刘晔华
- 作品数：43 被引量：185H指数：9
- 供职机构：天津市第一中心医院更多>>
- 发文基金：国家临床重点专科建设项目卫生部国家临床重点专科建设项目天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程自动化与计算机技术更多>>
- 2005-2010年临床分离革兰阴性杆菌耐药性变迁被引量：11
- 2013年
- 目的了解医院感染革兰阴性杆菌的分布特点和变迁趋势,为临床合理使用抗菌药物、减少耐药性提供参考。方法统计分析2005-2010年临床分离的革兰阴性杆菌构成比及耐药率。结果 6年非重复分离革兰阴性杆菌11 925株,占所有住院非重复分离病原菌的49.9%,且分离率呈逐年递增趋势;其中大肠埃希菌占24.0%,居首位;其后依次为肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌,分别占18.2%、17.5%和13.3%;感染部位以呼吸道为主,约占60.0%;常见革兰阴性杆菌耐药率整体呈上升趋势;产超广谱β-内酰胺酶大肠埃稀菌、肺炎克雷伯菌检出率分别为38.5%和25.2%;铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌对亚胺培南耐药率为23.4%和22.3%,呈逐年上升;喹诺酮类抗菌药物耐药率从2007年开始下降,与该类药物用药频度相关。结论加强医院感染病例的细菌学监测和动态分析,对制定有效的感染控制措施,降低感染暴发流行具有积极意义。
- 王世瑜刘晔华陈锦艳张坚磊
- 关键词：革兰阴性杆菌耐药性抗菌药物
- 重组酶聚合酶扩增技术检测新型隐球菌DNA被引量：4
- 2020年
- 目的探讨应用重组酶聚合酶(RPA)技术对新型隐球菌快速核酸检测,建立新型隐球菌的即时检测(POCT)方法。方法磁珠法提取新型隐球菌标准菌株ATCC32609、150株阴性质控菌株(本实验室质控菌株和临床分离菌株)DNA。在新型隐球菌DNA的5.8SrRNA编码基因区域设计6对候选引物,以ATCC32609作为建立RPA反应体系的参考菌株,凝胶法RPA基础试剂盒筛选可稳定扩增出新型隐球菌DNA片段的引物。依次稀释ATCC32609的McF2.0菌悬液,半定量法观察扩增反应阳性引物+ATCC32609的扩增反应,扩增反应阳性引物+150株阴性对照菌株验证该反应特异性。对扩增反应阳性引物设计探针,实时荧光RPA法观察ATCC32609的扩增反应,150株阴性对照菌株验证该反应特异性。取实验室保存10株新型隐球菌临床分离株和100份临床样本(包括脑脊液50份、痰15份、胸腹水15份、静脉血20份),分别用荧光法RPA和oasig实时荧光PCR法进行DNA扩增,观察是否存在扩增反应。结果引物2、5、6的目的条带清晰,无弥散拖尾现象,引物扩增反应阳性;对ATCC32609菌悬液1∶105稀释加入引物后扩增反应阳性;引物2、5、6均属于新型隐球菌编码核糖体RNA的DNA片段,比对结果符合率为100%;引物6扩增阴性对照菌株后,凝胶电泳未见扩增条带。引物6设计探针实时荧光反应结束时可见S形阳性扩增曲线;所有阴性对照菌株扩增结果阴性;对ATCC32609菌悬液1∶105稀释后加入引物6和探针仍可见阳性扩增曲线;以引物6和相应探针对10株新型隐球菌菌株扩增后均可见S形阳性扩增曲线。荧光法RPA试剂、oasig实时荧光PCR法检测100份临床样本中扩增反应阳性的分别为40、40份。结论RPA技术检测新型隐球菌DNA,实时荧光法RPA技术检测新型隐球菌DNA方便快捷、准确性高。
- 刘晔华穆红张坚磊江雁刘萍王猛
- 关键词：核酸检测实时荧光PCR法新型隐球菌
- 原发性胆汁性肝硬化患者协同刺激分子PD-1的检测及临床意义
- ：探讨原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)患者协同刺激分子PD-1的表达及其与疾病发病机制的关系. 方法：分别采用逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)的方...
- 段继惠刘晔华穆红唐志琴史瑞
- 关键词：原发性胆汁性肝硬化程序性死亡受体-1
- 河西走廊地区幽门螺杆菌iceA、babA2基因分型与疾病关联性研究被引量：3
- 2019年
- 目的探讨胃癌高发区河西走廊地区患者幽门螺杆菌(Hp)iceA和babA基因型的分布及其与消化道疾病相关因素的关系。方法收集甘肃省第二人民医院、张掖市人民医院、武威市肿瘤医院及金川公司职工医院82例胃镜检查患者的胃黏膜标本、从胃黏膜中分离并培养Hp菌株,设计引物进行PCR扩增及基因型判定,通过病例资料整理,分析Hp菌株中iceA和babA2基因不同基因型与患者临床病理类型、性别和年龄的关系。结果分离Hp菌株并成功扩增73份目的基因,其中HpiceA1型和2型的构成比分别为76.71%(56/73)和23.29%(17/73),babA2基因型为38.36%(28/73)。HpiceA1型在浅表性胃炎、萎缩性胃炎、消化性溃疡组的患者中的感染率均明显高于iceA2型(P<0.05),而胃癌组患者HpiceA1型感染率均明显低于iceA2型(P<0.05);HpiceA1型在20~<41岁、41~<61岁年龄组的患者中的感染率均显著高于iceA2型(P<0.05),不同性别患者间iceA基因型Hp感染率比较差异无统计学意义(P>0.05)。消化性溃疡、胃癌患者中babA2型感染率明显高于其他病理组(P<0.05);不同年龄及性别患者间babA2基因型Hp感染率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论河西走廊地区Hp菌株iceA基因均为阳性并且以1型为主,其分布与患者的疾病类型、年龄相关;babA2基因型感染多与消化性溃疡和胃癌有关。
- 王猛韩俭周伟刘晔华张富花穆红
- 关键词：幽门螺杆菌
- 重组卡介苗的研究进展
- 2004年
- 卡介苗具有使用广泛、安全、价格低、稳定性好等优点,本文就重组卡介苗在免疫预防、肿瘤的基因治疗和其他研究方面的应用作一综述。
- 刘晔华朱道根
- 关键词：重组卡介苗免疫预防肿瘤基因治疗细菌抗原
- 小菌落变异型的特征及在持续性感染中的作用研究进展
- 2018年
- 同质的微生物群体在环境压力尤其是抗菌药物治疗的压力作用下易产生小菌落变异型(SCV)。SCV这类微生物亚群具有自发产生、生长缓慢且表型多样的特征。SCV在临床上常与复发或持续性感染有关。鉴于SCV菌株生长缓慢,与其野生型菌株的菌落相比明显减小,且产色素较少或者不产色素,临床微生物实验室工作人员在日常检验工作中可能会忽视或漏检SCV菌株,最终导致临床上常规抗生素疗程未覆盖SCV菌株或难以清除SCV引起的感染。临床上SCV菌株产生的原因主要与宿主的基础免疫状态和抗生素治疗疗程是否规范相关,因此,建议临床医师对免疫力低下、长期应用抗生素治疗或患有基础疾患的患者多送检标本,同时微生物室工作人员也需要细心留意相关标本,积极与临床医师沟通,提高SCV菌株的检出率,有针对性地指导临床合理使用抗生素。
- 刘晔华穆红
- 关键词：表型基因型
- 10-23脱氧核酶对结核分枝杆菌异柠檬酸裂合酶表达的影响及其抗菌作用被引量：4
- 2006年
- 目的探讨10-23脱氧核酶(deoxyribozyme,DRZ)抑制结核分枝杆菌异柠檬酸裂合酶(isocitrate lyase,ICL)的表达及其在抗结核分枝杆菌感染中的作用。方法根据计算机模拟的结核分枝杆菌ICL mRNA的二级结构设计合成5条ICL特异的10-23 DRZ(DZ1～DZ5),在无细胞反应体系中鉴定其对结核分枝杆菌ICL mRNA的切割活性后,在不同条件下用DZ4对结核分枝杆菌进行处理,于处理后不同时间检测ICL酶活性变化,间接酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测ICL的表达。用异烟肼单独处理及DZ4与异烟肼联合处理后的结核分枝杆菌感染人巨噬细胞系THP-1细胞,于感染后不同时间用Ziehl-Heelson染色法和结核分枝杆菌培养计数的方法,观察10-23DRZ对结核分枝杆菌感染巨噬细胞的影响,同时取经异烟肼单独处理及DZA与异烟肼联合处理后的结核分枝杆菌接种于Middle Brook 7H10(M7H10)培养基,观察10-23DRZ对在巨噬细胞外生长的结核分枝杆菌的影响。结果DZ1、DZ3、DZ4和DZ5在无细胞反应体系中可对ICL mRNA进行有效切割,且其活性具有高度特异性。5μmol／L DZ4与异烟肼联合应用时可显著抑制结核分枝杆菌ICL的表达,与单用相应浓度的异烟肼比较,处理1、2、3周后结核分枝杆菌ICL酶活性分别下降34．9％、46．6％、46．7％(异烟肼10μg／L)或21．9％、33．48、36．9％(异烟肼5μg/L)。DZ4与异烟肼联合处理后的结核分枝杆菌在巨噬细胞内存活的能力显著下降,在感染后4 d和7 d时,THP-1细胞内的荷菌量分别由单用相应浓度异烟肼处理对照组的126．5×104 CFU、307．5×104 CFU(异烟肼10μg／L)和133．0×104 CFU、325．4×104 CFU(异烟肼5μg／L)下降至54．6×104 CFU、114．3×104 CFU和71．7×104 CFU、174．4×104 CFU。10-23DRZ对结核分枝杆菌在M7H10培养基中生长无明显影响。结论异烟肼可有效促进10-23DRZ进入结核分枝杆菌;10-23DRZ与亚抑菌浓度的异烟肼联用可有效抑制结核分枝杆�
- 李俊明李娜朱道银伊正君刘晔华杨春何永林
- 关键词：分枝杆菌结核基因表达
- 同种异型抗原激活并套式PCR法克隆人颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段被引量：1
- 2005年
- 目的:采用套式PCR克隆经同种异型抗原激活后的人细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表达的颗粒溶素(Granulysin, GLS)Mr 15000与Mr 9000活性片段的编码序列并进行序列测定与分析,为进一步表达纯化该活性片段和研究GLS的免疫杀伤机制奠定基础。办法:抽提经过培养并激活的健康人CTL淋巴细胞总RNA,经逆转录后以套式PCR方法扩增出GLS的Mr 15000 与Mr 9000活性片段的编码序列,插入pET32a(+)载体,转化大肠杆菌TOP10,阳性克隆经PCR及酶切鉴定后进行测序分析。结果:成功扩增出了包含GLSMr 15000与Mr9000活性片段完整编码序列的cDNA,与预期大小相同,PCR、酶切及测序鉴定证明得到了读码框正确的pET32a-Mr 15000与pET32a-Mr 9000重组子。序列分析表明GLS基因编码产物在第119 位存在氨基酸多态性。结论:人天然颗粒溶素Mr 15000与Mr 9000活性片段编码序列能够通过以上方法获得和克隆并用于后续研究。
- 伊正君朱道银杨春何永林刘晔华
- 关键词：颗粒溶素细胞毒性T淋巴细胞套式PCR
- 甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌的clfB分型
- 2014年
- 目的：观察甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（ MSSA）的凝集因子B（ clfB）分型情况。方法选取2006年和2012年10～12月天津市第一中心医院院内感染分离的7株MSSA，对其进行clfB分型。结果7株MSSA分别属于2-3、2-46D、2-47B、13、14、15和17，共计5个系列，7个型别，质控菌株ATCC29213属于clfB2-11克隆。结论MSSA 的clfB分型复杂，涉及谱系广泛，有助于局部地区短期的流行病学调查。
- 刘晔华王世瑜张坚磊穆红
- 关键词：可变串联重复序列基因分型
- 路邓葡萄球菌的质谱技术鉴定及耐药谱、临床感染特征分析被引量：2
- 2020年
- 目的鉴定路邓葡萄球菌,总结其耐药谱和临床感染特征。方法收集天津市第一中心医院住院患者确定存在医院感染者分离的菌株,采用VITEK MS质谱仪鉴定路邓葡萄球菌,并进行药敏试验,统计检出路邓葡萄球菌的标本类型、原发疾病及病区分布。结果采用VITEK MS质谱鉴定的路邓葡萄球菌48株,占葡萄球菌属细菌的0.56%(48/8527),占凝固酶阴性葡萄球菌的0.76%(48/6291)。该菌株对青霉素和红霉素耐药率较高,分别为64.6%、37.5%;对克林霉素、复方新诺明、左旋氧氟沙星、庆大霉素、莫西沙星的耐药率均<15%,分别为14.6%、12.5%、6.2%、4.2%、2.1%;对其他药物均敏感。感染路邓葡萄球菌的原发病主要包括:尿毒症(29.1%)、糖尿病(6.2%)、糖尿病足(6.2%)、前列腺增生(6.2%)、中耳炎(6.2%)、肝移植术后感染(6.2%)、类风湿关节炎(4.2%)、皮肤软组织感染(4.2%)。检出路邓葡萄球菌的标本类型主要有肾周引流液(22.9%),伤口分泌物(20.8%),尿液(16.6%),耳分泌物(6.2%),肛拭子(6.2%),腹水、鼻拭子和脓液各占4.2%,胆汁、静脉血、透析液、前列腺液、皮肤拭子、气管吸物各占2.1%。路邓葡萄球菌感染病区以外科病区为首(64.5%),主要有复苏室病房、移植外科、耳鼻喉科和泌尿外科等;其次是内科病区(25.0%),主要有免疫科、中西医科、国诊科等;重症监护科占6.3%;感染科占4.2%。结论采用VITEK MS质谱对路邓葡萄球菌鉴定准确率高。路邓葡萄球菌对青霉素和红霉素耐药率较高,感染此菌的原发疾病主要有尿毒症、糖尿病、前列腺增生等疾病,检出标本类型主要有肾周引流液、伤口分泌物、尿液等,感染病区以外科为主。
- 刘晔华穆红张坚磊江雁刘萍王猛
- 关键词：凝固酶阴性葡萄球菌细菌感染质谱技术抗药性
