吴丽娜
- 作品数：46 被引量：124H指数：7
- 供职机构：郑州大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目中华医学会临床医学科研专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过表达FoxO1对高糖诱导下大鼠肾小球系膜细胞细胞外基质分泌的影响被引量：1
- 2014年
- 目的 研究叉头转录因子O1（FoxO1）过表达对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞（MCs）细胞外基质（ECM）蛋白分泌的影响及其作用机制.方法 以含组成性激活突变型（CA）FoxO1编码序列的慢病毒载体（LV-CA-FoxO1）及空慢病毒载体（LV-NC-GFP）转染MCs.实验分4组：正常糖（5.6 mmol/L）组（NG组）,高糖（25 mmol/L）组（HG组）、高糖＋LV-CA-FoxO1组（LV-CA组）、高糖＋空病毒载体组（LV-NC组）.各组培养72 h后,实时荧光定量PCR（Real-timePCR）检测FoxO1、纤维连接蛋白（FN）、Ⅰ型胶原蛋白（Col Ⅰ）、Ⅳ型胶原（ColⅣ）、转化生长因子β1（TGF-β1）和TGF-β Ⅰ型及Ⅱ型受体（TGF-βR Ⅰ/Ⅱ）mRNA的表达水平;Western印迹法检测FoxO1、磷酸化FoxO1（p-FoxO1）、TGF-β1、TGF-βRⅠ/Ⅱ的蛋白表达;细胞免疫荧光化学检测TGF-βR Ⅰ在细胞内表达分布.结果 （1） FoxO1表达及活性改变：HG组FoxO1 mRNA及蛋白表达与NG组相比差异均无统计学意义（均P ＞0.05）,p-FoxO1蛋白表达高于NG组（P＜0.05）;与HG组相比,LV-CA组FoxO1mRNA与蛋白表达水平均高于HG组（mRNA：为17.36±1.13比1.01 ±0.12,蛋白：4.38±0.09比0.93 ±0.10,均P＜0.05）,p-FoxO1/FoxO1低于HG组（P＜0.05）,FoxO1表达增加,转录活性增强.（2） ECM蛋白分泌改变：HG组FN、Col Ⅰ及ColⅣmRNA表达高于NG组（均P＜0.05）,LV-CA组FN、Col Ⅰ及ColⅣ表达低于HG组（均P＜0.05）.（3） TGF-β传导通路激活改变：HG组TGF-β1、TGF-βRⅠ/Ⅱ表达均高于NG组（均P＜0.05）,而LV-CA组上述指标均低于HG组（均P＜0.05）;细胞免疫荧光化学结果提示,LV-CA组TGF-βR Ⅰ在细胞内分布与HG组相比减少.LV-NC组上述指标与HG组相比差异均无统计学意义（均P＞0.05）.结论 FoxO1能够抑制TGF-β传导通路的激活,从而减少MCs在高糖诱导下过度分泌ECM蛋白.
- 郭丰王庆祝秦贵军周英旎吴丽娜刘飞
- 关键词：叉头转录因子类肾小球系膜细胞细胞外基质
- 叉头状转录因子01对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞氧化应激的影响被引量：7
- 2012年
- 目的通过激活和抑制叉头状转录因子01（Fox01）活性及表达，探讨其对高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞（MCs）氧化应激的作用。方法采用脂质体转染法将FoxOl短发夹样RNA（Fox01shRNA）质粒载体稳定转染MCs；用高糖（30．0mmol／L）和白藜芦醇（Resv20．0txmol／L）培养稳定转染后的MCs。以5．6mmol／L葡萄糖培养的MCs为正常对照组（NG），将高糖培养的MCs分为5组：单纯高糖组（HG）、HG＋Resv组、HG＋Fox01shRNA转染组、HG＋Resv＋Fox01shRNA转染组、HG＋转染阴性对照组（shNC）。培养72h后，用荧光酶标仪检测各组MCs内活性氧（ROS）水平；逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测去乙酰化酶（Sirtl）、Fox01、锰超氧化物歧化酶（MnSOD）mRNA表达；Westernblotting法检测Fox01及磷酸化Fox01（p-Fox01）水平。多组间数据比较采用单因素方差分析。结果与NG组相比，HG组SirtlmRNA表达下降，p-Fox01水平升高，MnSODmRNA表达下降，ROS水平升高，差异均有统计学意义（t=12．38、13．27、14．13、8．36，均P〈0．05）。与HG组相比，HG＋Fox01shRNA转染组Fox01mRNA表达被抑制，MnSODmRNA表达更低，ROS水平更高，差异均有统计学意义（t=20．61、13．61、10．13，均P〈0．05）；HG＋Resv组SiitlmRNA表达升高，p-Fox01水平下降，MnSODmRNA表达升高，ROS水平下降，差异均有统计学意义（t=6．02、10．69、5．39、5．37，均P〈0．05）。与HG＋Resv组比较，HG＋Resv＋Fox01shRNA转染组，Fox01mRNA表达被抑制，MnSODmRNA表达降低，ROS水平升高，差异均有统计学意义（t=22．53、15．31、14．63，均P〈0．05）。结论Fox01是调节MCs内ROS水平的重要转录因子，其可能通过激活下游抗氧化靶基因MnSOD的表达，保护MCs对抗氧化应激。
- 吉鸿飞秦贵军张伟伟吴丽娜马晓君
- 关键词：叉头转录因子类氧化性应激肾小球系膜细胞高糖
- 过表达的活性叉头状转录因子O1通过上调细胞周期蛋白激酶抑制剂p27Kip1的表达抑制大鼠系膜细胞的过度增殖
- 目的 通过增强活性叉头状转录因子O1(FoxO1)的表达,分析大鼠系膜细胞株HBZY-1细胞(RMCs)中细胞周期蛋白激酶抑制剂(p27Kip1)变化,探讨其对高糖培养RMCs的细胞周期及细胞增殖的影响.
- 秦贵军刘飞王庆祝马笑堃吴丽娜
- 糖尿病肾病大鼠肾小球FoxO1表达和作用的实验研究
- 目的:观察糖尿病肾病大鼠肾小球FoxO1的表达,探讨其与糖尿病肾病发生发展的关系。方法:30只健康8周龄雄性SD大鼠,链尿佐菌素诱导建立糖尿病大鼠模型,并采用随机数字表法分为糖尿病组(普通饲料连续喂养4周)和糖尿病肾病组...
- 秦贵军吴丽娜张娜张颖辉马笑堃
- 文献传递
- 河南省成年男性骨转换标志物水平及与代谢综合征的相关性分析
- 2020年
- 目的探讨河南省不同年龄段成年男性血清骨转换标志物水平及与代谢综合征(MS)的相关性。方法2015年12月至2016年3月,采用多阶段分层整群随机抽样法从甲状腺疾病和糖尿病全国调查-2014研究——河南分中心调查队列中抽取697例男性受试者,所有受试者填写调查问卷,测量身高、体重、腰围和血压,行口服葡萄糖耐量试验,抽空腹静脉血测定糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、骨钙素、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PⅠNP)、β-Ⅰ型胶原交联羧基末端肽(β-CTX)、25羟维生素D[25(OH)D]和甲状旁腺素(PTH)水平。采用Spearman相关分析和二分类Logistic回归分析探讨骨转换标志物与MS及其各组分的相关性。结果本研究最终纳入697名男性受试者,年龄(46.6±15.9)岁。体质指数(BMI)17.1~39.0 kg/m^2,平均(25.97±3.69)kg/m^2。校正年龄、PTH、25(OH)D、骨钙素、PⅠNP、β-CTX和吸烟后,BMI仍是MS的危险因素(OR=1.263,95%CI 1.198~1.332)。Spearman相关分析结果显示,骨钙素、PⅠNP与MS呈明显负相关(r=-0.154、-0.107,均P<0.01),β-CTX与MS无明显相关性。二分类Logistic回归分析结果显示,骨钙素是MS、腹型肥胖、高血糖、高血压及高TG的保护因素,校正了年龄、PTH、25(OH)D和BMI后,骨钙素仍是高血糖(OR=0.971,95%CI 0.947~0.995)和高TG(OR=0.955,95%CI 0.931~0.980)的保护因素;再进一步校正吸烟,结果无明显变化。PⅠNP是MS、腹型肥胖、高血糖和高血压的保护因素;校正了年龄、PTH和25(OH)D后,PⅠNP仍是腹型肥胖(OR=0.993,95%CI 0.988~0.999)的保护因素;进一步校正BMI和吸烟后,PⅠNP与MS及MS各组分无明显相关性。结论体重控制对于预防成年男性MS至关重要,较高水平的骨钙素和PⅠNP可能有助于预防和延缓MS。
- 王娇马晓君刘彦玲赵艳艳李志臻郭丰吴丽娜马笑堃秦贵军滕卫平
- 关键词：骨钙素代谢综合征
- 叉头状转录因子O1对高糖环境下小鼠足细胞上皮间质转分化的影响及机制研究被引量：3
- 2016年
- 目的
研究叉头状转录因子O1（FoxO1）调节高糖下小鼠足细胞上皮间质转分化及与转化生长因子β1（TGF-β1）/Smad3信号通路的关系。
方法
分别将持续激活突变型FoxO1慢病毒载体（LV-CA-FoxO1）、FoxO1短发夹样RNA慢病毒载体（LV-FoxO1-shRNA）和空慢病毒载体（LV-NC）转染足细胞。实验分5组：正常糖浓度组（5.6 mmol/L，A组）、高糖组（25 mmol/L，B组）、高糖＋LV-CA-FoxO1组（C组）、高糖＋LV-FoxO1-shRNA组（D组）、高糖＋LV-NC组（E组）。各组培养24、48、72 h后，实时荧光定量PCR、免疫印迹法检测FoxO1、TGF-β1、Smad3、nephrin、desmin的表达水平；细胞免疫荧光法观察FoxO1在足细胞中的定位；酶联免疫吸附法检测72 h上清中TGF-β1水平。
结果
与A组相比，B组FoxO1 mRNA及蛋白表达无变化（均P〉0.05），磷酸化FoxO1（p-FoxO1）/FoxO1升高，TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达升高，p-Smad3/Smad3升高，nephrin表达减少，desmin表达增多，且nephrin及desmin变化呈时间依赖性（均P〈0.05）。与B组相比，C组FoxO1 mRNA及蛋白表达升高，p-FoxO1/FoxO1降低，TGF-β1表达减少，p-Smad3/Smad3降低，nephrin表达增多，desmin表达减少（均P〈0.05）。D组与B组相比，FoxO1 mRNA及蛋白表达降低，p-FoxO1/FoxO1降低，TGF-β1、Smad3 mRNA及蛋白表达升高，p-Smad3/Smad3降低，nephrin表达降低，desmin表达升高（均P〈0.05）。
结论
FoxO1可通过抑制TGF-β1/Smad3传导通路的激活，抑制高糖下足细胞发生上皮间质转分化。
- 杜萌萌王庆祝秦贵军李雯马晓君吴丽娜赵水英郭丰王欢欢
- 关键词：糖尿病肾病足细胞上皮间质转分化转化生长因子Β1
- 糖尿病肾病大鼠肾小球叉头状转录因子O1的表达和作用被引量：3
- 2011年
- 目的观察糖尿病肾病大鼠肾小球叉头状转录因子O1（FoxO1）的表达，探讨其与糖尿病肾病发生、发展的关系。方法8周龄健康雄性sD大鼠30只，链脲佐菌素（STZ）诱导建立糖尿病大鼠模型，采用随机数字表法分为糖尿病组（13只，普通饲料连续喂养4周）和糖尿病肾病组（13只，普通饲料连续喂养12周）。选取健康同龄大鼠18只作为正常对照组（NC组）。4、12周末检测体质量（BW）、血糖（BG）、血肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、24h尿蛋白（UPro／24h）及尿白蛋白定量（UAIb）。处死动物后计算肾重指数（KI）；分光光度计测定大鼠肾皮质丙二醛（MDA）含量和总超氧化物歧化酶（SOD）活性；免疫组化法检测肾小球FoxO1蛋白、胶原Ⅳ及纤连蛋白水平；RT—PCR检测肾皮质Fox01mRNA水平；光镜及电镜下观察肾脏组织形态学变化。组间比较采用独立样本t检验。结果糖尿病肾病组肾皮质MDA蛋白、肾小球胶原Ⅳ和纤连蛋白水平显著高于糖尿病组[分别为（3．49±0．31）VS（2．34±0．28）nmol／mgProt，20．1±1．3VS10．1±1．0，10．6±1．3VS6．3±1．0，t值分别为9．290、20．967、9．119，均P〈0．05]；糖尿病肾病组肾皮质SOD活性蛋白、Fox01mRNA表达水平明显低于糖尿病组[分别为（23±8）VS（43±6）U／mgProt，0．20±0．06VS0．35±0．05，t值分别为7．069、6．717，均P〈0．05]。FoxO1蛋白表达水平各组问比较无显著差异（均P〉0．05）。结论糖尿病肾病大鼠肾皮质FoxO1 mRNA表达水平降低，其机制可能通过下调其抗氧化靶基因使。肾脏氧化应激反应增强，从而参与糖尿病肾病发生发展的过程。
- 秦贵军吴丽娜张娜张颖辉马笑堃
- 关键词：活性氧糖尿病肾病
- 过表达叉头状转录因子O1对波动性高糖诱导的小鼠足细胞线粒体及细胞功能损伤的影响
- 李雯秦贵军王庆祝杜萌萌马晓君吴丽娜
- 二甲双胍对2型糖尿病合并亚临床甲状腺功能减退症患者血清促甲状腺激素水平的影响及性别差异分析被引量：6
- 2016年
- 目的探讨二甲双胍对2型糖尿病(T2DM)合并亚临床甲状腺功能减退症(SCH)患者血清促甲状腺激素(TSH)水平的影响,并分析性别差异在其中的作用。方法将97例T2DM合并SCH患者按照是否服用二甲双胍分为组1(双胍组)和组2(非双胍组),另选35例应用二甲双胍但无甲状腺疾病的T2DM患者作为对照(组3)。比较3组患者用药前及治疗6个月后甲状腺功能及生化特征,采用相关分析和多元逐步回归分析影响TSH水平的因素。结果治疗6个月后,组1血清TSH水平较治疗前显著降低[(6.1±2.3)m IU/L vs.(3.2±1.4)m IU/L,P<0.05],女性TSH降低幅度大于男性,差异有统计学意义[(3.5±1.2)m IU/L vs.(2.1±1.7)m IU/L,P<0.05],而治疗前后FT3及FT4水平均无明显变化(P>0.05)。组2及组3治疗前后血清TSH、FT3及FT4水平均无明显变化。相关分析显示TSH变化值与性别、HOMA-IR呈显著负相关(r=-0.196、-0.220,均P<0.01),与腹高变化值呈显著正相关(r=0.627,P=0.000),多元逐步回归分析显示性别(P<0.01)和腹高变化值(P<0.01)是TSH水平变化值的独立影响因素。结论二甲双胍可降低T2DM合并SCH患者TSH水平,尤其是女性患者更为显著,这可能与减少内脏脂肪蓄积,改善腹型肥胖有关。
- 马晓君李志臻吴丽娜张颖辉郭丰刘飞任高飞秦贵军
- 关键词：亚临床甲状腺功能减退症二甲双胍促甲状腺激素性别
- 过表达叉头框转录因子O1对高糖诱导下大鼠肾小球系膜细胞纤溶酶原激活物抑制物1分泌的影响
- 目的 研究过表达叉头框转录因子O1(FoxO1)对高糖诱导下大鼠肾小球系膜细胞(MCs)纤溶酶原激活物抑制物1(PAI-1)分泌的影响及机制.方法 构建含组成性激活突变型(CA)FoxO1编码序列的慢病毒载体(LV-CA...
- 郭丰秦贵军王庆祝周英旎吴丽娜马晓君
