华江舟
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
- 供职机构:华南理工大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 小鼠白细胞介素4和6的克隆表达纯化及鉴定
- 背景:细胞因子融合蛋白可以增加抗体效应细胞对靶细胞的杀伤作用,因此在科研和临床中越来越受到重视。重组DNA技术、人类基因组计划的完成使得许多疾病靶位日渐明朗,而对免疫系统机制的逐渐了解也使得细胞因子在许多疾病治疗中的应用...
- 华江舟
- 关键词:克隆巨噬细胞集落刺激因子脾脏淋巴细胞可溶表达
- 文献传递
- 小鼠白细胞介素6的克隆表达纯化及鉴定被引量:1
- 2009年
- 目的构建小鼠白细胞介素6(mIL-6)工程菌,通过诱导表达和纯化,得到较高纯度的重组mIL-6融合蛋白。方法提取小鼠脾脏淋巴细胞总RNA,RT-PCR扩增得到mIL-6基因片段,克隆入pReceiver-B56x表达载体,转化BL21,诱导表达重组蛋白,采用亲和层析纯化。结果工程菌采用LB培养基,14℃、1mmol/L的IPTG诱导,表达量占菌体蛋白总量的33.3%,部分为可溶表达。超声破碎菌体,离心后取上清液,经过亲和层析一步纯化,目的蛋白纯度达91.3%。结论构建了高效表达mIL-6的工程菌,目的蛋白部分为可溶表达,为进一步研究白细胞介素6在促进凝血、造血等方面的生物学功能以及其与疾病发生发展的相互关系,并基于此基础上的相关药物开发研究奠定了基础。
- 华江舟王菊芳王小宁
- 关键词:白细胞介素6融合蛋白纯化