朱立平
- 作品数：9 被引量：18H指数：3
- 供职机构：滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：山东省科技发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病中的表达及其临床意义被引量：2
- 2013年
- 目的研究同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病(AL)患儿骨髓单个核细胞中的表达,并探讨其临床意义。方法采用RT-PCR方法检测46例不同时期AL患儿HOXA9 mRNA的表达水平,以15例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿作为对照。结果 46例AL患儿(52份骨髓标本)HOXA9基因阳性表达率为63%,其中急性髓细胞白血病(AML)组阳性表达率(86%)明显高于急性淋巴细胞白血病(ALL)组(35%)及对照组(13%)(P<0.05);AML组HOXA9 mRNA表达水平明显高于ALL组及对照组(P<0.05)。HOXA9在各型儿童AML中表达不同,mRNA相对表达水平依次为:M5型>M4型>M1和(或)M2型,而在M3型中未检测到表达。HOXA9在AML患儿高危组中的阳性表达水平较高。AML患儿初治组HOXA9基因阳性表达率及mRNA水平明显高于缓解组和对照组(P<0.05),而缓解组与对照组比较差异无统计学意义;未缓解组HOXA9基因表达显著高于缓解组和对照组(P<0.05)。结论 HOXA9基因高表达与AL的发生相关;AML患儿HOXA9基因表达水平明显高于ALL患儿。HOXA9基因高表达者与白血病危险程度有关,且提示预后不良。因此,HOXA9基因有望成为儿童AL诊断、治疗及判断预后的一个靶点。
- 贾秀红朱立平李建厂王翠翠
- 关键词：急性白血病儿童
- 同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病中的表达及其临床意义
- 目的：研究同源盒基因HOXA9在儿童急性白血病(AL)患儿骨髓单个核细胞中的表达,并探讨其临床意义.方法：采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测52例不同时期AL患儿HOXA9 mRNA的表达水平,以15例特...
- 贾秀红朱立平李建厂王翠翠
- 关键词：急性白血病儿童患者骨髓单个核细胞
- RNA干扰沉默HOXA9基因逆转U937细胞多药耐药被引量：4
- 2012年
- 目的采用小干扰RNA(siRNA)沉默HOXA9基因,探讨siRNA转染后人白血病细胞株U937能否逆转化疗药物的耐药性。方法设计合成针对HOXA9的特异性siRNA寡核苷酸链,应用阳离子脂质体介导瞬时转染U937细胞。实验分为3组:实验组(脂质体转染靶向HOXA9的siRNA)、细胞对照组(仅加等量细胞及培养基)和阴性对照组(脂质体转染阴性对照siRNA)。利用反转录(RT)-PCR法、蛋白免疫印迹法分别检测各组细胞HOXA9 mRNA、蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)、流式细胞术检测U937细胞转染前后对长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP-16)的敏感性及凋亡率变化。结果靶向HOXA9的siRNA可有效沉默HOXA9的表达,HOXA9 mRNA及蛋白相对水平明显下降。siRNA转染后实验组U937细胞可明显增加对VCR、VP-16的敏感性,实验组细胞的半数抑制浓度值显著低于细胞对照组及阴性对照组(Pa<0.05)。流式细胞术检测结果表明,siRNA干扰后实验组细胞联合化疗药物较细胞对照组及阴性对照组细胞凋亡率显著增高(Pa<0.05)。而阴性对照组与细胞对照组之间差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论靶向HOXA9的siRNA可有效沉默HOXA9基因表达,增加其对VCR、VP-16的敏感性,能逆转白血病细胞对化疗药物的耐药性。
- 朱立平贾秀红李建厂韩兆东
- 关键词：HOXA9RNA干扰U937细胞耐药
- 靶向HOXA9基因RNAi慢病毒载体增加人急性单核细胞白血病U937细胞的药物敏感性
- ：探讨慢病毒载体介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默同源盒A9(homeobox A9,HOXA9)基因对人急性单核细胞白血病U937细胞药物敏感性的影响.方法：应用蛋白质印迹法从4条...
- 朱立平贾秀红李建厂
- 关键词：急性单核细胞白血病慢病毒载体介导U937细胞药物敏感性
- 靶向HOXA9基因RNAi慢病毒载体增加人急性单核细胞白血病U937细胞的药物敏感性被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨慢病毒载体介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默同源盒A9(homeobox A9,HOXA9)基因对人急性单核细胞白血病U937细胞药物敏感性的影响。方法:应用蛋白质印迹法从4条针对HOXA9基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体中筛选出1条敲减效率最高的包装成慢病毒HOXA9/GV118RNAi-LV#2。实验分成未感染对照组(control,CON)、阴性对照组(negative control,NC)及敲减组(knock down,KD)。HOXA9/GV118RNAi-LV#2感染U937细胞后,应用实时荧光定量PCR法检测HOXA9 mRNA的沉默效率,蛋白质印迹法检测HOXA9蛋白的表达,MTT法和FCM检测病毒感染前后U937细胞对长春新碱(vincristine,VCR)和柔红霉素(daunorubicin,DNR)的敏感性及细胞凋亡率变化,RT-PCR法检测DNR作用后各组细胞中MDR-1mRNA的表达。结果:KD组细胞中HOXA9mRNA的沉默效率在55%以上,HOXA9蛋白的表达量明显减少。VCR及DNR作用KD组细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)值明显降低(P<0.01),药物敏感性明显增强;VCR和DNR作用后,KD组细胞的凋亡率明显增加(P<0.01);DNR作用后,KD组U937细胞中MDR-1mRNA的表达水平明显下调(P<0.01)。结论:靶向HOXA9基因的RNAi慢病毒可稳定沉默HOXA9基因的表达,在一定程度上提高U937细胞对化疗药物的敏感性。
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- 关键词：慢病毒HOXA9细胞U937
- 靶向HOXA9基因shRNA慢病毒载体对U937细胞增殖与凋亡影响观察被引量：4
- 2014年
- 目的:观察慢病毒介导的短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)沉默同源盒A9(homeobox A9,HOXA9)基因对U937细胞增殖和凋亡的影响。方法:前期从4条针对HOXA9基因的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体中筛选出了1条敲减效率最高的包装成慢病毒HOXA9/GV118RNAi-LV#2。实验分为对照组(control,CON)、阴性对照组(negative control,NC)及敲减组(knock down,KD)。HOXA9/GV118RNAi-LV#2感染U937细胞5d后,FCM检测U937细胞感染效率,应用实时荧光定量PCR法检测HOXA9 mRNA的沉默效率,蛋白质印迹法检测HOXA9蛋白的表达;MTT法和绘制细胞生长曲线检测细胞增殖抑制情况;FCM检测细胞凋亡及细胞周期;RT-PCR法检测细胞c-myc mRNA及p27mRNA表达情况。结果:慢病毒感染效率>90%,KD组细胞中HOXA9mRNA的沉默效率>55%,HOXA9蛋白的表达量明显减少,其中KD组相对表达水平达(0.223±0.024),显著低于NC组(0.884±0.009)及CON组(0.891±0.013),差异有统计学意义,F=1 566.202,P<0.001。MTT结果显示,KD组细胞的IR值为(40.469±1.756)%,明显高于NC组及CON组(F=1 311.928,P<0.001),细胞生长曲线表明该组细胞生长速度减慢;FCM结果显示,KD组、NC组及CON组凋亡率分别为(26.762±2.245)%、(6.819±0.547)%和(6.113±0.349)%,KD组与NC组(q=25.501,P<0.001)及CON组(q=26.418,P<0.001)比较差异均有统计学意义,提示该载体显著增加细胞凋亡率;其细胞周期G0/G1期细胞比例较CON组及NC组明显增加,提示该载体使细胞周期阻滞于G0/G1期,F=27.769,P=0.001;RT-PCR结果表明,U937细胞KD组较CON组及NC组c-myc mRNA表达水平下降,p27mRNA表达水平上升。结论:靶向HOXA9基因shRNA慢病毒载体能稳定沉默HOXA9表达,可显著抑制U937细胞增殖并促进其凋亡,同时可下调c-myc表达,上调p27表达,使细胞周期阻滞于G0/G1期。
- 贾秀红朱立平李建厂
- 关键词：HOXA9白血病慢病毒RNA干扰U937
- RNA干扰HOXA9基因对人类急性单核细胞白血病U937细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨小干扰RNA（siRNA）沉默HOXA9基因对人类急性单核细胞白血病U937细胞株增殖、凋亡的影响。方法设计合成针对HOXA9的特异性siRNA寡核苷酸链，应用阳离子脂质体介导瞬时转染U937细胞。实验分为3组：实验组（脂质体转染靶向HOXA9的siRNA）、阴性对照组（脂质体转染阴性对照siRNA）和细胞对照组（仅加等量细胞及培养液）。利用反转录．聚合酶链反应法、Western blot法分别检测各组细胞HOXA9 mRNA、蛋白的表达；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡。结果转染靶向HOXA9的siRNA后，实验组、阴性对照组、细胞对照组mRNA相对表达水平分别为、（22.980±0．548）％、（82．371±1．517）％、（8d．637±2．252）％（P〈0．05），蛋白相对表达水平分别为（50．377±2．773）％、（102．275±3．898）％、（107．510±3．905）％（P〈0．05）；siRNA转染后实验组U937细胞增殖明显受抑制且细胞凋亡率显著增高，24、48、72h增殖抑制率分别为（41．909±4．333）％、（54．470±3．756）％、（65．835±1．024）％，凋亡率为（26．800±2．081）％，与细胞对照组、阴性对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论靶向HOXA9的siRNA可有效沉默U937细胞HOXA9基因表达，明显抑制细胞的增殖并促进细胞凋亡，为临床白血病HOXA9基因靶向治疗提供了实验依据。
- 朱立平贾秀红李建厂韩兆东
- 关键词：白血病RNA干扰U937细胞
- 靶向hoxa9 siRNA联合小剂量阿糖胞苷对U937细胞增殖、凋亡的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨利用小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默hoxa9基因联合小剂量阿糖胞苷(Ara-C)对U937细胞增殖、凋亡的影响。方法设计合成针对hoxa9的特异性siRNA,应用脂质体介导转染U937细胞。利用RT-PCR法、Western blot法分别检测各组细胞hoxa9 mRNA、蛋白的表达;siRNA和(或)小剂量Ara-C分别作用U937细胞后,应用MTT法检测细胞增殖抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果靶向hoxa9的siRNA可有效沉默hoxa9的表达,hoxa9 mRNA及蛋白相对水平明显下降。RNAi联合小剂量Ara-C作用于U937细胞后对细胞增殖抑制作用最强,48 h细胞凋亡率显著升高,与其余组比较均有统计学差异(P<0.05)。结论靶向hoxa9的siRNA联合小剂量Ara-C能显著抑制U937细胞增殖并促进其凋亡,为研究hoxa9联合化疗治疗白血病的作用机制及应用于临床提供实验依据。
- 贾秀红朱立平李建厂范文文
- 关键词：HOXA9阿糖胞苷U937细胞
- Evans综合征治疗的研究进展被引量：2
- 2012年
- Evans综合征是一种少见的自身免疫性疾病，其临床表现主要为不同程度的出血、溶血。治疗分为一线、二线和三线治疗，即糖皮质激素、免疫球蛋白；免疫抑制剂、脾切除术；干细胞移植、罗米司亭等。难治性Evans综合征是治疗难点，研究发现联合应用免疫抑制剂和干细胞移植对其治疗有效。该文就Evans综合征治疗研究进展作一综述。
- 朱立平贾秀红
- 关键词：EVANS综合征
