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IL-1β对兔关节软骨细胞MMP-1/-13mRNA表达和NO的影响被引量：14: 2008年; 目的观察白介素-1β(IL-1β)对体外培养的兔关节软骨细胞基质金属蛋白酶-1/-13(MMP-1/-13)基因表达的调节作用和对一氧化氮(NO)的影响,以了解骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨损伤的机制。方法将体外培养的兔关节软骨细胞随机分为5组,每组有3个样本,第1组为空白对照组,第2,3,4,5组分别加入10ng/mL的IL-1β,作用时间分别为8,16,24,36h。采用实时荧光定量PCR(real-timePCR)的方法,观察兔关节软骨细胞MMP-1/-13基因的表达情况,以空白组为对照,比较不同时间段软骨细胞MMP-1/-13基因表达,并收取培养细胞上清液测定一氧化氮(NO)含量,比较各组变化。结果正常兔关节软骨细胞具有MMP-1/-13基因表达,但是表达量较低,而各实验组MMP-1/-13mRNA都明显增高。尤其是MMP-1mRNA增高明显,在36h内随着时间的延长逐渐增高,且各组间差异具有统计学意义(P<0.05);MMP-13mRNA增高后维持在高水平,但各组间无明显差异。NO的含量也随着时间的延长而逐渐增高。结论IL-β1随着时间延长,正向调节兔关节软骨细胞MMP-1/-13mRNA表达,并能促进NO的释放增加,从而使它们在OA软骨破坏的机制中发挥重要作用,但对MMP-1/-13具体调节机制不尽相同。; 任志伟俞永林杨丰建乔健姜建元肖保国王静; 关键词：软骨细胞白介素-1Β 实时荧光定量PCR

骨关节炎相关性细胞因子研究进展被引量：16: 2005年; 骨关节炎是由于软骨细胞合成和分解代谢间的平衡失调,造成软骨基质的丢失和软骨结构的破坏。细胞因子作为调节者,通过各种机制调节软骨细胞的功能活动,在关节软骨退变中起了重要作用,该文就相关性因子作一综述。; 任志伟俞永林姜建元; 关键词：细胞因子骨关节炎关节软骨退变细胞合成软骨结构软骨基质

洛索洛芬钠结合运动训练治疗膝骨关节炎关节功能改善分析被引量：11: 2007年; 目的评价洛索洛芬钠联合膝关节功能训练对膝骨关节炎关节功能改善的状况。方法选择124例膝关节骨关节炎病人,随机分为2组,一组(对照组)接受口服洛索洛芬钠(乐松)治疗2周,每日3次,每次60mg。另一组(联合治疗组)持续进行膝关节功能训练8周,在最初2周同样口服洛索络芬钠,每日3次,每次60mg。分别在治疗至2周时和8周时评定2组患者膝关节功能改善之间的差异。结果治疗2周后对2组患者膝关节功能评定:对照组优(A)4例,良(B)52例,可(C)5例,差(D)1例;联合治疗组优(A)3例,良(B)54例,可(C)4例,差(D)1例。经CMHχ2检验两组间差别无显著性意义。治疗8周后再次对2组患者膝关节功能评定:对照组不少病人膝关节功能出现减退,疗效评定优(A)1例,良(B)33例,可(C)29例,差(D)1例;而联合治疗组膝关节功能评定优(A)3例,良(B)52例,可(C)10例,差(D)1例。经CMHχ2检验两组之间的膝关节功能评定差异有显著性意义,联合治疗组关节功能改善明显优于对照组。结论口服洛索洛芬钠结合运动训练治疗膝骨关节炎能有效改善关节功能。与单纯口服洛索洛芬钠比较,关节功能改善更明显。; 俞永林杨丰建任志伟洪晓亮; 关键词：洛索洛芬钠骨关节炎膝关节

基质金属蛋白酶-1/13与信号通路激酶ERK1/2在兔骨关节炎软骨中的表达被引量：10: 2007年; 目的利用家兔膝关节前交叉韧带切断(ACLT)及内侧半月板前1/3切除的方法制作骨关节炎(OA)模型,测定关节炎发病的不同时期,关节软骨中基质金属蛋白酶-1(MMP-1),基质金属蛋白酶-13(MMP-13)以及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)蛋白表达水平的变化情况,探索它们之间的变化规律及关系。方法实验组家兔30只行ACLT及内侧半月板前1/3切除术造模,分别于术后4w、8w、12w处死10只,假手术对照组家兔10只于术后12w处死。进行股骨髁关节软骨退变的大体评分;取退变的软骨组织,用Westernblot印记杂交方法测定软骨组织中MMP-1,MMP-13和ERK1/2的蛋白表达水平。结果ACLT及内侧半月板前1/3切除术后4w即可见软骨退变,8w和12w时退变进一步加重,对照组无明显软骨退变,不同组动物关节软骨评分差异有统计学意义。MMP-1和ERK1/2的蛋白表达在正常对照组水平均较低,造模4w开始升高,到第8w及第12w持续升高;而MMP-13在造模4w时表达开始升高,造模第8w时持续升高,但在造模第12w时MMP-13的蛋白表达下降。结论家兔膝关节ACLT及内侧半月板前1/3切除制作OA模型的方法简便可行,MMP-1和MMP-13在骨关节炎的发病过程中有不同程度的升高,可以作为OA研究的评价指标。本实验结果提示,在OA发展的过程中,MMP-1和MMP-13的表达不平行,两者上游信号调控通路可能存在差异。蛋白激酶ERK1/2的表达水平从造模第4w开始持续升高,说明ERK1/2信号转导通路在骨关节炎发病过程中持续发挥作用。; 杨丰建俞永林夏军任志伟乔健; 关键词：骨关节炎基质金属蛋白酶软骨关节前交叉韧带蛋白激酶类

丝裂酶原活化蛋白激酶激酶1／2抑制对家兔关节软骨保护作用的研究被引量：2: 2008年; 目的评价丝裂酶原活化蛋白激酶（mitogen—activated protein kinase，MAPK）信号转导通路中MAPK激酶1／2（MEKI／2）在骨关节炎发病过程中的作用。方法新西兰家兔30只，制作OA模型，随机分成3组，每组10只。从造模术后第4天开始，第1组和第2组分别注射100μmol／L和40μmol／L的PD98059，第3组注射PBS液体作为安慰剂对照组，每周2次。另取10只家兔，正常关节内注射PBS液体作为正常对照组。8周后处死动物，进行股骨髁关节软骨退变的大体评分。用Western Blot印记杂交法测定软骨组织中ERK1／2以及磷酸化ERK1／2的表达。用实时定量PCR方法测定基质金属蛋白酶-1／13（MMp-1／13）的mRNA表达水平。结果与使用PBS的安慰剂对照组相比，使用PD98059的关节软骨破坏明显减轻。磷酸化的ERK1／2在100μmol／LPD98059干预组明显低于40μmol／L干预组和安慰剂对照组。而MMP-1／13的mRNA表达在不同浓度的干预组均低于安慰剂对照组。结论MAPK信号转导通路参与了骨关节炎关节软骨破坏的病理过程。MEK1／2选择性阻滞剂PD98059可以在关节炎动物活体内有效抑制关节炎软骨破坏的程度，该作用可能与其有效抑制ERK1／2的磷酸化激活有关。; 夏军俞永林杨丰建任志伟乔健王静; 关键词：基质金属蛋白酶类蛋白激酶抑制剂

MAPKs通路在兔骨关节炎软骨细胞表达MMP-1/-13中作用的研究: 背景：　　骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种慢性、退变性关节疾病,是老年人最常见的关节疾病。OA以中老年患者多见,女性多于男性。60岁以上的人群中患病率可达50％,75岁的人群则达80％。随着老龄社...; 任志伟; 关键词：骨关节炎软骨细胞细胞表达; 文献传递

运动训练结合玻璃酸钠治疗膝关节骨性关节炎患者关节功能改善分析被引量：14: 2007年; 目的:评价膝关节功能训练联合玻璃酸钠注射液(施沛特)对膝关节骨性关节炎患者关节功能改善的状况。方法:选择92例膝关节骨性关节炎患者,随机分为2组,一组接受玻璃酸钠注射液膝关节内注射治疗,每周1次,连续5次为1疗程。另一组同样完成1疗程的玻璃酸钠注射液膝关节内注射治疗,但在完成第2次玻璃酸钠注射液关节内注射时开始膝关节功能训练,功能训练持续6个月,评价两组患者膝关节功能改善的差异。结果:膝关节内注射玻璃酸钠注射液联合膝关节功能训练组在改善膝关节功能方面优于单纯膝关节内注射玻璃酸钠注射液组。结论:膝关节内注射玻璃酸钠注射液联合膝关节功能训练能够对膝关节骨性关节炎起到温和持久的关节功能改善作用。; 俞永林任志伟杨丰建洪晓亮; 关键词：玻璃酸钠注射液骨性关节炎膝关节

兔关节软骨细胞的分离培养及生物学特征被引量：6: 2006年; 目的探讨兔关节软骨细胞分离培养的方法和生物学特性。方法从4周龄新西兰白兔关节分离培养软骨细胞,倒置显微镜下观察原代及传代培养的细胞形态学变化,并计数绘制生长曲线。测定细胞冻存复苏后的存活率。用甲苯胺蓝染色和免疫细胞化学法了解葡萄糖胺多糖(GAGs),Ⅱ型胶原的合成情况并鉴定细胞。结果成功建立体外培养兔关节软骨细胞的实验方法。原代培养的软骨细胞呈多角形,传代3次后出现反分化。形态学、免疫化学染色显示细胞培养3代以内可以保持表型的稳定,冷冻复苏存活率为92%。结论本文建立的体外培养关节软骨细胞的方法简单可行。体外培养的兔软骨细胞表型能保持3代稳定,具有良好的生物学活性,可用于实验研究,可经深低温冷冻保存。; 俞永林任志伟乔健杨丰建肖保国金慰芳王静; 关键词：关节软骨软骨细胞细胞培养

兔骨关节炎模型的建立以及关节炎软骨组织中MMP-1/-13的表达被引量：23: 2007年; 目的评价家兔膝关节前交叉韧带切断(ACLT)及内侧半月板前1/3切除制作骨关节炎(OA)模型方法的可行性,同时探索关节炎发病的不同时期,关节软骨中基质金属蛋白酶(MMP)-1,MMP-13的基因表达、蛋白表达水平的变化情况。方法实验组家兔30只行ACLT及内侧半月板前1/3切除术造模,分别于术后4周、8周、12周处死10只,假手术对照组家兔10只于术后12周处死。进行股骨髁关节软骨退变的大体评分;取退变的软骨组织,用实时定量PCR(Real-time PCR)及Western blot印记杂交方法测定软骨组织中MMP-1和MMP-13的mRNA和蛋白表达水平。结果ACLT及内侧半月板前1/3切除术后4周即可见软骨退变,8周和12周时退变进一步加重,对照组无明显软骨退变,不同组动物关节软骨评分有统计学差异。MMP-1的mRNA表达和蛋白表达在正常对照组水平均较低,造模4周开始升高,到第8周及第12周持续升高,且mRNA表达和蛋白表达升高的趋势相同;MMP-13在造模4周时表达开始升高,mRNA表达和蛋白表达趋势相同,造模第8周时持续升高,但在造模第12周时MMP-13mRNA表达和蛋白表达下降。结论家兔膝关节ACLT及内侧半月板前1/3切除制作OA模型的方法简便可行,MMP-1和MMP-13在骨关节炎的发病过程中有不同程度的升高,可以作为OA研究的评价指标。本实验结果提示,在OA发展的过程中,MMP-1和MMP-13的表达不平行,二者调控通路可能存在差异。MMP-13的mRNA表达的变化趋势与其蛋白水平的变化趋势相符合,说明引起MMP-13在OA病程中晚期下降的调控发生在翻译前水平。; 杨丰建俞永林乔健夏军任志伟王静; 关键词：骨关节炎基质金属蛋白酶关节软骨

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任志伟

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