安威 作品数:105 被引量:314 H指数:9 供职机构: 首都医科大学基础医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 北京市自然科学基金 北京市重点实验室开放基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 农业科学 更多>>
2型糖尿病KKAy小鼠海马神经元存活信号转导途径的异常及APP17肽对其的改善作用 被引量:6 2004年 目的 观察APP17肽对 2型糖尿病KKAy小鼠大脑海马神经元一些信号转导蛋白表达的影响。方法 将KKAy小鼠分为正常对照组 (C组 )、糖尿病组 (DM组 )和APP17肽治疗组 (DM +APP17P组 )。APP17肽皮下注射 ,每周 3次 ,每次 8μg·kg-1。 12wk后将 3组小鼠颈部离断 ,处死 ,冰浴中快速分离海马组织 ,匀浆后 ,用于免疫沉淀并蛋白印迹检测 ,部分快速灌注固定做免疫组化染色和Tunel细胞染色。结果 DM组 pMAPK的表达低于C组和DM +APP17P ;CREB、pCREB、Bax、Bcl 2的表达 3组之间差异无显著性。结论 2型糖尿病KKAy小鼠存在海马胰岛素信号转导通路的异常 ,主要表现为Ras途径和PI3 K两条途径的异常。这种信号转导途径的异常可通过神经元一定程度上的自我调节而改善 ,不出现凋亡状态 ;App17肽作为神经营养因子能激活海马神经元存活信号转导通路上游成分 。 庄晓明 姬志娟 陈莉 赵志炜 安威 盛树力关键词:APP17肽 2型糖尿病 KKAY小鼠 己酮可可碱抑制大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝细胞的凋亡 2009年 目的探讨凋亡相关基因在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)发生发展中的作用机制,以及己酮可可碱(PTX)对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠的抗凋亡作用。方法SD大鼠68只,标准饲料喂养1周后,随机分为8组:8周对照组(6只),8周模型组(10只),12周对照组(6只),12周模型组(10只),12周治疗组(10只),16周对照组(6只),16周模型组(10只),16周治疗组(10只)。用高脂饮食法建立大鼠非酒精性脂肪性肝炎模型,腹主动脉取血检测血浆谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,采用免疫组织化学的方法检测肝Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达情况,应用RT-PCR检测Caspase-3 mRNA的转录情况。结果各模型组ALT、AST均高于对照组,且模型组的ALT、AST逐渐增高。免疫组织化学实验结果表明,与同周数的对照组相比,各周模型组Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达均有显著性增加(P〈0.05),与同周数的模型组相比,12周、16周PTX治疗组Bcl-2、Bax、Caspase-3的蛋白表达有显著的降低(P〈0.05)。结论细胞凋亡是NASH的一个重要发病机制,己酮可可碱对NASH大鼠肝脏细胞凋亡有一定的抑制作用。 郭敏 张华 王小利 曾晓蓓 孙海梅 张立新 安威关键词:己酮可可碱 非酒精性脂肪性肝炎 BCL-2 BAX CASPASE-3 大鼠肝刺激因子对CCl_4致肝损伤小鼠保护作用的机制研究——Ⅰ.HSS的抗氧化作用 被引量:1 1990年 本工作观察了大鼠肝刺激因子(HSS)对CCl_4损伤小鼠后,肝组织和血清脂质过氧化物丙二醛(MDA)及自由基清除剂谷胱甘肽(GSH)含量的影响。结果发现,HSS(0.1mg/g 体重,ip)可使CCl_4(10%,5ml/kg)中毒后48 h,肝组织 MDA 值的升高幅度明显降低(6.23±0.98/nmol/mg 蛋白vs.4.17±1.67nmol/mg 蛋白,P<0.005),但血清MDA值的下降幅度不明显。同时肝组织GSH含量明显高于CCl_4损伤组(3236±472μg/g vs.2007±589μg/g,P<0.001)。上述结果提示,HSS具有抗氧化作用,降低CCl_4自由基对肝细胞膜的损伤作用,保护受损肝脏。 安威 张宝弘 梅懋华关键词:肝刺激因子 四氯化碳 肝损伤 几种不同提取线粒体的方法对线粒体含量及活性的影响 被引量:5 2010年 目的比较几种不同的提取线粒体的方法对线粒体蛋白浓度及活性的影响。方法采用蔗糖密度梯度离心法、普利莱试剂盒提取方法和Pierce线粒体提取试剂盒方法分别提取线粒体,测定提取得到的线粒体蛋白浓度、污染情况和活性。结果同样数量的细胞采用普利莱法提取得到的线粒体蛋白浓度高于其他2种方法所提取的线粒体蛋白浓度(P<0.05);采用Westernblotting的方法测定提取的线粒体发现采用普利莱法提取得到的线粒体中胞质蛋白污染较其他2种方法提取得到的线粒体少,线粒体纯度高;测定线粒体中细胞色素C和ATP含量后发现同样采用普利莱法提取得到的线粒体活性最高。结论普利莱法提取线粒体的方法优于蔗糖密度梯度离心法和Pierce线粒体提取试剂盒方法。 吴媛 董凌月 安威 安云庆关键词:线粒体 三明治构型原代大鼠肝细胞培养细胞极性重建及功能的研究 2009年 目的研究三明治构型培养大鼠原代肝细胞的形态学变化、极性重建过程并对其功能进行测定。方法改良原位两步法门静脉胶原酶灌注分离单肝细胞,三明治构型培养肝细胞,观察肝细胞的形态学变化,测定特异性膜区域蛋白的重新分布,检测白蛋白mRNA及肝细胞功能。结果平均每个鼠肝可获取(2-3)×10^8个肝细胞,活率在93%±3%,纯度在96%±3%。培养6-8h后,肝细胞排列成肝索样结构。3d后,白蛋白mRNA表达明显增强。4d后,DPPIV几乎完全集中在胆小管膜区。5d后,胆小管完全连接成网络。形态维持达49d以上。结论三明治构型肝细胞培养体系更接近于肝细胞体内生长环境,肝细胞可在较长时间内保持良好的形态结构和功能。 王莹 张先杰 孙家邦 宋茂民 安威关键词:细胞 三明治 肝细胞 原代培养 MRNA 非酒精性脂肪肝病大鼠肝刺激因子的下调与凋亡的研究 目的 研究肝刺激因子(HSS)在非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝脏的表达及其与肝细胞凋亡的关系。方法 采用高脂饮食饲喂大鼠8周、12周和16周,以诱导NAFLD模型,平行设置对照组。于造模结束时,利用HE染色观察肝脏... 江瑛 赵妙云 安威关键词:肝刺激因子 非酒精性脂肪性肝病 凋亡 胰高糖素-胰岛素合用对实验性肝损伤小鼠的保护作用 1989年 本工作采用昆明种小鼠,用D-氨基半乳糖(D-GAL)损伤肝,观察联合应用胰高糖素-胰岛素(GI)对动物的保护作用,结果如下:预先给予和不给予GI相比较,给予GI不仅降低D-GAL对小鼠的致死率(25.0%vs.48.9%,P<0.05),而且使D-GAL所引起的动物血清AST和总胆红素含量增高的幅度明显降低(225.65±69.14 ∪/L vs 497.27±193.22∪/L,P<0.01;及0.11±0.03mg%vs.0.17±0.04mg%,P<0.001),肝组织损伤程度亦明显减轻。但血清总蛋白含量则无改变。这些结果提示,GI合用可明显减轻D-GAL对小鼠肝脏损伤的程度,故可以认为GI对肝具有保护作用。 安威 梅懋华关键词:肝损伤 D-氨基半乳糖 胰岛素 胰高糖素 丁酸钠诱导体外培养的大鼠肝卵圆细胞分化为成熟肝细胞 被引量:13 2004年 目的 探讨分化刺激剂丁酸钠对体外培养的大鼠肝卵圆细胞分化的影响。 方法 从喂养含0.1%乙硫氨酸的胆碱缺乏性饮食4-6周的大鼠肝脏中分离出肝卵圆细胞,用免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)等方法对其进行鉴定。用0.7 5 mmol/L丁酸钠处理大鼠肝卵圆细胞后,姬姆萨染色观察细胞表型改变,western blot检测细胞白蛋白的表达水平。 结果 免疫细胞化学结果显示分离出的细胞既表达成熟肝细胞的标志物白蛋白,也表达胆管细胞的标志物细胞角蛋白19,RT-PCR结果显示这些细胞还表达干细胞的标志物c-kit,但不表达造血干细胞的标志物CD3(?),表明这些细胞是大鼠肝前体细胞--肝卵圆细胞。0.7 5 mmol/L丁酸钠能诱导大鼠肝卵圆细胞出现明显的表型改变,细胞变大、变圆,核浆比减小,且双核细胞数增多,约占总细胞数的50%左右,同时western blot的结果显示0.75 mmol/L丁酸钠能够提高大鼠肝卵圆细胞白蛋白的表达水平。 结论 分化刺激剂丁酸钠能诱导体外培养的大鼠肝卵圆细胞向成熟肝细胞分化。 王萍 贾继东 唐淑珍 阎钟钰 尤红 丛敏 王宝恩 陈丽 安威关键词:肝卵圆细胞 丁酸钠 成熟肝细胞 体外培养 人鼠 肝刺激因子促进过氧化氢诱导的肝星形细胞凋亡 被引量:4 2018年 目的肝刺激因子(hepatic stimulator substance, HSS)可以抑制肝纤维化,而且在肝星形细胞中表达,但是其在肝星形细胞中的作用尚不清楚。因此本研究探讨肝刺激因子对肝星形细胞凋亡的影响,从而为研究HSS抑制肝脏纤维化的机制奠定基础。方法选择人肝星形细胞系LX-2作为研究对象,利用瞬时转染的方法构建过表达HSS的细胞模型后,使用2.5μmol/L H_2O_2刺激细胞20min诱导细胞凋亡;利用Hoechst 33342染色、TUNEL染色、Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,caspase 3/7活性检测试剂盒检测caspase 3/7活性,进而分析HSS对LX-2细胞凋亡的影响。结果在H_2O_2刺激下,过表达HSS的细胞与转染对照质粒细胞相比,Hoechst 33342染色显示细胞凋亡数目增多,TUNEL染色阳性细胞数增多,流式细胞术检测Annexin V和PI双阳性细胞数显著增多,caspase 3/7活性显著性升高。结论 HSS可以促进H_2O_2诱导的肝星形细胞凋亡。 艾伟伦 董凌月 安威关键词:肝刺激因子 肝星形细胞 细胞凋亡 HSS提高自噬保护急性酒精性肝损伤的研究 细胞自噬是一种关键性的溶酶体降解途径,它能通过降解细胞中的一些成分,如受损的细胞器和细胞中的长寿蛋白质而维持细胞的生理功能和细胞存活。 刘丽敏 安威关键词:自噬 急性酒精性肝损伤