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倪萌
作品数:
3
被引量:4
H指数:1
供职机构:
天津科技大学
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发文基金:
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
生物学
医药卫生
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合作作者
罗学刚
天津科技大学生物工程学院工业微...
张同存
武汉科技大学医学院
田文静
天津科技大学生物工程学院工业微...
井晓兰
天津科技大学生物工程学院工业微...
吕丽慧
天津科技大学生物工程学院工业微...
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机构
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天津科技大学
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武汉科技大学
作者
3篇
倪萌
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罗学刚
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张同存
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吕丽慧
1篇
吕丽慧
1篇
井晓兰
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田文静
传媒
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中国生化药物...
1篇
2010年全...
年份
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2011
1篇
2010
共
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利用双质粒系统在大肠杆菌中表达瑞替普酶的方法
本发明涉及一种利用双质粒系统在大肠杆菌中表达溶栓药物瑞替普酶(Reteplase,rPA)的方法。通过PCR扩增得到rPA的基因片断,将该基因片断克隆到载体pET22b中,构建获得重组质粒pET22b-rPA。利用pET...
罗学刚
张同存
倪萌
文献传递
溶栓药物瑞替普酶(rPA)的研究进展
对溶栓药物的研究近况进行了概述,较为详细的介绍了瑞替普酶(rPA)的结构特征及其基因工程表达研究进展。
倪萌
罗学刚
吕丽慧
张同存
关键词:
溶栓药物
瑞替普酶
结构特征
基因表达
文献传递
乳糖诱导瑞替普酶在大肠杆菌中的可溶性表达
被引量:4
2011年
目的构建瑞替普酶(rPA)大肠杆菌基因工程菌,优化乳糖诱导表达条件,并获得活性重组蛋白。方法通过PCR扩增得到rPA编码基因,将该基因片段克隆到载体pET40b中,转化E.coli BL21。优化确定乳糖诱导浓度、时间、温度等参数,将诱导表达后获得的菌体细胞通过超声破碎裂解后利用镍柱亲和色谱进行分离纯化,重组目的蛋白经Xa因子切割去除DsbC融合标签后释放获得rPA产物,最后利用纤维蛋白平板法对其溶栓活性进行检测。结果 rPA重组质粒构建成功,利用终浓度30 mmol/L的乳糖于30℃诱导5 h可以获得很好的表达效果,重组蛋白的表达量、可溶性及酶活与IPTG诱导产物基本接近;经纯化后的rPA目的蛋白可表现出明显的溶栓活性。结论本研究为进一步利用大肠杆菌系统表达生产高活性重组rPA提供了一定的参考依据。
田文静
罗学刚
吕丽慧
倪萌
井晓兰
张同存
关键词:
瑞替普酶
DSBC
乳糖
大肠杆菌
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