吴海珍
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- 肠球菌心内膜炎抗原efaA在粪肠球菌生物膜形成中的作用
- 目的:探讨肠球菌心内膜炎抗原efaA与肠球菌生物膜形成之间的相关性,为深入研究肠球菌生物膜的致病性及耐药性奠定基础。
方法:
1.利用普通光学显微镜观察efaA~+、efaA~-粪肠球菌在玻片上的生物...
- 吴海珍
- 关键词：粪肠球菌生物膜实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 粪肠球菌心内膜炎抗原EfaA在生物膜形成中的作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨粪肠球菌心内膜炎抗原EfaA在生物膜形成中的作用。方法微量滴定板法测定生物膜形成能力,将efaA+、efaA-粪肠球菌S14、S14-pAT28、S14-pAT28-efaA分别接种到96孔板,37℃培养24h形成生物膜,结晶紫染色,测定孔板底部生物膜的OD570值;MTT法比较S14、S14-pAT28、S14-pAT28-efaA所形成的生物膜的活菌含量OD492;共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察比较efaA+、efaA-肠球菌形成的生物膜的平均厚度、最大厚度。结果 efaA+转化株在各培养时间点微量滴定板法测定的生物膜形成能力OD570值、MTT法测定的OD492活菌含量、CLSM观察的生物膜的平均厚度、最大厚度均大于野生株及空质粒转化株,P<0.05;空质粒转化株与野生株比较无显著性差别,P>0.05。结论粪肠球菌心内膜炎抗原efaA基因有利于肠球菌生物膜的形成。
- 强华朱苹刘光英吴海珍林任玺
- 关键词：粪肠球菌生物膜
- 粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白的原核表达及纯化被引量：3
- 2010年
- 目的原核表达纯化粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白,为粪肠球菌心内膜炎的致病机制研究及临床血清学诊断奠定基础。方法从粪肠球菌中扩增efaA基因,相应酶切后,克隆到原核表达载体pET30a中,构建pET30a-efaA重组质粒。经BamhI、XhoI酶切及测序鉴定,将pET30a-efaA质粒转化入BL21(DE3)。以IPTG诱导BL21(DE3)表达efaA融合蛋白,亲和层析纯化重组蛋白,SDS-PAGE、WesternBlot分析鉴定。结果PCR体外扩增efaA基因产物约943bp,重组表达质粒pET30a-efaA在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,通过亲和层析获得纯化重组蛋白。SDS-PAGE、Western免疫印迹显示蛋白表达带的分子量约为34kd。结论粪肠球菌心内膜炎抗原efaA蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达并纯化。
- 强华吴海珍羽晓瑜朱苹
- 关键词：肠球菌原核表达
