徐军
- 作品数：34 被引量：73H指数：5
- 供职机构：沈阳医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：沈阳市科技计划项目辽宁省教育厅资助项目沈阳科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学理学更多>>
- 低温聚合法在胶体金免疫电镜技术的应用
- 2005年
- 吴鹏吴璠韩琳徐军
- 关键词：LR细胞抗原
- 人胎盘来源Ⅳ型胶原蛋白的提取与纯化被引量：3
- 2013年
- 目的从人胎盘中分离纯化Ⅳ型胶原蛋白,为制备其抗体提供抗原。方法选择人胎盘为提取原料,用胃蛋白酶消化、氯化钠盐析、凝胶化、超速离心、离子交换层析等方法,提取纯化Ⅳ型胶原蛋白。采用SDS-PAGE对提取的Ⅳ型胶原蛋白进行鉴定。结果胃蛋白酶消化法,使获得胶原蛋白的胶原链部分断裂,凝胶化方法可预先分离出组织中的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型胶原蛋白,保留了Ⅳ、Ⅴ胶原蛋白,DEAE-Sephrose层析图表明,层析柱吸附的蛋白经洗脱得一主峰,经SDS-PAGE证实提取的Ⅳ型胶原蛋白的分子量80Kd和40Kd两条带。结论从人胎盘中提取的Ⅳ型胶原蛋白纯度高,符合Ⅳ型胶原的特征。提取材料广泛、实验条件简便,结果可靠。
- 吴鹏高诗博徐军
- 关键词：凝胶化纯化
- 蛇毒神经生长因子活性多肽的筛选方法
- 本发明涉及生物技术领域，具体涉及蛇毒神经生长因子活性多肽的筛选方法。其包括：利用sputa NGF（vNGF）为模板构建融合蛋白质；通过pBluscriptIISK+和pQE30构建质粒表达系统；通过6X组氨酸回收提纯技...
- 徐军吴鹏祁荣张忠
- 文献传递
- 运用TUNEL技术检测胃粘膜活检组织凋亡细胞
- 1999年
- 细胞凋亡，亦称程序化细胞死亡，是由基因调控的细胞主动死亡过程。当凋亡发生时，核内的核酸内切酶活化，将ＤＮＡ降解为１８０～２００ｂｐ及其倍数的片段。１９９２年Ｇａｖｒｉｅｌｉ等［１］创立了脱氧核糖核酸末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记（ＴＵＮＥＬ）技...
- 徐军张忠董明袁媛
- 关键词：TUNEL技术胃粘膜活检组织细胞凋亡组织染色
- 人血浆来源血管抑素的分离与纯化
- 2008年
- 韩琳吴鹏徐军
- 关键词：血浆血管抑素
- 微波消解-火焰原子吸收光谱法测定幼儿血液中的微量元素被引量：3
- 2011年
- 目的:建立微波消解处理血液样品,利用原子吸收光谱仪检测全血微量元素的方法。方法:取健康儿童静脉血1ml,分别取0.4 ml分为实验组和对照组。实验组采用微波消解法处理血液样品:取新鲜抗凝静脉血0.4 ml,加入8.0 ml硝酸,2.0 ml 30%过氧化氢进行微波消解。对照组采用直接稀释法对样品进行处理:取新鲜抗凝静脉血0.4 ml加基体改进剂定容至10 ml,使用时稀释10倍。使用日立Z-2000塞曼原子吸收分光光度计检测实验组和对照组微量元素的含量。结果:采用微波消解方法制备的样品经检测,其各项指标均高于直接稀释方法制备的样品检测结果。结论:微波消解制备样品的方法,结果稳定,减少污染,数据可靠性大。通过加标实验和精密度实验证明了采用该方法制备样品符合测试条件,且结果的重现性良好。因此,微波消解方法是原子吸收分光光度仪检测样品有效的前处理方法。
- 吴鹏徐军郭丽祁荣韩琳张忠
- 关键词：火焰原子吸收光谱法微波消解微量元素
- 人胎盘来源的金属蛋白酶抑制因子-3的分离纯化及性质研究
- 2001年
- 目的 首次从人胎盘中分离纯化了天然型TIMP 3 ,并建立了TIMP 3酶联免疫测定方法。方法 人胎盘来源的TIMP 3的纯化 ,首先利用 4Mol/L尿素Tris缓冲液 (pH8.0 ) ,在除去多数水溶性蛋白的胎盘匀浆液中提取难溶性蛋白 ,然后经过CM5 2阳离子交换树脂和SephacrylS 2 0 0凝胶过滤二步柱层析。结果 SDS聚丙酰胺凝胶电泳显示最后分离结果 ,分别为 2 7KD和 2 4KD的两条蛋白带。Westernblotting结果表明 ,分子量为 2 7KD蛋白为N末端糖化的TIMP 3、分子量为 2 4KD的蛋白为非糖化的TIMP 3、两者的比例约为 1∶3。对比尿素抽提液TIMP 3的纯化产率为 2 4 %,纯化倍数约为 3 2 0 0倍。结论 纯化的天然型TIMP 3对MMP 1有明显的抑制活性。非糖化的TIMP 3IC50 为 1 .1× 1 0 - 1 0 M ,糖化的TIMP 3IC50 为 1 .2× 1 0 - 1 0 M ,显然比重组TIMP 3对MMP 1的抑制活性要高许多 (rTIMP 3的IC50 为 1 .2× 1 0 - 8M)。研究表明 ,TIMP 3对某些肿瘤转移有明显的抑制效应。此项研究对进一步阐明MMPs和TIMPs在机体内平衡关系的改变对肿瘤浸润转移的影响作用有着重要的意义。
- 邹黎明徐军罗阳伊德林曾艳潘晓蔚王嘉伦
- 关键词：组织金属蛋白酶抑制因子基质金属蛋白酶蛋白纯化
- 人胎盘天然金属蛋白酶抑制因子3的分离纯化(英文)
- 2006年
- 背景:基质金属蛋白酶是一类可促进肿瘤生长和转移的蛋白分解酶家族,其活性可被组织金属蛋白酶抑制因子所抑制。其中组织金属蛋白酶抑制因子3的抑制作用更为重要。目的:旨在从人胎盘中完全分离纯化天然组织金属蛋白酶抑制因子3,并建立组织金属蛋白酶抑制因子3酶联免疫测定方法。设计:单一样本观察。单位:沈阳医学院中心实验室。材料:人胎盘来自沈阳医学院附属奉天医院妇产科(家属知情同意);基质金属蛋白酶1来自富士药品研究所。方法:实验于2001-03/2002-05在沈阳医学院中心实验室完成。①利用4mol/L尿素Tris缓冲液(pH8.0),制备胎盘匀浆液。②匀浆液经CM52阳离子交换树脂层析和SephacrylS-200凝胶过滤二步柱层析。③SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测相对分子量及纯度。④Westernblotting鉴定纯化蛋白的性质。⑤免疫荧光法测定组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制率。主要观察指标:①聚丙烯酰胺电泳法所示蛋白带相对分子质量。②Westernblot的显色结果。③组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制率。④纯化后组织金属蛋白酶抑制因子3的回收率。结果:①人胎盘分离纯化的组织金属蛋白酶抑制因子3分为非糖化和糖化两种,相对分子质量分别为24000和27000两种。②非糖化和糖化的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制活性分别为1.1×1010mol/L和1.2×1010mol/L。胎盘来源的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制活性明显高于重组的组织金属蛋白酶抑制因子3。③二步层析后组织金属蛋白酶抑制因子3的回收率为23.4%。结论:人胎盘胞外基质来源的组织金属蛋白酶抑制因子3是由非糖基化蛋白和糖基化蛋白组成;两种纯化的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1具有明显的抑制活性,且显著高于重组金属蛋白�
- 徐军吴鹏韩琳张忠
- 关键词：金属蛋白酶类组织抑制剂基质金属蛋白酶类
- 金黄色葡萄球菌SPA基因的克隆、表达及纯化被引量：6
- 2006年
- 目的:构建携带StaphylococcalproteinA(SPA)基因的原核表达载体,诱导表达具有活性的SPA。方法:用PCR从金黄色葡萄球菌基因组中扩增SPA基因并克隆入pET32a(+)载体中,在大肠杆菌BL21〈DE3〉中表达。表达产物经亲和层析进行纯化。结果:所构建的原核表达载体为高效表达载体,工程菌表达的SPA约占菌体总蛋白的40%,经亲和层析纯化后获得SPA,纯度达到99%。结论:成功地建立了制备及纯化SPA的方法,为SPA大量生产以及构建SPA融合表达体系奠定了基础。
- 徐军吴凡韩琳吴鹏张忠
- 关键词：基因克隆
- 植物胰岛素的分离纯化及降糖作用的实验动物研究
- ：探寻大量纯化苦瓜中植物胰岛素的技术方法.方法：采用盐析、阴离子交换层析和凝胶过滤层析三步技术纯化苦瓜中植物胰岛素,并行电泳、层析和动物实验鉴定,壳聚糖包封.结果：目的提取物于11000处出现一条电泳带,相对迁移率与胰岛...
- 徐军黄竹青吴鹏韩林张忠
- 关键词：苦瓜植物胰岛素降糖作用
