朱良全
- 作品数:148 被引量:267H指数:11
- 供职机构:中国兽医药品监察所更多>>
- 发文基金:北京市科技新星计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生化学工程生物学更多>>
- 牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒
- 本发明涉及牛布鲁氏菌间接ELISA抗体检测试剂盒。本试剂盒使用了申请单位上世纪60年代诱导驯化的猪种布鲁氏菌S2株脂多糖(LPS)作为包被抗原,提高了检测的敏感性;本研究改进了LPS纯化和纯度测定的方法,使开发的试剂盒具...
- 丁家波王芳冯宇朱良全王楠毛开荣
- 文献传递
- 一种区分牛布鲁氏菌疫苗免疫与自然感染状态的方法
- 本发明涉及一种区分牛布鲁氏菌疫苗免疫与自然感染状态的方法。本方法建立在对布鲁氏菌IgG和IgM抗体亚型检测方法的基础上,构建易感动物模型,获得我国常用布鲁氏菌弱毒疫苗(猪种S2株和牛种A19株)疫苗免疫及标准强毒株(牛种...
- 丁家波冯宇蒋卉朱良全彭小薇许冠龙王芳范学政秦玉明王楠毛开荣徐磊
- 文献传递
- 基于双重LAMP-LFD检测猪链球菌和副猪格拉瑟菌的方法
- 本发明公开了一种基于双重LAMP‑LFD检测猪链球菌和副猪格拉瑟菌的方法,属于分子生物检测领域,试剂盒至少包括双重LAMP引物组合(SEQ ID No.1~SEQ ID No.8);可根据需要添加LAMP反应预混液、Bs...
- 朱良全王豪杰辛凌翔刘燕胡云皓张存帅李建姚文生刘元杰马欣赵浩然王雅茜
- 胸膜肺炎放线杆菌血清学分型多重PCR方法的建立被引量:2
- 2006年
- 10株胸膜肺炎放线杆菌参考菌株,经过纯化、扩增、提取基因组DNA,设计一套特异性引物,运用多重PCR技术,对外毒素基因apxⅠ、apxⅡ和apxⅢ进行扩增,产物经1.6%琼脂糖凝胶电泳,可将10株参考菌株分为5个血清群。血清Ⅰ群由259(血清1型)、263(血清5型)、267(血清9型)组成。血清Ⅱ群由260(血清2型)、262(血清4型)、264(血清6型)、266(血清8型)组成。血清Ⅲ群、血清Ⅳ群和血清Ⅴ群分别由261(血清3型)、265(血清7型)和268(血清10型)单独组成。对于血清Ⅰ群和血清Ⅱ群,通过apxⅣ进行扩增,结果259(血清1型)、263(血清5型)和267(血清9型)分别扩出2.4kb、2.8kb和1.6kb片段;262(血清4型)、264(血清6型)、260(血清2型)或266(血清8型)分别扩出1.6kb、2.0kb、2.8kb片段。
- 朱良全薛青红蒋玉文陈敏康孟佼
- 关键词:胸膜肺炎放线杆菌多重PCR血清型
- 一株鹿源牛种布鲁菌的鉴定及全基因组分析被引量:1
- 2019年
- 本研究旨在对一株鹿源牛种布鲁菌(Brucella abortus)BJ1进行全面鉴定,为研究鹿的布鲁菌病提供参考。将B.abortus BJ1培养后,挑取单菌落分别接种到含硫堇或碱性品红的TSA培养基,观察其生长状态;将接种有B.abortus BJ1的TSA平板分别置于普通生化培养箱和CO2培养箱37℃培养72 h,观察其对CO2的依赖性;通过醋酸铅培养基测定B.abortus BJ1生长过程中是否产生H2S;通过结晶紫染色和热凝集试验测定B.abortus BJ1的表型;通过平板凝集试验测定B.abortus BJ1单因子血清反应性;采用AMOS-PCR鉴定细菌种属;为测定其毒力,以1×109CFU感染豚鼠,14 d后测定豚鼠每克脾组织的含菌量。使用二代测序方法测其全基因组序列并对其进行分析和注释,将结果与B.abortus 2308比对,并通过Mauve软件进行系统进化分析。结果显示:B.abortus BJ1不依赖CO2,产H2S,可以在含硫堇和碱性品红的培养基上生长;表型为光滑型,与M因子血清发生凝集;豚鼠脾含菌量为1.17×10^6~2.05×10^6CFU·g^-1;基因组大小为3 270 584 bp,在基因编码区内与B.abortus 2308株相比有46处Indel差异,进化树分析显示与B.abortus 8416有较高的同源性。通过全面鉴定,确定B.abortus BJ1为牛种9型,为更深入地了解我国布病发生情况和鹿的布病防控提供参考。
- 牛凯程汝佳许冠龙冯宇冯宇范学政范学政彭小薇朱良全秦玉明丁家波常维山
- 关键词:布鲁菌生化鉴定全基因组测序
- 大肠杆菌K_(88)纤毛抗原的提纯和抗血清的制备被引量:6
- 2006年
- 以5%绵羊血改良M inca琼脂筛选和克隆表达良好的K88+菌株,改良M inca琼脂培养获得K88菌液。用加热法及高速匀浆法使K88纤毛从菌体上脱下。饱和硫酸铵沉淀粗提,用Sepha-rose CL-4B凝胶过滤纯化K88抗原。提纯的抗原经SDS-PAGE电泳测定其分子量约为25 000,且仅此一条蛋白带;与K88抗血清进行琼脂扩散试验只出现一条沉淀线。用提纯的抗原经多次免疫家兔制备了K88抗血清。抗血清在玻板凝集试验中只凝集K88菌株,不凝集K99,987P或F41菌株;在琼扩试验中,只与K88粗提抗原出现一条沉淀线,且效价为1∶64,而不与K99,987P抗原出现沉淀线;在免疫电泳试验中,与无细胞K88纤毛液只出现一条沉淀线。鉴定结果表明,所制备的K88血清特异性强、效价高,可作为单因子血清用于凝集试验、琼扩试验等血清学试验,对K88菌株进行鉴定,对K88纤毛抗原进行定性和定量检测。
- 李虹朱良全刘亚华范书才
- 关键词:大肠杆菌
- 猪瘟兔化弱毒(C株)和鸡马立克火鸡疱疹病毒(HVT)病毒保护剂的研究
- 本试验将6种病毒保护剂基质运用于PKl5细胞,鸡胚成纤维细胞,带毒牛睾丸细胞,通过细胞形态学实时观察法筛选出一种病毒保护剂Ⅰ,并确定其工作浓度为10/%。
通过建立PK15细胞、猪瘟Thiv...
- 朱良全
- 关键词:猪瘟兔化弱毒
- 文献传递
- 一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ-3及其制备方法
- 本发明涉及一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ‑3及其制备方法。该产物是由布鲁氏菌S2株基因编号(GI)为490819668的基因原核表达,并经谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化获得。...
- 朱良全丁家波张磊蒋卉彭小薇冯宇范学政
- 文献传递
- 一株粗糙型牛种布鲁氏菌诱导株的构建及鉴定被引量:2
- 2020年
- 本试验旨在研究布鲁氏菌病疫苗的新型研制方法,并通过op诱导剂成功诱导出一株粗糙型牛种布鲁氏菌弱毒株,命名为RB71。试验检测了RB71相关基因的缺失情况,并对其脂多糖完整性、生长特性、遗传稳定性以及在小鼠巨噬细胞(RAW264.7)中生存能力等与光滑型菌株进行了比较研究。结果显示,试验成功获得了诱导突变株,其缺失片段大小为15070 bp;热凝集试验阳性,能被结晶紫染色,吖啶黄凝集试验阳性;对提取脂多糖进行银染,结果显示O链缺失,诱导株RB71脂多糖不完整;连续传代30次,PCR检测未发现基因回复突变;在体外相同培养条件下,诱导株RB71生长速度显著低于亲本株A19;入侵RAW264.7细胞72 h时,其胞内存活率与亲本株相比极显著下降(P<0.01)。综上所述,本试验开发出一种能高效诱导光滑型布鲁氏菌变异为粗糙型布鲁氏菌的试剂及诱导方法,成功获得一株具有良好遗传稳定性的粗糙型减毒布鲁氏菌RB71诱导株,该诱导株在RAW264.7细胞内的存活能力显著变弱,这为新型弱毒布鲁氏菌粗糙型疫苗的研制奠定技术基础。
- 孙浩杰任小侠秦玉明朱良全蒋卉孙石静丁家波辛凌翔王楠李晓宁李巧玲毛开荣蔡亚南徐磊
- 关键词:粗糙型布鲁氏菌疫苗
- 猪瘟疫苗研究进展及我国传统疫苗的研究现状被引量:17
- 2005年
- 简要介绍了国内外传统猪瘟疫苗和新型猪瘟疫苗的研究进展,着重对我国猪瘟传统疫苗的特点、生产工艺、生产和应用中的问题进行了概述,并对猪瘟疫苗研究做了展望。
- 朱良全彭隽王栋
- 关键词:猪瘟疫苗