徐进
- 作品数：14 被引量：36H指数：4
- 供职机构：河北农业大学更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马铃薯早疫病菌检测试剂盒及检测方法
- 本发明属于植物病原真菌的种类分子鉴定技术领域，目的是提供一种基于聚合酶链式反应（PCR）技术的简便、快速和准确鉴定马铃薯叶片组织中早疫病菌的检测试剂盒和检测方法。检测试剂盒包括一对自行设计的专一性PCR引物和Mix，一对...
- 朱杰华杨志辉徐进郭倩倩杨毅清耿硕张维宏崔亚婧
- 文献传递
- 五种杀菌剂对马铃薯晚疫病菌孢子萌发的抑制作用被引量：2
- 2015年
- 测定河北双吉75%代森锰锌水分散粒剂、河北双吉80%代森锰锌可湿性粉剂、美国陶氏80%代森锰锌可湿性粉剂、25%双炔酰菌胺悬浮剂和68.75%氟菌·霜霉威悬浮剂5种杀菌剂对马铃薯晚疫病菌[Phytophthora infestans(Mont.)de Bary]孢子囊直接萌发、间接萌发(释放游动孢子)及游动孢子萌发的抑制作用。结果表明,5种杀菌剂对孢子囊直接萌发的抑制效果均比较好,而对孢子囊间接萌发和游动孢子萌发的抑制效果各不相同。其中,河北双吉75%代森锰锌水分散粒剂和河北双吉80%代森锰锌可湿性粉剂对孢子囊直接和间接萌发的抑制效果最显著,浓度在5μg/m L以上时抑制率均为100%。美国陶氏80%代森锰锌可湿性粉剂和25%双炔酰菌胺悬浮剂,浓度在20μg/m L时几乎能完全抑制孢子囊的直接萌发或间接萌发,68.75%氟菌·霜霉威悬浮剂对孢子囊间接萌发的抑制作用相对较差。游动孢子的萌发对5种药剂较为敏感,1μg/m L的药剂浓度就能使游动孢子萌发得到显著抑制。
- 朱丽丹徐进杨志辉朱杰华赵冬梅
- 关键词：杀菌剂孢子萌发抑制率
- 培养条件对茄链格孢产孢的影响被引量：13
- 2014年
- 茄链格孢Alternaria solani在体外培养条件下不产生或产生极少量的分生孢子。研究了培养基、菌丝损伤、紫外线照射和温度变化对7个茄链格孢菌株产孢的影响,发现这些处理方法对供试大多数菌株的产孢都有显著影响,确立了茄链格孢大量产孢的最优条件。利用优化后的条件对160株采自不同地区的茄链格孢进行体外诱导产孢,发现120株可大量产孢,占总数的75%,产孢量为1.26×104–5.03×104个/cm2。
- 刘丽丽朱杰华崔亚婧杨志辉徐进路文雅
- 关键词：马铃薯早疫病紫外线培养基
- 根癌农杆菌介导致病疫霉转化体系的建立被引量：2
- 2014年
- 为建立低成本、快速、高效的根癌农杆菌介导的致病疫霉转化体系，以菌株 HK0919为材料，从抗生素筛选浓度、共培养转膜方式、乙酰丁香酮（AS）浓度、共培养时间和共培养温度等方面对致病疫霉的转化体系进行了研究。综合各因素优化结果，建立的转化体系条件为：以1．0μg/mL的潮霉素B进行转化子筛选，采用玻璃纸作为共培养介质，AS浓度为200μmol/L，培养6 d，温度为22℃。在此条件下的转化效率为每106个游动孢子获得50～60个转化子。随机选取10个转化子，利用特异性引物对潮霉素抗性基因hph进行PCR扩增，转化子均能扩增出800 bp左右的预期条带；同时，利用根癌农杆菌vir基因特异引物对转化子进行 PCR扩增，排除了转化子被农杆菌污染所致的假阳性；转化子继代培养5代后，仍能在含潮霉素 B的黑麦培养基上生长。说明外源T DNA已成功整合到致病疫霉基因组中，并能稳定遗传。
- 赵冬梅何佳昱杨志辉朱杰华徐进
- 关键词：致病疫霉
- 河北省北部马铃薯早疫病菌对嘧菌酯敏感性的测定与分析被引量：4
- 2014年
- 选取2009-2011年采集自河北省张家口、承德两地的74株马铃薯早疫病菌（Alternaria solani）,用抑制分生孢子萌发的方法,进行嘧菌酯敏感性测定,旨在为生产上科学使用嘧菌酯提供理论依据。结果表明,嘧菌酯的EC50介于0.01-0.13μg/m L之间,平均EC50为0.04μg/m L。处于敏感基线的菌株（EC500.01-0.07μg/m L）占总数的87.84%。2009-2011年所采集的早疫病菌对嘧菌酯敏感性随年度略微有所下降,不同地区采集的菌株对嘧菌酯的敏感性也有差异。因此,河北省北部地区马铃薯早疫病的防控仍可以使用嘧菌酯,但不可盲目,并实时检测菌株的抗药性。
- 周园杨志辉徐进刘丽丽朱杰华
- 关键词：嘧菌酯敏感基线
- 致病疫霉NLP家族基因PITG_10839的克隆和功能分析被引量：1
- 2014年
- 【目的】分析致病疫霉(Phytophthora infestans)NLP(Necrosis-and ethylene-inducing like proteins)家族基因PITG_10839的致坏死功能及所编码蛋白的活性位点对其功能的影响。【方法】以PITG_10839作为研究对象,选inf1作为正对照,以致病疫霉菌株HK09-19的总RNA为模板,通过RT-PCR获得基因的cDNA全长序列。将所得cDNA与表达载体pBI121连接,构建所选基因的重组表达载体,并采用冻融法将其转入农杆菌LBA4404中。利用农杆菌介导的瞬时表达体系在本生烟(Nicotiana benthamiana)中对PITG_10839的表达和功能进行分析。利用over-lap PCR方法定点突变基因PITG_10839的活性位点,同时构建活性位点突变后的重组表达质粒,并通过农杆菌注射接种本生烟来研究各活性位点在基因坏死功能中所起的作用。通过荧光定量PCR分析致病疫霉游动孢子侵染马铃薯叶片后不同时期PITG_10839的表达模式。【结果】获得了PITG_10839和inf1的全长cDNA,分别为405及357 nt。同时,成功构建了PITG_10839和inf1的真核表达载体pBI121-10839和pBI121-inf1,并成功转入农杆菌。将含有重组质粒pBI121-10839的农杆菌注射接种本生烟,5 d后接种叶片开始逐渐黄化,7 d后叶片出现典型的皱缩坏死症状。然而含有对照重组质粒pBI121-inf1的农杆菌在注射接种3 d后,本生烟叶片便开始出现萎蔫,5 d时则出现坏死症状,7 d时坏死症状严重。进一步对PITG_10839编码蛋白的活性位点进行突变,发现D9A、E22A和D20A 3个氨基酸位点的突变使基因PITG_10839所编码蛋白的致坏死功能丧失,叶片仅出现轻微的黄化现象,然而H17A位点氨基酸的突变对该基因的致坏死功能没有影响,注射接种7 d后,仍然可以使本生烟叶片出现皱缩坏死的症状。同时,荧光定量PCR表明,致病疫霉游动孢子接种后不同侵染阶段PITG_10839的表达呈现出了不同水平的增加。接种后12 h至36 h,表达量变化水平稳定,增加了20倍左右;48 h�
- 赵冬梅杨志辉徐进朱杰华朱丽丹
- 关键词：致病疫霉功能分析
- 三种杀菌剂对马铃薯晚疫病的田间防效试验
- 试验用3种杀菌剂进行马铃薯晚疫病的田间防效试验,结果表明,3种杀菌剂对马铃薯晚疫病均具有明显的防效,68.75%氟吡茵胺·霜霉威、0.3%丁子香酚、50%氟吗啉·三乙膦酸铝的防效分别达到85.56%,76.67%和75....
- 冯洪敏朱杰华杨会亮徐进杨志辉
- 关键词：马铃薯晚疫病杀菌剂药效试验
- 文献传递
- 马铃薯品种对早疫病的离体叶片抗性鉴定被引量：2
- 2014年
- 选用抗病品种是防治马铃薯早疫病最经济有效的措施,为评价马铃薯品种对早疫病的抗性水平,利用NAA处理后的马铃薯离体叶片,在室内对国内的23个马铃薯品种早疫病抗性水平进行鉴定。通过测量病斑直径及发病程度进行综合评价分析,最终筛选出免疫品种6个、高抗品种1个、抗病品种6个、感病品种和高感品种各5个,为各品种的应用推广提供了可靠的理论依据。
- 王倩徐进杨志辉刘丽丽朱杰华
- 关键词：马铃薯品种早疫病离体叶片抗性鉴定
- 马铃薯早疫病菌的分子鉴定与田间早期诊断被引量：7
- 2013年
- 马铃薯早疫病由茄链格孢Alternariasolani引起，通常导致产量损失达30％以上。目前关于马铃薯早疫病菌的鉴定主要是基于形态特征进行。然而，该病菌在离体培养时不易产孢，增加了鉴定的难度。马铃薯早疫病的早期诊断在早疫病防控中占有重要地位，建立马铃薯早疫病菌的分子鉴定和早疫病的田间早期诊断技术将有助于防控措施的制定。本研究选择ITS序列作为早疫病菌分子鉴定的目标区域，通过ITS序列分析设计马铃薯早疫病菌的特异性引物，建立早疫病菌的分子鉴定技术并探索早疫病早期诊断技术。1材料与方法1．
- 郭倩倩杨志辉崔亚婧徐进朱杰华
- 关键词：早疫病菌马铃薯田间ITS序列分析特异性引物
- 马铃薯早疫病菌检测试剂盒及检测方法
- 本发明属于植物病原真菌的种类分子鉴定技术领域，目的是提供一种基于聚合酶链式反应（PCR）技术的简便、快速和准确鉴定马铃薯叶片组织中早疫病菌的检测试剂盒和检测方法。检测试剂盒包括一对自行设计的专一性PCR引物和Mix，一对...
- 朱杰华杨志辉徐进郭倩倩杨毅清耿硕张维宏崔亚婧
- 文献传递
