侯丽丽
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽高校省级科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Bim在黑色素瘤细胞内质网应激状态中的异常调控及作用
- 背景及目的:很多实体肿瘤包括黑色素瘤对治疗的耐受或者在反复治疗的情况下引起的获得性耐受成为临床治疗的重大障碍,这很大程度上是由于肿瘤细胞对化疗药物诱导凋亡不敏感。目前研究表明除了死亡受体和线粒体途径外,内质网也在调节化疗...
- 侯丽丽
- 关键词：黑色素瘤细胞凋亡内质网应激
- Bim的异常调控在黑色素瘤细胞耐受内质网应激状态中的作用
- 2011年
- 目的探讨Bim在黑色素瘤细胞内质网应激状态下可能存在的异常调控，及其在黑色素瘤细胞对内质网应激耐受中的作用。方法用衣霉素诱导黑色素瘤细胞Mel—RM和MM200，产生内质网应激模型。采用流式细胞仪AnnexinV／PI双染法及Hoechst染色法检测细胞凋亡；Westem blot检测caspase-3和caspase-9的活化，以及Bim、GRP78、CHOP及Foxol等的蛋白表达水平；实时荧光定量聚合酶链反应检测Bim、CHOP及Foxol的mRNA水平。以小干扰RNA（siRNA）特异性沉默人胚肾上皮细胞系HEK293的Bim基因，观察Bim的蛋白表达和细胞凋亡情况。结果衣霉素作用后，黑色素瘤细胞对内质网应激诱导的凋亡表现为耐受，HEK293细胞中caspase-3和caspase一9明显活化，但在黑色素瘤细胞中却不明显。3μmol／L衣霉素作用黑色素瘤Mel—RM和MM200细胞12、24、36h后，Bim蛋白的水平均未上调，mRNA表达的变化倍率分别为0．37±0．05、0．13±0．02、0．02±0．01和0．41±0．06、0．16±0．04、0．21±0．03，与HEK293细胞相比，均发生下调（P〈0．01）。在HEK293细胞中，特异性沉默Bim基因后，caspase-3的活化程度下降，BimsiRNA干扰组细胞凋亡率为（5．69±0．38）％，明显低于siRNA阴性对照组[（40．32±1．64）％，P〈0．01]和空白对照组[（35．46±2．01）％，P〈0．01）]。3μmol／L衣霉素作用黑色素瘤细胞6、12、24、36h后，转录因子CHOPmRNA和蛋白表达水平均发生上调，Foxol mRNA和蛋白表达水平均发生下调。结论Bim的异常调控在黑色素瘤细胞对内质网应激诱导的凋亡耐受中发挥重要作用，这可能是导致黑色素瘤对治疗不敏感的重要原因之一。转录因子CHOP和Foxol可能与Bim在内质网应激诱导的黑色素瘤细胞中的异常表达有关。
- 侯丽丽金雷韩传春程冰王丽张旭东张林杰
- 关键词：黑色素瘤BIMCHOP小干扰RNA
- TRAIL诱导黑色素瘤细胞中miRNA-221的表达被引量：2
- 2011年
- 目的研究TRAIL诱导的黑色素瘤细胞中miRNA-221的表达及其在细胞凋亡抵抗中的意义。方法 TRAIL(100μg/L)分别处理黑色素瘤细胞系sk-Mel-28、IgR3、Mel-RM、MM200、Me4405,6 h后收集细胞,实时荧光定量PCR检测各细胞系中miRNA-221的mRNA水平,同时检测TRAIL(100μg/L)诱导Mel-RM细胞不同时间点miRNA-221的mRNA水平变化;脂质体转染反义miRNA-221下调TRAIL诱导的Mel-RM细胞中miRNA-221的表达,同时设对照组和转染无意序列组;流式细胞术PI单染法检测细胞凋亡率;Western blot检测p-ERK及p27蛋白表达。结果 TRAIL(100μg/L)诱导Mel-RM细胞中miRNA-221的mRNA水平明显高于其他细胞系(2-ΔΔCt值为18.553 4±1.514 6)。随TRAIL诱导时间的延长,Mel-RM细胞中miRNA-221的表达上调。TRAIL(100μg/L)诱导的Mel-RM细胞中,反义miR-NA-22l转染组凋亡率高于对照组和转染无意序列组。miR-NA-221靶基因p27在U0126(MEK1/2抑制剂)和TRAIL共处理的Mel-RM细胞中的表达较TRAIL单独处理组上调。结论抑制miRNA-221的表达可能具有提高TRAIL诱导的黑色素瘤细胞凋亡敏感性的作用,抑制ERK的激活可能下调miRNA-221的表达,从而上调miRNA-221的靶基因p27蛋白的表达。
- 侯丽丽程冰张旭东王丽张林杰
- 关键词：黑色素瘤细胞凋亡转染微RNAS
- E2F-1在胃腺癌细胞内质网应激反应中对Mcl-1的调控作用被引量：8
- 2011年
- 目的探讨Mcl-1在胃腺癌细胞对内质网应激诱导细胞凋亡耐受中的作用,以及内质网应激状态下E2F-1调控Mcl-1的机制。方法采用PI单染法测定细胞凋亡率;Western blot检测GRP78、Mcl-1、Bcl-2、E2F-1蛋白变化;实时荧光定量PCR检测Mcl-1 mRNA水平变化;转染pcDNA-E2F-1-Flag质粒使细胞高表达E2F-1。结果胃腺癌细胞对衣霉素(TM)诱导的内质网应激性凋亡相对不敏感,这与Mcl-1在蛋白水平和mRNA水平的上调有关。Mcl-1的转录抑制因子E2F-1在TM诱导细胞后表达下调。在内质网应激状态下的胃腺癌细胞中高表达E2F-1可以减弱Mcl-1的上调。结论内质网应激反应引起Mcl-1上调可能在胃腺癌细胞对内质网应激诱导的凋亡耐受中起重要作用;转录因子E2F-1下调可能参与调控Mcl-1的表达。
- 王丽侯丽丽吴亚欧桂丽张旭东张林杰
- 关键词：腺癌内质网衣霉素
