刘贤锡 作品数:117 被引量:248 H指数:9 供职机构: 山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山东省卫生厅科研基金 山东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
反义寡核苷酸对胆囊癌细胞端粒酶活性的作用 2004年 目的:探讨反义寡核苷酸对胆囊癌细胞端粒酶活性的影响及对胆囊癌细胞生长增殖的作用。方法:设计针对端粒酶 R N A 亚基模板序列并经硫代磷酸修饰的反义、正义和随机序列寡核苷酸,并以正常人成纤维细胞作对照,观察其对人胆囊癌细胞(G B C鄄SD )端粒酶活性和细胞生长增殖的影响以及对正常人成纤维细胞的作用。结果:反义寡核苷酸可有效地抑制 G BC 鄄SD 的端粒酶活性,呈剂量依赖性,并明显地抑制 G B C鄄SD 的生长,对正常人成纤维细胞生长无明显作用。结论:硫代反义寡核苷酸对胆囊癌端粒酶活性有明显的抑制作用。 靳斌 姜希宏 马凤梅 刘贤锡 王伟关键词:胆囊肿瘤 端粒酶 基因 性激素、人前列腺生长因子(hPGF)对人前列腺成纤维细胞的增殖效应 1996年 良性前列腺增生症(BPH)是中老年男性的一种常见病,为探讨性激素对前列腺细胞增殖的作用机理,本课题收集BPH前列腺组织,经硫酸铵分段沉淀、肝素琼脂糖亲和层aCl浓度梯度洗脱,将1.3-1.7mNaCl洗液部分(活性最高)合并、冷冻干燥。纯化样品在SDS-PAGE中出现一条与bFGF迁移率一致的主带,MW约为17.000。IEF显示与重组hFGF电泳图象一致,从男性胎儿前列腺分离。 林毓琴 秦志杰 罗道春 刘贤锡 赵春华 张虞毅 余之刚关键词:性激素 前列腺增生 腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶反义RNA对肺癌A-549细胞抑制作用的实验研究 被引量:1 2006年 田辉 李林 刘贤锡 张岩 张冰关键词:鸟氨酸脱羧酶 细胞抑制作用 反义RNA 生物合成途径 C基因表达 ODC 前列腺非雄激素依赖启动子介导的双反义腺病毒的制备及组织特异性检测 2010年 目的制备前列腺非雄激素依赖启动子(PSES)介导的鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(AdoMetDC)双反义腺病毒。方法构建pShuttle-Basic-PSES-AdoMetDC-ODC-PolyA穿梭载体,并与载体pAd-PL进行体外重组,包装成重组腺病毒。将重组腺病毒转染至前列腺癌、直肠癌等癌细胞中,噻唑兰比色(MTT)法观察其对细胞增殖的影响,Western Blot检测重组腺病毒对细胞中ODC和AdoMetDC表达的抑制作用。结果成功构建了前列腺特异的ODC和AdoMetDC双反义RNA表达载体,并包装制备出能特异的在前列腺细胞中表达产生ODC和AdoMetDC反义RNA的重组腺病毒。该重组腺病毒具有前列腺组织特异性。结论构建的前列腺非雄激素依赖启动子介导的ODC、AdoMetDC双反义腺病毒具有组织特异性。 李玮 林洪义 刘贤锡 王伟关键词:鸟氨酸脱羧酶 前列腺肿瘤 P^53基因突变与乳腺癌关系的初步研究 被引量:2 1997年 应用聚合酶链式反应-单链构象多态性分析(PCK-SSCP)法检测30例乳腺癌组织中P基因的5、6、73个外显子。结果显示,15例有异常电泳带,表明这些病例相应的DNA片段发生突变。结合临床分析发现:在(1)Ⅱ期7/14例、Ⅲ期6/11例、Ⅳ期2/2例,(2)浸润性导管癌13/26例、乳头状腺癌1/1例、导管内癌1/1例,(3)腋窝淋巴结阳性11/18例、腋窝淋巴结阴性4/12例中发现P基因突变。提示P基因突变与临床分期及病理改变有关,有P53基因突变的原发病灶具有较强的侵袭能力,易复发和转移。 余之刚 孙靖中 刘贤锡 刘贤锡 戚威 曹文辉 马榕关键词:乳腺肿瘤 P53基因 基因突变 PCR-SSCP 大肠癌组织酶标志物研究 被引量:13 1998年 目的:探讨大肠癌的发病机理及早期诊断的酶标志物。方法:采用酶学方法测定大肠癌及近心端和远心端癌旁组织中鸟氨酸脱羧酶(ODC)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)活性及LDH同工酶谱。结果:(1)大肠癌组织中ODC、γ-GT及LDH活性均显著高于癌旁正常组织;(2)大肠癌组织中LDH5同工酶及LDH4+LDH5/LDH1+LDH2的比值也显著升高,LDH同工酶谱向M型转移。结论:肠组织中ODC、γ-GT、LDH活性升高,LDH同工酶谱向M型转移与大肠癌的形成有关,提示ODC。 姜春英 丁克 刘贤锡 刘贤锡 赵春华关键词:鸟氨酸脱羧酶 谷氨酰转肽酶 大肠癌 S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶基因沉默抑制乳腺癌MCF-7细胞生长的研究 被引量:1 2009年 目的探讨S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(SAMDC)基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖及侵袭能力的抑制作用。方法用特异性沉默SAMDC基因表达的RNA干扰真核表达载体SAMDCshRNA表达载体(pGPU6-SAMDC)转染乳腺癌MCF-7细胞,采用RT-PCR和Western-blot技术分别检测SAMDC mRNA和蛋白质表达水平;细胞增殖实验(CCK-8法)和细胞周期分析评价SAMDC基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响,肿瘤侵袭实验观察SAMDC基因沉默对乳腺癌细胞MCF-7侵袭活性的影响。结果SAMDCsh RNA表达载体转染后,MCF-7细胞SAMDC mRNA水平下调43.8%,蛋白表达水平下降66.5%;MCF-7细胞的增殖活性和侵袭能力均受到明显抑制,细胞增殖活性下降37%,细胞周期分析G1期细胞增加。结论SAMDC基因沉默可通过延长细胞周期的G1期而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,并能降低癌细胞侵袭活性,提示SAMDC可作为乳腺癌基因治疗的靶分子。 辛佳璇 陈世敏 王伟 阎云飞 徐春晓 刘斌 刘贤锡关键词:S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶 RNA干扰 基因治疗 去势后大鼠前列腺腹侧叶γ-GT活性分析 被引量:1 1992年 分别测定了去势后0,1,2,3,4,5,7,10,14和21天的大鼠前列腺腹侧叶中γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)活性,并比较了组织湿重及蛋白质含量变化。结果显示,未去势大鼠前列腺腹侧叶γ-GT总活性为40.3±9.5U/腹侧叶,去势后1~3天酶活性无明显改变,4天开始迅速降低,至10天降低了72%,随后降低速度减慢,至21天时降低了83%,与组织湿重及蛋白质含量变化进程基本一致。表明γ-GT活性降低可能与前列腺萎缩和蛋白质含量降低有关。 刘贤锡 Chung Lee关键词:去势 UbcH10基因沉默对裸鼠移植性大肠癌的抑制作用 目的 通过短发夹RNA (shRNA)干扰沉默UbcH10基因的表达,并观察其对裸鼠移植结直肠癌的抑制作用.方法 构建RNA干扰表达载体pGPU6/GFP/Neo/UbcH10-RNAi (pUbcH10-RNAi),建... 陈世敏 王启东 吴建英 胡成进 刘贤锡关键词:大肠癌 裸鼠移植瘤 大肠癌组织LDH活性及其同工酶谱分析(英文) 1997年 目的研究LDH活性及其同工酶谱与大肠癌发病的关系.方法利用2,4一二硝基苯肼比色法和琼脂糖凝胶电泳法分别测定了16例患者大肠癌组织的LDH活性同工酶谱.结果大肠癌组织的LDH总活性为6270u/g±1350u/g组织,比活性为6341u/mg±1241u/mg蛋白,均显著高于癌旁组织;同工酶构成比亦显著改变,LDH5明显增高,LDH4+LDH5/LDH1+LDH2为36±14,明显高于癌旁组织.结论大肠癌组织中LDH活性的升高主要是由于LDH5显著升高.LDH活性及其同工酶谱的改变与大肠癌的发病有关. 赵春华 姜春英 张虞毅 刘贤锡 刘贤锡 张孝亭 罗道春关键词:结肠肿瘤 直肠肿瘤