体硼中毒,对固始鸡空肠绒毛及肠腺发育有明显抑制和毒害作用,严重影响机体的消化吸收功能。 王珏 李升和 金光明 商常发 陈会良 顾有方关键词:硼 固始鸡 空肠 发育 鸡组织滴虫病的诊疗及病变观察 被引量:2 1999年 1997年5月阜阳郊区某养鸡户购进1500只蛋鸡,饲喂商品料,并按正常程序进行免疫接种,4周龄时发现少数鸡只出现食欲减少、羽毛蓬乱、双翅下垂、下痢等症状,发病156只,死亡86只。在当地兽医部门就诊,怀疑为大肠杆菌,使用肠炎1号饮水,效果不理想,改注... 朱茂英 顾有方关键词:组织滴虫病 诊疗 病变 一种犬日粮生产用造粒装置 本发明涉及宠物粮技术领域,公开了一种犬日粮生产用造粒装置,包括原料预处理组件,原料预处理组件包括超微粉机构以及混合机构;超微粉机构用于对原料进行超微粉处理,混合机构用于对超微粉后的原料进行混合,还包括料仓以及用于承接物料... 阮崇美 叶鹏飞 顾有方 胡倩倩 李秀 贺绍君 李静 刘德义 常倩倩文献传递 柔嫩艾美耳球虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因核酸疫苗的免疫保护效果 被引量:2 2013年 目的观察柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,E.tenella)丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine protease inhibitor,Serpin)基因核酸疫苗对E.tenella感染雏鸡的免疫保护效果。方法取14日龄雏鸡,随机分为7组:pVAX1-Serpin高剂量组(100μg/只)、pVAX1-Serpin中剂量组(50μg/只)、pVAX1-Serpin低剂量组(25μg/只)、pVAX1组(50μg/只)、E.tenella卵囊组(15日龄时,口服5 000个卵囊/只,不加强免疫)、未免疫攻虫对照组(0.1 ml PBS)和未免疫未攻虫对照组(0.1 ml PBS),除E.tenella卵囊组外,均经胸肌注射免疫,21日龄时加强免疫1次,28日龄时,除未免疫未攻虫对照组外,均经口感染1×104个E.tenella孢子化卵囊。攻虫后第8天剖杀,计算各组的存活率、平均增重、相对增重率、盲肠病变减少率、卵囊减少率及抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)。结果未免疫攻虫对照组和pVAX1组的存活率分别为75%和70%,其余各组的存活率均为100%。pVAX1-Serpin高、中剂量组、E.tenella卵囊组和未免疫未攻虫对照组的平均增重2均较未免疫攻虫对照组显著增加(P<0.05),其中pVAX1-Serpin高剂量组相对增重率2达95.26%;E.tenella卵囊组、pVAX1-Serpin高、中剂量组的盲肠病变记分明显低于pVAX1组和未免疫攻虫对照组(P<0.05),前两组病变减少率较高;各免疫组卵囊产量均较未免疫攻虫对照组显著下降(P<0.05),pVAX1-Serpin高剂量组卵囊减少率达67.04%;各免疫攻虫组ACI值均高于未免疫攻虫对照组,其中E.tenella卵囊组最高(181.23),pVAX1-Serpin高剂量组次之(166.26),而pVAX1-Serpin中、低剂量组和pVAX1组均小于160。结论高剂量pVAX1-Serpin对鸡E.tenella感染具有一定的免疫保护作用。 李文超 顾有方 杜玲 宫鹏涛 李建华 张西臣关键词:柔嫩艾美耳球虫 丝氨酸蛋白酶抑制剂 核酸疫苗 免疫保护