曾建明
- 作品数：84 被引量：184H指数：6
- 供职机构：广东省中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法
- 本发明提供结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法，设计对结核分枝杆菌进行定性、定量检测的引物、自身淬灭探针，引物的上游引物为5’-ACTCCATGGGATACGGCCCAGACTCCT-3’，下游引物为5’-CGCAAGCT...
- 陈茶张伟铮黄彬曾建明王丽娜鄂顺梅李有强李沫
- G6PD试剂盒在Roche modulor 010自动化分析仪上的应用及评价被引量：1
- 2008年
- 目的:评价G6PD试剂盒在Roche modulor 010自动化分析仪的应用情况。方法:通过重复测定检测系统的精密度,按EP6-A文件稀释并检测线性,同时检测质控物评价其稳定性。另外,检测疑似HbH病人的G6PD活性。结果:MHb-RT高值和低值标本批内、批间CV分别是4%、3%和2%、8%;G6PD/6PGD比值的决定系数R2分别为0.999;质控物CV值为2%。3例疑似HbH病人标本检测结果正常。结论:此试剂盒的精密度和线性较好,能够满足临床常规检验需要。
- 曾建明张烁陈茶张茂威庞鑫马骥王美兰庄俊华
- 关键词：G6PD精密度ROCHE
- 缩减Sysmex CA-1500全自动血凝仪D-II试剂用量可行性研究被引量：1
- 2011年
- 目的 通过评价缩减D-II试剂用量后Sysmex CA-1500全自动血凝仪的检测性能,探索加强科学管理建设节约型实验室的新方法.方法 按美国临床实验室标准化委员会（CLSI）相关文件的要求,以正常范围的病人血浆混合血浆批内精密度试验,以质控血浆进行日间精密度试验,以高低浓度的病人标本进行线性和携带污染率试验;把乳胶试剂（DD·PL·Re）吸样量从150 μl/测试调到130 μl/测试,分析试剂用量减少前后的相关性.结果 D-II测定的批内变异系数均小于2%,日间变异系数均小于8%,线性范围为76～1 843 μg/L;携带污染率为-0.26%;D-II试剂减量前后检测结果的相关系数r为 0.999 1.结论 在保证仪器检测质量的前提下,可以通过调整检测系统的检测参数,缩减试剂用量,实现降低实验室运营成本的目的.
- 曾建明钟永祥王丽娜陈中华肖倩李松龙一飞马骥陈茶
- 关键词：D-二聚体
- K562细胞分泌exosomes的观察及膜表面标志分子CD63的克隆
- 2013年
- 目的观察K562细胞分泌的外泌体exosomes。构建CD63与绿色荧光蛋白融合蛋白载体,并在K562细胞中表达。方法采用梯度离心的方法分离K562细胞培养上清中的exosomes,并用扫描电镜观察。构建pEGFP-N1-CD63重组质粒,以不同方式转染至K562细胞,观察表达效率的差异。结果质粒pEGFP-N1-CD63经测序鉴定,通过激光共聚焦显微镜观察,能够在K562细胞中表达。Amaxa核转染的效率高于脂质体转染的方式。结论成功构建pEGFP-N1-CD63质粒并在K562细胞中表达,可对exosomes进行示踪,为后续实验奠定基础。
- 王丽娜曾建明张妮陈树林王前郑磊司徒博陈茶
- 关键词：EXOSOMESCD63
- cDNA芯片检测STAT5诱骗核苷酸对K562细胞凋亡相关基因的影响被引量：1
- 2006年
- 目的：转录因子STAT5在慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)中组成性激活,并与CML细胞恶性表型密切相关,本研究用cDNA芯片检测方法探讨诱骗核苷酸(decoy ODNs)抑制STAT5对白血病K562细胞株凋亡相关基因的影响。方法：分别提取decoy ODNs处理前后的K562细胞总RNA,逆转录合成Cy3、Cy5标记的cDNA探针,与人14K基因表达谱cDNA芯片(V2.0)杂交,扫描获得数据后,用Genespring软件分析对照组和实验组的差异表达基因,半定量RT- PCR验证cDNA芯片结果。结果：2张cDNA芯片检测重复性良好(R=0.9799)。在13824个标记的基因中,检出413个上调基因,其中包括：TIAF1、GAB1、GYPA、DAPK3、TNFRSF1B、IRF1和PML等在内的18个凋亡相关基因；在检出的332个下调基因中,发现PIM1、CCND2、CCND1、MYC和BCL2L1等在内的11个凋亡相关基因；部分基因经半定量RT-PCR证实与cDNA芯片结果一致。结论：Decoy ODNs抑制STAT5信号通路后可引起K562细胞多种凋亡相关基因的变化,本实验为进一步研究STAT5信号通路所调控的凋亡相关基因提供了依据。
- 曾建明冯文莉王小中史梅涂植光黄宗干
- 关键词：白血病髓样信号转导和转录活化因子K562细胞
- HnRNP E2诱骗RNA对白血病K562细胞增殖的影响及其可能机制被引量：4
- 2006年
- 背景与目的:BCR/ABL诱导多聚胞嘧啶结合蛋白E2[poly(rC)-bindingproteinE2,hnRNPE2]的异常表达在慢性粒细胞白血病(chronicmyeloidleukemia,CML)急变中起着重要作用。本研究探讨hnRNPE2诱骗RNA(decoyRNA)对人白血病细胞K562增殖的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法:构建能转录出hnRNPE2诱骗RNA的质粒载体,将其经阳离子脂质体介导转染K562细胞,用G418筛选出稳定表达的细胞,台盼蓝法检测细胞的增殖能力,流式细胞仪分析细胞周期,并用RT-PCR和Westernblot方法检测下游CCAAT增强子结合蛋白!(CCAAT/enhancer-bindingprotein!,C/EBPα)和c-myc的表达。结果:稳定表达诱骗RNA的K562细胞增殖受抑,增殖抑制率为(62.73±12.92)%;细胞周期阻滞于S期[稳定表达诱骗RNA细胞组(55.59±4.67)%,对照组(44.70±4.21)%,P<0.05];C/EBPαmRNA无改变,但在蛋白水平42ku-C/EBPα表达升高了(49.72±5.58)%;c-mycmRNA下降了(58.27±7.23)%,蛋白水平降低了(57.26±6.52)%。结论:hnRNPE2诱骗RNA能抑制K562细胞的增殖,其机制可能与诱骗RNA阻断hnRNPE2和C/EBPαmRNA的结合后,引起42ku-C/EBPα表达升高有关。
- 陈新敏冯文莉赵世巧曾建明白卫君王小中黄宗干
- 关键词：白血病K562细胞
- CTP-OD-HA融合蛋白的制备及其对BCR-ABL阳性CML细胞增殖的作用
- ＜正＞目的:用分子生物学方法制备CTP-OD-HA融合蛋白,研究其在体外培养的CML细胞株中的抑增殖效应。方法:通过重组质粒pCTP-OD-HA的克隆、转化与鉴定,CTP-OD-HA融合蛋白的诱导表达及纯化,经Weste...
- 黄世峰刘钉宾曾建明罗红伟彭智王东黄宗干冯文莉
- 文献传递
- 群体感应系统受体SdiA与大肠埃希菌1型菌毛的相关性研究被引量：1
- 2022年
- 目的探讨群体感应系统受体SdiA与大肠埃希菌1型菌毛的相关性。方法在有或无群体感应系统信号分子处理下检测大肠埃希菌SM10λpir的野生株、sdiA敲除株和sdiA过表达回复株与酵母细胞的黏附能力,并用荧光定量PCR检测1型菌毛相关基因fimC、fimF的表达情况。转录组测序分析上述菌株1型菌毛相关基因的表达差异。结果群体感应系统信号分子处理组中野生株和sdiA敲除株出现肉眼可见的凝集,强度分别为+和++,而过表达回复株未出现凝集。加入甘露糖后野生株和sdiA敲除株的凝集强度减弱,强度均为±。对照组上述三株菌均未出现凝集。染色镜检发现,与野生株相比较,sdiA敲除株对酵母细胞黏附率较高(P<0.01),sdiA过表达回复株对酵母细胞黏附率较低(P<0.01)。在SdiA差异表达菌株间sdiA敲除株1型菌毛相关基因fimC、fimF表达增高(P<0.05),反之sdiA过表达回复株表达降低(P<0.05)。转录组测序中群体感应系统信号分子处理组菌毛相关基因fimA、fimB、fimC、fimD、fimE、fimF、fimG、fimH、fimI的表达均随着SdiA的表达量增高而降低,反之SdiA低表达,1型菌毛相关基因表达量增高,而在DMSO对照组中,上述基因与SdiA的表达量相关性不明显。结论大肠埃希菌中群体感应系统受体SdiA在信号分子的介导下可通过抑制1型菌毛相关基因的表达,降低细菌的黏附能力。
- 刘健平刘健平孟少伟肖倩陈茶孟少伟
- 关键词：大肠埃希菌群体感应系统1型菌毛
- STAT5诱骗寡核苷酸下调K562细胞周期相关基因的研究
- 2007年
- 目的采用基因芯片技术筛选信号转导和转录活化因子5（STAT5）诱骗寡核苷酸作用下K562细胞差异表达的周期相关分子，探讨其对K562细胞周期的影响。方法合成STAT5诱骗寡核苷酸，在脂质体介导下转染K562细胞，采用人14K基因表达谱cDNA芯片检测差异表达基因，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）验证芯片筛选到的部分基因的表达情况。结果两张cDNA芯片检测重复性良好（r-0．9799）。在13824个标记的基因中检出多个下调基因，其中包括cyclin D1、cyc-linD2、S100钙结合蛋白P和E2F-5等在内的周期相关基因；RT-PCR实验证实STAT5诱骗寡核苷酸引起cyclinD2和E2F-5mRNA表达下调。进一步分析发现，这些基因的启动子区域均含有STAT5结合的一致性序列。结论STAT5诱骗寡核苷酸抑制K562细胞G-／s转换而影响细胞周期进程的作用机制，可能与cyclin D2和E2F-5等基因的表达下调相关。
- 曾建明陈茶张秀明彭智马季
- 关键词：K562细胞寡核苷酸类细胞周期基因
- PTD-OD-HA融合蛋白对bcr/abl阳性细胞凋亡的影响被引量：4
- 2010年
- 目的:研究含有蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)、寡聚化结构域(oligomerization domain,OD)和HA标签的PTD-OD-HA融合蛋白对几种bcr/abl阳性细胞株细胞凋亡的影响。方法:将前期制备的PTD-OD-HA蛋白作用于几种bcr/abl阳性细胞后,应用FCM法、DNA梯度电泳(DNAladder)和透射电子显微镜检测细胞凋亡,RT-PCR和Western印迹法检测凋亡相关基因bax、bcl-2的mRNA和蛋白水平变化。结果:FCM法检测发现,PTD-OD-HA能促进bcr/abl阳性细胞发生凋亡;DNA ladder实验检测发现,PTD-OD-HA作用后BaF3-P210和K562细胞DNA电泳有梯状条带;透射电子显微镜观察发现,PTD-OD-HA作用后BaF3-P210细胞发生了凋亡;RT-PCR及Western印迹法检测显示,促凋亡基因bax的mRNA及蛋白水平增高,抗凋亡基因bcl-2的mRNA及蛋白水平降低。结论:PTD-OD-HA蛋白可以特异性诱发bcr/abl阳性细胞的凋亡。
- 黄峥兰季茂胜袁颖黄世峰刘钉宾曾建明温健萍冯文莉
- 关键词：重组融合蛋白质类细胞凋亡
