严芳
- 作品数：12 被引量：73H指数：6
- 供职机构：汕头大学理学院生物学系更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金汕头市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学医药卫生更多>>
- 凡纳滨对虾血蓝蛋白的细菌凝集活性被引量：25
- 2006年
- 以凡纳滨对虾（Litopenaeaus vannarnei）为研究对象，运用亲和层析、PAGE、SDS-PAGE、Western-blotting和细菌凝集实验等方法探索凡纳滨对虾血蓝蛋白的细菌凝集活性。结果发现，血蓝蛋白对副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）、溶藻酸弧菌（Vibrio alginolyticus）、河弧菌（Vibrio fluvialis）、哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）、嗜水气单胞菌（Agromona hydrophila）和金黄色葡萄球菌（Stphylococcus aureus）等6种虾类致病菌具有凝集活性，其凝集活性大小为0．27-1．08mg／L，其中对副溶血弧菌和溶藻酸弧菌凝集活性最大，是哈维氏弧菌的4倍。在此基础之上，选取α-D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、D-山梨糖、蔗糖、麦芽糖、α-D-乳糖、甘露醇和N-乙酰神经氨酸等9种糖考察其对血蓝蛋白细菌凝集活性的影响。结果显示，血蓝蛋白的细菌凝集活性可被α-D-葡萄糖和N-乙酰神经氨酸所部分抑制和全部抑制，其最低抑制浓度范围为50～100mmol／L。由此推测，血蓝蛋白确实具有细菌凝集活性，这对进一步研究血蓝蛋白的抗菌机理具有重要意义。
- 章跃陵林伯坤陈俊胡忠黄通旺严芳
- 关键词：凡纳滨对虾血蓝蛋白细菌凝集活性免疫
- 急性期反应蛋白的研究进展被引量：8
- 2008年
- 感染、炎症、组织损伤等应激原导致机体血浆中多种蛋白质浓度在短期内迅速变化,这些蛋白质被称为急性期反应蛋白.本文主要介绍了急性期反应蛋白的分类、生物学功能和合成的调控机制以及近年来相关的应用和研究现状,并对研究的发展趋势做了进一步分析.
- 陈锋菊严芳
- 关键词：急性期反应蛋白急性期反应细胞因子C-反应蛋白
- 凡纳滨对虾血蓝蛋白与病原菌凝集作用靶标的鉴定被引量：7
- 2008年
- 血蓝蛋白是一种具有多种非特异性免疫学活性的多功能蛋白,以前的研究发现,血蓝蛋白具有凝集活性.本研究采用凝集抑制实验和亲和蛋白质组学等方法探索凡纳滨对虾血蓝蛋白与病原菌的凝集作用靶标.结果显示,大肠杆菌K12和副溶血弧菌外膜蛋白可以抑制血蓝蛋白对7种细菌的凝集活性,其中大肠杆菌K12中2种分子质量分别为16kD、18kD(命名为p16、p18)的外膜蛋白可以与血蓝蛋白发生特异性的结合,经MALDI-TOF/MS鉴定,p16、p18分别与大肠杆菌外膜蛋白OmpC、OmpX具有高度同源性.尤其是与大肠杆菌K12野生菌株相比,血蓝蛋白对ΔOmpX的凝集特异性明显降低,后者仅为前者的25%.由此推测,OmpX应为血蓝蛋白与病原菌的凝集作用靶标.
- 章跃陵严芳樊大军蒋瑞萍胡忠李远友
- 关键词：血蓝蛋白凝集活性
- 凡纳滨对虾血清中直接与病原菌相结合的主要蛋白的鉴定被引量：15
- 2008年
- 以凡纳滨对虾为研究对象，将其血清分别与溶藻酸弧菌，哈维氏弧菌，嗜水气单胞菌和金黄色葡萄球菌等4种病原菌孵育，采用亲和蛋白质组学和Western-blotting等分子生物学方法纯化、鉴定和确证其中可与病原菌直接结合的蛋白。结果发现，与对照组相比4种病原菌与虾血清孵育5h后均可与对虾血清中分子质量约为75000（p75）的蛋白相结合，而孵育15h后既可与p75相结合，还可与分子质量约为77000（p77）的蛋白以及0～4种不同分子质量的蛋白相结合。经MALDI-TOF／MS分析和Mascot搜索引擎检索，p75和p77蛋白分别与凡纳滨对虾中分子质量约为75000、77000的2个血蓝蛋白亚基具有显著一致性。尤其是p75蛋白还可与兔抗血蓝蛋白75000亚基抗体发生特异性结合。由此推断，凡纳滨对虾血清中与病原菌直接结合的主要蛋白为血蓝蛋白，提示血蓝蛋白全蛋白可能具有抗菌活性。
- 章跃陵林智建李祖江严芳李远友叶向群
- 关键词：凡纳滨对虾血蓝蛋白抗菌活性
- 锯缘青蟹血蓝蛋白抑菌活性及其作用靶标被引量：2
- 2013年
- 采用抑菌实验和抑菌抑制实验等方法探索锯缘青蟹(Scylla serrata)血蓝蛋白抑菌活性及其作用靶标。结果显示,锯缘青蟹血蓝蛋白对溶藻酸弧菌(Vibrio alginolyticus)、大肠杆菌K12(Escherichia coli K12)等细菌具有抑菌活性,其对大肠杆菌K12的抑菌活性可被大肠杆菌K12外膜蛋白(Outer membrane protein,Omp)所抑制,尤其是血蓝蛋白对大肠杆菌K12外膜蛋白敲除菌ΔOmpX、ΔOmpC、ΔOmpT、ΔTsx、ΔFadL和ΔOmpW的抑菌活性显著降低,与对照组相比,具有极显著性(P<0.01)和显著性差异(P<0.05)。由此说明,锯缘青蟹血蓝蛋白具有抑菌活性,其抑菌作用靶标可能为多种外膜蛋白。
- 陈传道刘瑶黄玉活严芳伦镜盛章跃陵
- 关键词：锯缘青蟹血蓝蛋白抑菌活性
- 凡纳滨对虾血蓝蛋白酚氧化酶活性的研究被引量：26
- 2008年
- 试验结果表明,凡纳滨对虾血蓝蛋白在胰蛋白酶诱导下可表现出一定的酚氧化酶活性,与对照组相比,其酚氧化酶活力单位显著上升。同时,其活性可被D-半乳糖、α-葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、甘露醇和N-乙酰神经氨酸不同程度地抑制,其抑制率分别为67%、100%、33%、33%、67%和100%。血蓝蛋白与胰蛋白酶孵育后经SDS-PAGE分析和L-Dopa显色,其75 kDa单体呈明显的棕褐色,添加抑制剂N-乙酰神经氨酸之后,其显色强度显著减弱。由此进一步证实凡纳滨对虾血蓝蛋白在胰蛋白酶诱导下确实具有酚氧化酶活性,其活性可被不同的糖所抑制,其发挥活性的单体为75 kDa单体。
- 严芳章跃陵罗活强胡忠黄通旺叶向群
- 关键词：凡纳滨对虾血蓝蛋白酚氧化酶活性
- 甲壳动物血蓝蛋白免疫学活性及其作用机制研究
- 目前我国是世界上最大的甲壳动物(虾蟹)集约化养殖生产国。然而,与国际虾蟹养殖业相比,我国商业化的虾蟹养殖整体效益较低,可持续发展前景不容乐观。究其原因,主要与虾蟹病害和生物安全等有关。为此,学者们认为选育优质、抗逆优良虾...
- 严芳
- 关键词：甲壳动物血蓝蛋白免疫学活性病害防治分子机制
- 5种凡纳滨对虾血蓝蛋白的糖基化修饰及功能对比分析被引量：10
- 2009年
- 血蓝蛋白是近年来发现的一种多功能蛋白,但其功能多样性的分子基础尚不清楚.本研究采用亲和层析、糖含量测定、凝集素印迹等技术在凡纳滨对虾血清中发现5种糖含量各不相同的血蓝蛋白:HMC、HMCb-、HMCb、HMCs-和HMCs,其中HMCs-糖含量最高,HMCb最低,前者约为后者的5倍.继而运用非特异性免疫学实验技术对其功能进行对比分析.结果显示,不同糖基化血蓝蛋白的免疫学活性不同,HMCs-具有较强的红细胞凝集活性和酚氧化酶活性,HMCb-和HMC分别具有较强的细菌凝集活性和溶血活性.特别是当血蓝蛋白糖基被氧化后,5种血蓝蛋白的凝集活性、溶血活性全部丧失,酚氧化酶活性下降约11～28倍.由此推测,血蓝蛋白糖基修饰多样性可能是其功能多样性的分子基础之一.
- 章跃陵邢立刚严芳黄锡望杜志恒乔杰林仲旸李远友
- 关键词：血蓝蛋白糖基化多样性分子基础
- 无脊椎动物免疫分子的多态性被引量：4
- 2010年
- 一般认为,非特异性免疫分子由于胚系基因种类有限而不具备多态性.但近年来人们发现,脊椎动物γ/δT细胞受体、B1细胞受体、某些固有免疫成分,以及无脊椎动物的某些免疫球蛋白超家族(immunoglobulin superfamily,IgSF)分子、抗菌肽和模式识别受体(pattern recognition receptors,PRR)等同样具有较高程度的多态性.与特异性免疫分子相似,其多态性形成机制主要为基因组水平的基因重排、单核苷酸多态性、DNA突变和mRNA水平的外显子可变剪接.该多态性的出现可能是无脊椎动物的一种适应性进化,其应为低等生物特异性识别和防御不同病原微生物感染的分子基础.本文就无脊椎动物免疫分子多态性的最新研究进展及其可能的形成机制与意义进行概述.
- 章跃陵赵贤亮严芳
- 关键词：无脊椎动物免疫分子多态性
- 锯缘青蟹血蓝蛋白酚氧化酶活性研究被引量：5
- 2009年
- 以锯缘青蟹Scylla serrata为研究对象,运用亲和层析、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、十二烷基璜酸钠(SDS)-PAGE、Western-blot以及酚氧化酶活性测定等方法研究了锯缘青蟹血蓝蛋白的酚氧化酶活性以及几种金属离子对其酚氧化酶活性的影响.研究结果表明,锯缘青蟹血蓝蛋白在没有任何诱导物作用的情况下表现出酚氧化酶活性,胰蛋白酶对此活性有轻微抑制作用;与对照组相比,Ca2+和Cu2+能使血蓝蛋白酚氧化酶活性显著增强,增强率分别为281%和273%;EDTA可显著抑制Cu2+对血蓝蛋白酚氧化酶活性的激活作用,抑制率达78.5%.由此可知,锯缘青蟹血蓝蛋白确有酚氧化酶活性,且受Ca2+、Cu2+等金属离子作用的影响.
- 陈锋菊严芳杨平
- 关键词：锯缘青蟹血蓝蛋白酚氧化酶活性
