付三雄
- 作品数：103 被引量：214H指数：11
- 供职机构：江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金引进国际先进农业科技计划国家油菜产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术经济管理更多>>
- 甘蓝型油菜CRABS CLAW基因克隆及其RNA干扰载体的构建被引量：2
- 2015年
- CRABS CLAW(CRC)转录因子是YABBY基因家族成员,在植物花器官发育过程中起重要作用。为进一步研究CRC转录因子在调控油菜花器官发育过程中的作用,本研究以甘蓝型油菜品种宁油10号花蕾RNA为材料,通过反转录PCR克隆到1个580 bp长度的CRC基因,并利用p Hurricane中间载体构建CRC基因的反向重复序列表达框,将CRC基因片段以正向的方式连接在1个可剪切的内含子的5'末端,以反向的方式连接到该内含子的3'末端;然后将Ca MV35S启动子序列和CRC基因的反向重复表达框再克隆到植物双元载体p CAMBIAI1390的p UC18多克隆位点,构建了干扰表达载体p A6-CRCi,经过酶切鉴定和测序分析,所构建的载体正确。
- 周晓婴付三雄陈松张超戚存扣
- 关键词：油菜RNA干扰载体
- 一种黄籽甘蓝型油菜种质的创建方法
- 本发明属于作物新种质创建领域，具体的说是属于黄籽甘蓝型油菜新种质的创建方法的发明。涉及十字花科芸薹属内的远缘杂交技术和常规田间杂交技术。选择具有黄籽性状的白菜（染色体组为AA，n＝10）和黄籽性状的甘蓝（染色体组为CC，...
- 龙卫华浦惠明高建芹胡茂龙戚存扣张洁夫陈松陈峰顾慧付三雄
- 文献传递
- 甘蓝型油菜种子中G3PDH基因特异性表达的ihpRNA载体构建被引量：2
- 2014年
- 为验证甘蓝型油菜甘油-3-磷酸脱氢酶基因(G3PDH)的功能,采用PCR的方法克隆BnG3PDH557bp的干扰靶序列,将其正向片段插入到中间载体pHurricane的NotI酶切位点、反向重复序列插入到XhoI酶切位点,构建ihpRNA载体反向重复框,BamHI、EcoRI酶切下反向重复框后组装到由种子特异性表达的napin启动子驱动的pCAMBIAl390植物表达载体上。结果表明:PCR扩增产物、限制性内切酶酶切产物与预期片段长度相符。其中,1.7kb的片段包括正向干扰靶片段和部分AtFad2内含子序列,2.3kb大小的片段是干扰反向重复框。种子特异性表达的BnG3PDHihpRNA载体成功构建。
- 张超付三雄陈松李大雄戚存扣
- 关键词：甘蓝型油菜
- 油菜抗咪唑啉酮类除草剂基因BnALS1R等位基因特异PCR标记的开发与应用被引量：13
- 2013年
- 油菜抗咪唑啉酮类除草剂基因BnALS1R是从抗性突变体M9中克隆获得,抗性基因BnALS1R与野生型基因BnALS1存在1处SNP,即乙酰乳酸合酶第638位丝氨酸残基被天冬酰胺酸替代。为获得油菜抗除草剂基因BnALS1R的分子标记,根据该处点突变,结合获得的BnALS3与BnALS1序列,开发30条等位基因特异PCR(allele-specific PCR,AS-PCR)引物,采用筛选出的3条AS-PCR引物在F2、BC1和BC2群体中进行PCR扩增。结果表明,该标记有效检测出群体中存在的3种基因型,其分离比分别为1∶2∶1、1∶1、1∶1,均遵循单基因遗传规律。应用该标记对获得的抗性恢复系进行PCR扩增,结果发现所有抗性恢复系均能扩增出抗性基因BnALS1R目的条带,表明3条标记引物可应用于抗性基因的检测。AS-PCR标记的获得将促进以抗性基因进行油菜抗除草剂分子标记辅助选择育种。
- 胡茂龙龙卫华高建芹付三雄陈锋周晓婴彭琦张维浦惠明戚存扣张洁夫陈松
- 关键词：油菜乙酰乳酸合成酶
- 抗磺酰脲类除草剂基因用于转基因油菜筛选标记
- 2023年
- 本研究克隆了来自抗磺酰脲类(SU)除草剂油菜种质M342的ALS基因,并用于油菜遗传转化的筛选标记,成功获得转基因耐除草剂油菜植株。研究发现油菜下胚轴外植体愈伤及不定芽的诱导对除草剂氯磺隆高度敏感,大于5 nm浓度的氯磺隆能完全抑制油菜下胚轴愈伤和不定芽的诱导。在甘蓝型油菜的遗传转化中,筛选剂氯磺隆的有效使用浓度范围比较广,从5~100 nm均可以用来筛选抗性愈伤和抗性芽。用10~20 nm的氯磺隆作筛选剂,具有较高的抗性芽诱导率和转基因阳性率。获得的转基因油菜表现出抗磺酰脲类除草剂的能力并能遗传。
- 陈松浦惠明彭琦张维周晓婴胡茂龙付三雄张洁夫
- 关键词：甘蓝型油菜
- 甘蓝型油菜授粉功能缺失突变体及其野生型柱头差异蛋白研究被引量：6
- 2012年
- 【目的】基于蛋白质组学水平分析甘蓝型油菜野生型和授粉功能缺失突变体的柱头差异蛋白。【方法】运用双向电泳技术研究甘蓝型油菜柱头授粉功能缺失的突变体FS-M1及其野生型(宁油10号)柱头差异蛋白的表达,结合质谱(MALDI-TOF-TOF/MS)分析与蛋白质数据检索技术,鉴定甘蓝型油菜野生型柱头上调表达蛋白的性质和功能。【结果】获得了甘蓝型油菜野生型柱头显著上调且可鉴定的蛋白有33个,包括抗胁迫/防御、氧化还原反应平衡调节、碳水化合物代谢、蛋白质水解、蛋白折叠、氨基酸和氮代谢、核苷酸代谢等7类功能蛋白。【结论】甘蓝型油菜野生型柱头中上调表达蛋白功能广泛,这些表达蛋白可能与甘蓝型油菜柱头授粉功能的调控有关。
- 李春宏付三雄戚存扣
- 关键词：甘蓝型油菜柱头双向电泳质谱分析
- 油菜抗嘧啶水杨酸类除草剂基因及其应用
- 提供了一种油菜抗嘧啶水杨酸类除草剂基因及其应用，还提供了耐受嘧啶水杨酸类除草剂的油菜植物及其部分。
- 胡茂龙浦惠明龙卫华高建芹张洁夫陈松程丽彭琦陈锋周晓婴张维付三雄王晓东
- 文献传递
- 沿海旱作地区杂交油菜宁杂1818高产高效配套栽培技术研究被引量：2
- 2017年
- 以宁杂1818为材料,在沿海旱作区开展密度、氮肥总量、氮肥运筹、薹肥施用时间和摘薹试验,研究其对产量及其构成因素的影响。结果表明,油菜籽粒产量随密度和氮肥总量增加呈先升后降趋势,宁杂1818移栽密度为82 500株/hm^2时产量可达4 657.75 kg/hm^2。移栽密度为75 000株/hm^2、氮肥投入总量为300 kg/hm^2时产量最高,为4 830.50 kg/hm^2。氮肥基(苗)肥∶腊肥∶薹肥配比为6∶1∶3时,苗期和越冬期植株性状最优;配比为5∶2∶3时,单株角果数、每角粒数及产量最高。随着薹肥施用时间的推迟,籽粒产量下降。薹高5 cm时施肥产量最高,为4 548.30 kg/hm^2,当薹高大于25 cm时,产量明显下降。在机直播或育苗移栽栽培模式下,摘薹比不摘薹增效8 534.72~9 522.90元/hm^2,增效51.87%~61.74%。沿海旱作区宁杂1818适宜移栽密度为67 500~97 500株/hm^2,氮肥总量控制在300 kg/hm^2,基(苗)肥∶腊肥∶薹肥配比为5∶2∶3,在薹高5~15 cm时施薹肥可获得最佳产量。宁杂1818摘薹生产可大幅提高种植效益。
- 高建芹顾圣林陈松张洁夫付三雄
- 关键词：氮肥运筹薹肥摘薹
- 低剂量<Sup>60</Sup>Co-γ射线处理油菜萌动种子创建高油酸新种质的方法
- 本发明公开了一种低剂量<Sup>60</Sup>Co-γ射线处理油菜萌动种子创建高油酸新种质的方法，属于植物育种方法。是将普通油菜的干燥种子先置于25℃光照培养箱进行萌动处理，待种子胚根露白后用<Sup>60</Sup>...
- 浦惠明龙卫华高建芹张洁夫陈松胡茂龙戚存扣陈新军陈锋顾慧付三雄傅寿仲
- 文献传递
- 甘蓝型油菜GPDH基因克隆、表达分析及植物过表达载体构建被引量：4
- 2019年
- 【目的】克隆甘蓝型油菜的甘油-3-磷酸脱氢酶(GPDH)基因(BnGPDH),分析其表达特性并构建植物过表达载体,为研究该基因在油菜种子三酰甘油(TAG)合成和积累中的作用机制提供理论参考。【方法】以甘蓝型油菜H105为材料,采用同源克隆技术克隆与At3G07690同源的BnGPDH基因,对其进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测BnGPDH基因在甘蓝型油菜不同组织[根、茎、叶、蕾、花及花后(DAF)7、14、21、30和40 d角果皮和种子]及高、低油含量自交系角果皮和种子中的表达情况,并将克隆获得的BnGPDH基因连接至携带napin启动子的pCAMBIA1390-NAPIN载体上构建植物过表达载体。【结果】克隆获得的BnGPDHc2-1和BnGPDHc2-2基因编码区(CDS)长度均为1338 bp,编码445个氨基酸,其编码蛋白仅有5个氨基酸差异,均具有NAD_Gly3P_dh_N和NAD_Gly3P_dh_C结构域,定位于细胞质,分别与白菜细胞质型GPDH蛋白(XP_009147040.1)和甘蓝细胞质型GPDH蛋白(XP_013585317.1)的氨基酸序列具有较高相似度,对应的相似度为100.00%和99.78%,且二者与双子叶植物GPDH蛋白亲缘关系较近,与单子叶植物GPDH蛋白亲缘关系较远。BnGPDHc2-1和BnGPDHc2-2基因在甘蓝型油菜不同组织中均有表达,且表达模式总体上相似,在21DAF和30DAF种子中的表达量显著高于其他组织部位(P<0.05,下同),表明21DAF和30DAF是油菜种子TAG合成和积累的高峰期,但在角果生长发育不同时期这2个基因的表达略有不同,且在茎、蕾、种子(7DAF、21DAF、30DAF和40DAF)和角果皮(7DAF和40DAF)中,BnGPDHc2-1基因的表达量均显著高于BnGPDHc2-2基因,而在14DAF角果皮中BnGPDHc2-2基因的表达量显著高于BnGPDHc2-1基因。21DAF种子中BnGPDHc2-1基因在3个高油含量自交系中的表达量显著高于3个低油含量自交系,BnGPDHc2-2基因在高油含量自交系IL130和IL594中的表达量显著高于3个低油含量自交系;在30DAF种子中,BnGPDHc2-1和BnGPDHc2-
- 张超张超付三雄周小婴黄莎杨克相戚存扣
- 关键词：甘蓝型油菜生物信息学
