傅意玲
- 作品数：10 被引量：36H指数：4
- 供职机构：汕头大学医学院炎症与免疫性疾病研究所更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人嗜碱性粒细胞在不同刺激物作用下的组胺释放能力被引量：9
- 2005年
- 目的:研究蛋白酶激活受体2(PAR2)激动剂和肝素等,对嗜碱性粒细胞组胺释放的影响。方法:用Ficoll进行密度梯度离心分离外周血单个核细胞(PBMC)。经Hank’s平衡盐溶液(HBSS)重新悬浮后进行嗜碱性粒细胞激发实验,用酶联免疫试剂盒来检测组胺的水平。结果:浓度为10mg/L胰蛋白酶可引起嗜碱性粒细胞释放组胺,其作用强度较抗IgE抗体、钙离子载体(CI)及P物质等为弱。PAR2特异性激动肽SLIGKVNH2对嗜碱性粒细胞没有明显的激活作用,但抗IgE抗体、CI、FMetLeuPhe(FMLP)、C5a及P物质可引起嗜碱性粒细胞显著的组胺释放。肝素、C5和腺苷在试验浓度内未引起组胺释放,但肝素可显著增加C5a和P物质诱导的组胺释放。结论:胰蛋白酶、抗IgE抗体、CI、FMLP、C5a及P物质均可诱导嗜碱性粒细胞显著地释放组胺。PAR2激动肽SLIGKVNH2不能引起组胺释放,肝素可增加P物质和C5a引起的组胺释放,具有放大嗜碱性粒细胞激活信号的作用。
- 朱薇何韶衡林梓霞傅意玲
- 关键词：蛋白酶激活受体-2嗜碱性粒细胞肝素组织胺
- 类胰蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞组胺释放的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 :研究类胰蛋白酶抑制剂 (TPI)对人大肠肥大细胞释放组胺的影响。方法 :大肠组织经胶原酶和透明质酸酶消化后 ,将细胞成分用全HBSS重新悬浮。肥大细胞在LP4试管中于37℃条件下与各种刺激剂反应 15min而完成激发过程。激发液中的组胺水平用以玻璃纤维为基础的荧光方法测定。结果 :4种TPI中 ,高浓度的亮抑酶肽素和鱼精蛋白可刺激人大肠肥大细胞释放组胺 ;而TLCK和乳铁蛋白则无明显的刺激作用。 4种TPI均可以剂量依赖的方式抑制抗IgE抗体诱导的大肠肥大细胞释放组胺。最大浓度的亮抑酶肽素(2 0 0mmol/L)、TLCK(10 0mmol/L)、乳铁蛋白 (30mmol/L)和鱼精蛋白 (10 0mg/L) ,可分别抑制 4 8.7%、36 .7%、4 0 .2 %和 34.1%的组胺释放。在 37℃条件下 ,将 4种TPI同大肠肥大细胞预培养 2 0min ,与未进行预培养相比较 ,它们对抗IgE抗体诱导的组胺释放无明显改变。 4种TPI还可抑制CI诱导的组胺释放 ,抑制范围在 2 5 %～ 32 %之间。与抗IgE抗体诱导的组胺释放则不同 ,与大肠肥大细胞预培养 2 0min ,与未进行预培养相比较 ,亮抑酶肽素和TLCK对CI诱导的组胺释放的抑制作用明显增强 ;而鱼精蛋白则无此作用。结论 :我们首次发现TPI可抑制人大肠肥大细胞IgE抗体依赖和非IgE抗体依赖的组胺释放 。
- 谢华何韶衡程明华傅意玲
- 关键词：肥大细胞组胺
- 中华眼镜蛇毒金属蛋白酶诱导人肥大细胞释放组胺的作用被引量：9
- 2006年
- 目的:探索中华眼镜蛇毒金属蛋白酶(MT)对人肥大细胞释放组胺的诱导作用及其机制。方法:用肝素凝胶和Superdex75亲和力凝胶纯化MT。将手术切除的人肺、大肠和扁桃体组织在37℃用Ⅰ型胶原酶和Ⅰ型透明质酸酶消化,悬浮细胞均匀地加入含MT、刺激剂或缓冲液的试管中,进行激发实验并用荧光显色法测量上清液的组胺水平。结果:纯化后的MT在SDS-PAGE上呈1条带。MT能诱导人肺、大肠和扁桃体肥大细胞发生剂量依赖性组胺释放。浓度低至0.03 mg/L时,MT就能诱导大肠肥大细胞显著性的组胺释放,但对于肺和扁桃体的肥大细胞,MT的最低有效浓度分别为0.3 mg/L和30 mg/L。MT诱导大肠和肺肥大细胞组胺释放,12 min时达高峰,而扁桃体肥大细胞的组胺释放则在8 min时达高峰。人大肠、肺和扁桃体肥大细胞经代谢抑制剂和百日咳毒素预处理后,MT诱导其释放组胺的作用明显减弱。缺乏外源性钙、镁离子时,MT诱导肥大细胞释放组胺的能力也明显减弱。结论:MT可能通过G蛋白偶联受体途径激活人肥大细胞,从而参与毒蛇咬伤人体后所发生的病理生理过程。
- 莫雅贞何韶衡魏继福林梓霞傅意玲
- 关键词：肥大细胞中华眼镜蛇毒组胺
- 组胺对肺上皮细胞Toll样受体表达的上调作用被引量：1
- 2006年
- 目的：观察组胺对肺上皮细胞中Toll样受体（TLR）表达的影响．方法：体外培养人肺上皮细胞株A549，用RT-PCR和实时定量PCR检测静息状态或组胺作用下的A549细胞中TLR1～TLR10mRNA的变化，并用流式细胞术进一步确定组胺对TLR3表达的调节作用．结果：A549细胞有TLR1～TLR10 mRNA的组成型表达，组胺对TLR3 mRNA和蛋白的上调作用具有时间和剂量依赖性，并且H1受体阻断剂可抑制组胺对TLR3的上调作用．结论：组胺可上调肺上皮细胞中TLR3的表达，提示当呼吸道存在变态反应性病变时，增多的组胺可能会增加肺上皮细胞对病毒感染的敏感性．
- 侯一峰周艳春郑晓璇王海燕傅意玲方泽曼何韶衡
- 关键词：组胺上皮细胞TOLL样受体
- 类糜蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞类胰蛋白酶释放的影响被引量：2
- 2005年
- 目的:研究类糜蛋白酶抑制剂对人大肠肥大细胞释放类胰蛋白酶的影响。方法:人大肠组织经酶消化后,细胞成份有全HBSS重新悬浮。激发过程在LP4试管中、37℃条件下完成。类胰蛋白酶水平用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定。结果:促分泌剂抗IgE抗体和CI在培养15分钟和35分钟时可明显刺激人大肠肥大细胞类胰蛋白酶的释放,在相同实验体系中,类糜蛋白酶抑制剂ZIGPFM、TPCK和α1抗胰蛋白酶无明显刺激人大肠肥大细胞释放类胰蛋白酶的作用。类糜蛋白酶抑制剂均可以剂量依赖性的方式抑制抗IgE抗体诱导的类胰蛋白酶的释放,最大浓度的ZIGPFM(1μmolml)、TPCK(80μmolml)和α1抗胰蛋白酶(30μmolml)可分别抑制37%、40%和36.6%的类胰蛋白酶释放。在37℃条件下同大肠细胞预培养20分钟与无预培养相比,ZIGPFM和TPCK对抗IgE抗体诱导的类胰蛋白酶释放的抑制作用略增强。Amastatin对抗IgE抗体诱导的类胰蛋白酶的释放无作用。类糜蛋白酶抑制剂均可以剂量依赖性的方式抑制CI诱导的类胰蛋白酶的释放,抑制范围在23%～35.3%。在37℃条件下同大肠细胞预培养20分钟与无预培养相比,ZIGPFM对CI诱导的类胰蛋白酶释放的抑制作用有增强,TPCK则无此特点。结论:类糜蛋白酶抑制剂可抑制人大肠肥大细胞IgE依赖性和非依赖性类胰蛋白酶的释放,提示类糜蛋白酶抑制剂可望成为炎症性肠病或其它肥大细胞相关疾病的一个新的治疗途径。
- 谢华何韶衡程明华傅意玲
- 关键词：肥大细胞类胰蛋白酶
- 双重免疫胶体金标记组织中肥大细胞内分泌颗粒的超微结构被引量：1
- 2006年
- 目的:观察肥大细胞分泌颗粒内特异性酶的分布及其超微结构,并探讨肥大细胞的功能。方法:用双重免疫胶体金标记类胰蛋白酶抗体(AA5)及类糜蛋白酶抗体(CC4),在透射电子显微镜下观察肥大细胞内分泌颗粒的超微结构。结果:在肥大细胞内分泌颗粒中富集类胰蛋白酶和(或)类糜蛋白酶,多数酶蛋白呈细小球形结构;在细胞膜内侧分泌颗粒融合形成分泌通道,细胞的外侧可见肥大细胞脱出的颗粒;细胞内的另侧分泌颗粒呈球形小泡。结论:肥大细胞内酶蛋白的富集可为肥大细胞参与Ⅰ型变态反应提供物质基础。
- 林珏龙傅意玲方泽漫李伟秋庄冰容朴仲贤何韶衡
- 关键词：肥大细胞类胰蛋白酶类糜蛋白酶透射电子显微镜
- 蛋白酶激活受体-2激动剂对人皮肤和扁桃体肥大细胞释放组胺和类胰蛋白酶的影响被引量：4
- 2005年
- 目的:研究蛋白酶激活受体2(PAR- 2)激动剂对人皮肤和扁桃体肥大细胞释放组胺和类胰蛋白酶的影响.良し⒕感〉娜似し艉捅馓姨宸蚀笙赴?并分别测量类胰蛋白酶和组胺的释放量. 结果: PAR -2激动剂丝亮异亮甘赖缬(SLIGKV)可引起皮肤肥大细胞组胺释放,但对类胰蛋白酶释放无影响. 相反,SLIGKV可引起扁桃体肥大细胞的类胰蛋白酶,而不是组胺释放. 另外一种PAR -2激动剂反肉桂酰亮异亮甘精亮鸟[酰胺] (tc- LIG- RLO- NH2 )比SLIGKV -NH2 诱导类胰蛋白酶和组胺释放的作用弱. 结论: 我们首次报道了皮肤和扁桃体肥大细胞具有在体外释放类胰蛋白酶的特性. 皮肤和扁桃体肥大细胞释放类胰蛋白酶和组胺的差别揭示了一种新的肥大细胞对刺激产生反应的异质性的类型,提示人类肥大细胞至少有2种脱颗粒信号的自我放大机制.
- 谢华何韶衡傅意玲
- 关键词：肥大细胞组胺类胰蛋白酶
- 抗人白介素-28A单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2006年
- 目的制备抗人白介素-28A(hIL-28A)单克隆抗体(mAb)。方法以hIL-28A融合蛋白为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗hIL-28A mAb。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定mAb的Ig亚类,通过ELISA、Western blot、免疫组化染色法、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性。结果获得2株稳定分泌抗hIL-28A mAb的杂交瘤细胞,但2株mAb均与hIL-29有弱交叉反应。2株mAb的类别均为IgM。Western blot分析表明,此mAb所识别的靶分子的相对分子质量(Mr)约为19 000。免疫组化染色表明,mAb与包皮和肺组织中的上皮细胞、结肠组织中的疑似巨噬细胞呈阳性反应。流式细胞仪分析显示,2株mAb与人脐静脉内皮细胞系HUVEC细胞的反应均呈阳性。激光共聚焦扫描显微镜观察到荧光标记的阳性反应物主要位于HUVEC细胞胞浆内。结论成功地制备抗hIL-28A mAb,为病毒感染性疾病、肿瘤和其他疾病的研究提供新的手段。
- 陈玉珍何韶衡周艳春黄阗李明才刘岳宁陈霖霏傅意玲方泽漫
- 关键词：单克隆抗体
- 类糜蛋白酶抑制剂对人结肠肥大细胞组胺释放的影响被引量：2
- 2004年
- 目的 研究类糜蛋白酶抑制剂对人结肠肥大细胞释放组胺的影响。方法 用酶消化人结肠组织并分离细胞成份。激发过程在LP4试管中、37℃条件下完成。组胺水平用以玻璃纤维为基础的荧光方法测定。结果 类糜蛋白酶抑制剂ZIGPFM、TPCK和α1 抗胰蛋白酶无明显刺激人类结肠肥大细胞释放组胺的作用。 3种类糜蛋白酶抑制剂均可以剂量依赖性方式抑制抗IgE抗体诱导的组胺释放 ,最大浓度的ZIGPFM(1mmol·L-1)、TPCK(80mmol·L-1)和α1 抗胰蛋白酶(30mmol·L-1)可分别抑制 37%、2 6 %和 36 8%的组胺释放。在 37℃条件下同结肠细胞预培养 2 0min与无预培养相比 ,ZIGPFM和TPCK抑制抗IgE抗体诱导的组胺释放的作用略有增强。 3种类糜蛋白酶抑制剂均可以剂量依赖性方式抑制CI诱导的组胺释放 ,最大抑制范围在 2 3 6 %～ 35 %之间。在 37℃条件下同结肠细胞预培养 2 0min与无预培养相比 ,TPCK对CI诱导的组胺释放的抑制作用略有增强 ,但ZIGPFM则无此特点。结论 我们发现了类糜蛋白酶抑制剂可抑制人结肠肥大细胞IgE依赖性和非依赖性组胺释放 ,提示类糜蛋白酶抑制剂可能有抗炎症性肠病的作用 。
- 谢华何韶衡程明华傅意玲
- 关键词：肥大细胞组胺
- 烙铁头蛇毒TM-N49诱导人肥大细胞释放组胺的作用
- 2006年
- 目的探索烙铁头蛇毒TM-N49对人肥大细胞释放组胺的诱导作用及其机制。方法用SP-SephadexC-25,肝素凝胶,Superdex75分子筛及HPLC纯化TM-N49。将手术切除的人肺、大肠和扁桃体组织在37℃条件下用Ⅰ型胶原酶和Ⅰ型透明质酸酶消化,经悬浮后的细胞均匀地加入含TM-N49、刺激剂或缓冲液的试管中,进行激发实验并用荧光显色法测量上清液的组胺水平。结果纯化后的TM-N49在SDS-PAGE上呈一条带。TM-N49能诱导人肺、大肠和扁桃体肥大细胞发生剂量依赖性组胺释放。浓度为0.3μg/ml时,TM-N49就能诱导大肠肥大细胞显著性的组胺释放,但对于人肺肥大细胞来说,诱导它释放相同量组胺所需最低TM-N49浓度为3μg/ml,而对于扁桃体肥大细胞,TM-N49浓度为30μg/ml时才能诱导它显著性的组胺释放。TM-N49诱导大肠和肺肥大细胞组胺的释放10min和8min时达高峰,而扁桃体肥大细胞的组胺释放则在16min时达高峰。人大肠、肺和扁桃体肥大细胞经代谢抑制剂和百日咳毒素预先处理后,浓度低于30μg/ml的TM-N49诱导其释放组胺的作用明显减弱,但当其浓度达到30μg/ml时,上述处理对TM-N49诱导人肥大细胞释放组胺的作用无影响。缺乏外源性钙、镁离子时,TM-N49诱导肥大细胞释放组胺的能力也明显减弱。结论TM-N49可能通过G蛋白偶联受体途径激活人肥大细胞或通过细胞毒等途径作用于肥大细胞,从而参与毒蛇咬伤人体后所发生的病理生理过程。
- 莫雅贞何韶衡魏继福林梓霞傅意玲
- 关键词：肥大细胞组胺
