余招焱
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 小鼠microRNA-150慢病毒过表达载体及抑制载体的构建及鉴定
- 2014年
- 目的构建microRNA-150慢病毒过表达载体及抑制载体。方法设计针对microRNA-150前体的过表达基因片段及针对microRNA-150成熟体的反义片段,应用基因重组技术将目的基因片段克隆到pWPI慢病毒载体中,并进行DNA测序鉴定重组克隆。结果菌落PCR筛选鉴定出构建正确的慢病毒载体,DNA测序证实插入的基因序列正确。结论成功构建microRNA-150慢病毒过表达载体及抑制载体,为研究microRNA-150在肝再生中的作用及其机制提供了稳定的细胞转染载体。
- 余招焱白燕南张涛曾勇
- 关键词：慢病毒载体MICRORNA
- 经心脏逆行置管灌注法在小鼠原代肝细胞分离中的应用被引量：2
- 2014年
- 目的观察采用经心脏逆行置管灌注肝脏的方法分离小鼠原代肝细胞的效果。方法对传统的分离原代肝细胞方法(Seglen两步胶原酶灌注法)进行改良,即从小鼠右心房的裂口处经肝上下腔静脉向下方置管,并以输液器滴注含体积分数10%胎牛血清的胶原酶灌注液进行肝脏灌注。评价此法与传统方法的置管成功率及所得肝原代细胞的数量及活力。结果改良组总的置管操作成功率高达95%,且在一次置管成功率上改良组高于传统组(94.7%vs.68.8%,P<0.05)。改良组小鼠肝脏灌注均匀,肝细胞产量高达1.07×106/g小鼠体质量,细胞活力平均为92.16%,两者均高于传统组(分别为0.99×106/g小鼠体质量及86.44%,P<0.05或P<0.01)。结论经心脏逆行置管灌注法分离小鼠原代肝细胞简便易学,重复性高,且能保证分离所得的肝细胞产量和质量。
- 余招焱白燕南张涛吴泓曾勇
- 关键词：原代肝细胞
