马永平 作品数:98 被引量:206 H指数:8 供职机构: 重庆医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 教育部“春晖计划” 重庆市教委科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 文化科学 更多>>
一种具有粘膜免疫佐剂活性的多肽及其在制备粘膜免疫佐剂中的用途 本发明公开了一种具有粘膜免疫佐剂活性的多肽及其在制备粘膜免疫佐剂中的用途。本发明多肽,它的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明多肽是良好的粘膜免疫佐剂,其粘膜免疫佐剂活性与大肠杆菌不耐热肠毒素LTB相当,同时,... 马永平PT8A的粘膜免疫佐剂活性初步研究 被引量:1 2017年 本研究发现位于大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(heat-labile enterotxin B subunit,LTB)的8肽(octapetptide,PT8A)具有一定的佐剂活性。我们用PT8A联合人手足口病病毒的VP1(EVP1)鼻腔免疫Balb/c小鼠,通过间接ELISA法检测小鼠血清中的特异性EVP1抗体滴度,检测结果显示PT8A+EVP1组相比PBS组和EVP1组有明显佐剂活性,初步验证了PT8A的佐剂活性。对PT8A和LTB蛋白的佐剂活性进行比较研究,结果显示,PT8A的佐剂活性明显弱于LTB,有待进一步提高。通过对PT8A免疫原性进行检测分析发现,PT8A的免疫原性明显减弱,初步确定PT8A在保留佐剂活性的同时自身免疫原性明显减弱,具有进一步开发为粘膜免疫佐剂候选分子的潜力。 王秋娟 陈思静 刘林 刘林 马永平敲减人MCHR2基因抑制CHO细胞的放射性配体受体结合能力及Ca^2+释放 被引量:1 2008年 研究人黑色素浓集激素受体2(MCHR2)基因特异的小发夹RNA(shRNA)真核表达载体pGenesil-1-MCHR2-shRNA对MCHR2表达及特征的影响.将pGenesil-1-MCHR2-shRNA转染到稳定表达人MCHR2基因的CHO细胞中,通过RT-PCR和Western印迹检测MCHR2表达的变化;放射性配体结合实验(RBA)检测受体最大结合容量Bmax及平衡解离常数Kd值的变化;钙流检测实验观察配体MCH刺激后单个细胞Ca^2+释放及MCH半数有效浓度EC50的变化,与转染pGenesil-1空载体组比较,pGenesil-l-MCHR2-shRNA能使MCHR2基因mRNA表达减少45.8%~66.4%;蛋白表达减少44.2%~81.0%;Bmax减少39.4%~78.7%,Kd值升高40.9%~81.9%;EC50升高114.8%~822.4%.MCHR2基因shRNA真核表达载体能有效抑制MCHR2基因的表达,减少Bmax、升高虬值及EC50,从而对MCHR2生物活性等特征产生影响。 袁成福 杨俊霞 刘革力 卜友泉 张琴 易发平 马永平 宋方洲关键词:基因表达 生物特征 双歧杆菌的分子生物学研究进展 被引量:3 2005年 双歧杆菌以其重要的生理功能在近几年成为研究的热点,其分子生物学的研究对它的应用具有重要意义。本文简述了双歧杆菌的特性及生理功能,重点综述了近年来有关双歧杆菌的基因操作、分类鉴定、表面分子结构和抗肿瘤作用方面的研究进展。 王勇 马永平 宋方洲关键词:双歧杆菌 质粒 表面分子 肽质量指纹谱鉴定蛋白质时生物信息学分析条件的优化 被引量:5 2008年 为了优化肽质量指纹谱(peptide mass fingerprint,PMF)鉴定蛋白质的生物信息学分析条件。将牛碳酸酐酶2(carbonic anhydrase-2,CAH2)和人热休克蛋白70s(Hsp70s)进行2-DE分离、酶解,肽段经过MALDI-TOFMS分析得到PMF数据。选择Swissprot、MSDB、NCBInr、Random等数据库和MASCOT与MS-Fit搜索引擎,以牛CAH2为模型优化搜索参数,结果表明:Swissprot是适合做蛋白PMF分析的数据库;主要参数最佳设置为:漏切位点数为1个,肽质量容错数为±1Da,同时肽质量类型选择平均分子质量比单同位素质量更便于候选蛋白的筛选。最后用人Hsp70s蛋白的PMF数据检验优化条件,结果表明,所选择的数据库及参数是可靠的。 彭咏波 马永平 夏永鹏 邱宗荫关键词:蛋白质 建设特色实验室,为教学改革服务 2004年 对近几年创建特色实验室的一些经验进行探讨,促进实验室的建设与发展,更好的为教学改革工作服务. 易发平 宋方洲 马永平关键词:教学改革 教学方法 医学教育 EGFP—pBABE逆转录病毒载体的构建及鉴定 2010年 目的构建表达增强绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)的EGFP—pBABE逆转录病毒载体并对其表达进行鉴定。方法从pEGFP—N3质粒上切下EGFP片段,连接到pBABE载体,构建EGFP—pBABE重组质粒;将该重组质粒转染到Fr67细胞后,荧光显微镜下观察EGFP的表达;收集逆转录病毒感染宫颈癌SiHa细胞后荧光显微镜下观察EGFP的表达。结果成功构建EGFP—pBABE重组质粒。该质粒转染PT67细胞24h后,荧光显微镜下可观察到EGFP的表达;用该重组质粒包装的逆转录病毒感染宫颈癌SiHa细胞36h后,在荧光显微镜下可观察到明显的EGFP表达。结论成功构建表达EGFP的EGFP—pBABE逆转录病毒载体,为进一步利用该载体制备逆转录病毒并观测逆转录病毒感染细胞的效率奠定了良好的实验基础。 刘革力 袁成福 张路渝 卜友泉 易发平 马永平 宋方洲关键词:逆转录病毒载体 "初免-吸引"免疫策略的研究进展 2021年 "初免-吸引"免疫策略是指经胃肠外疫苗初次免疫后,通过局部使用T细胞引诱剂,在病原体进入的主要部位如生殖道、气道和肠道等招募和建立组织驻留记忆性T细胞,可应用到病毒或细菌等感染黏膜引起的疾病中,建立长期黏膜免疫。此文就该免疫策略在病毒、细菌、衣原体及螺旋体感染性疾病领域的研究进展进行综述,以期为疫苗研发提供新的思路。 沈妍希(综述) 马永平关键词:免疫 记忆性T细胞 疫苗 人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染细胞系的建立 被引量:2 2007年 目的:构建人MCHR2真核表达载体,转染HEK293细胞,建立稳定转染细胞系.方法:采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和PCR鉴定后,脂质体转染法转染HEK293细胞,通过G418选择培养,建立稳定转染细胞系,RT-PCR,WesternBlot及免疫荧光法检测MCHR2的表达.结果:成功构建了pcDNA3.1-MCHR2真核表达载体并已稳定转入HEK293细胞,建立了稳定转染细胞系,成功地表达目的基因.结论:稳定转染细胞系的建立和基因表达为进一步研究MCHR2的功能提供了良好的实验基础. 杨俊霞 石华 魏丽丽 袁成福 陈济 易发平 马永平 宋方洲关键词:真核表达载体 转染 基因表达 仙台病毒载体对未成熟树突状细胞蛋白表达的影响 2007年 目的:研究仙台病毒载体对未成熟树突状细胞(DC)蛋白质表达的影响.方法:提取转染仙台病毒载体的树突状细胞和对照细胞的总蛋白,定量.双向凝胶电泳分离蛋白质组分,胶体银染显色,PDQuest进行图像分析后选取差异点,胶内酶解后MALDI-TOFMS进行肽指纹图谱鉴定.结果:图像分析结果显示,处理组2-DE图缺少了40个以上的蛋白点,对其中明显没有表达的5个蛋白点进行了鉴定.结论:仙台病毒载体感染未成熟树突状细胞可引起蛋白表达的减少. 易发平 张平波 郭风劲 马永平 宋方洲关键词:树突状细胞 蛋白质组