朴仲贤
- 作品数：30 被引量：63H指数：4
- 供职机构：汕头大学医学院中心实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 坐骨神经再生过程中施万细胞自噬的形态学观察被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨大鼠坐骨神经再生过程中的细胞自噬作用。方法:横切大鼠坐骨神经制作神经损伤再生模型,分别于造模后0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4、5、7、10、15d取近断端组织行电镜结构观察。结果:轴突在第1天时从髓鞘脱离,溃变呈空泡状。第2天开始髓鞘皱褶、绞窄并脱落形成碎片,施万细胞内可见大小形状各异的髓鞘碎片,并与大量溶酶体融合形成自噬泡,呈酸性磷酸酶(AcPase)阳性。第7d时幼稚细胞出现于新生毛细血管周围,大量幼稚细胞随后出现。结论:施万细胞自噬对坐骨神经再生时溃变髓鞘的清除起主要作用,溶酶体显著地参与了该过程,施万细胞脱分化为幼稚的祖细胞后大量增殖分化参与神经再生过程。
- 王启伟迟德彪路艳蒙朴仲贤王万山顾为望朴英杰
- 关键词：施万细胞自噬神经再生
- 生物可吸收高强度左旋聚丙交酯材料在体内的力学特征被引量：11
- 2001年
- 目的：观察生物可吸收固态压缩法增强的、高强度左旋聚丙交酯(ｐｏｌｙ－Ｌ－ｌａｃｔｉｄｅ，ＰＬＬＡ)材料在体内的力学变化特征，评价其作为骨固定装置材料的价值。 方法：用特殊的加热压缩方法－固态压缩法（ｓｏｌｉｄ－ｓｔａｔｅ ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ＳＣ）加工左旋聚丙交酯，得ＳＣ－ＰＬＬＡ试棒（３．２ｍｍ×３０ｍｍ），植入兔的皮下和股骨内，在长达４８周的降解时间里，观察材料的力学性能（弯曲强度和剪切强度）和扫描电镜（ＳＥＭ）下的微观形态。 结果：植入２４周后，各组ＳＣ－ＰＬＬＡ在体内的力学强度均可维持在弯曲强度１８０Ｍｐａ以上，剪切强度７５Ｍｐａ以上，它们都大于皮质骨强度。剪切强度的下降比弯曲强度快。ＳＥＭ见ＳＣ－ＰＬＬＡ降解前内部有大量排列整齐的纵向纤维，并随降解而破坏并出现孔隙。 结论：固态压缩法可获得高初始强度和维持强度的ＰＬＬＡ，满足一般的骨内固定要求。ＳＣ－ＰＬＬＡ是一种有前途的生物可吸收接骨材料。
- 王立金大地朴仲贤
- 关键词：生物可吸收材料内固定
- 大鼠坐骨神经再生过程中的施万细胞自噬作用被引量：8
- 2004年
- 目的探讨大鼠坐骨神经再生过程中的细胞自噬作用。方法横切大鼠坐骨神经制作wallerian变性模型,分别于造模后0、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、4、5、7、10、15 d取远断端组织行电镜结构观察。结果轴突在第0.5天时从髓鞘脱离,溃变呈空泡状。第2天开始髓鞘皱褶、断裂形成碎片,神经膜细胞(Schwann cell, 施万细胞)内见大的膜结合髓鞘碎片和许多散在小碎片,并与溶酶体融合形成自噬泡,呈酸性磷酸酶(AcPase)阳性。第4天时内膜区偶见幼稚细胞,1周后见大量幼稚细胞。第7天后施万细胞内自噬泡数量开始减少。实验全程偶见巨噬细胞,内有吞噬泡。结论大鼠坐骨神经再生过程中溃变髓鞘主要经施万细胞自噬清除,施万细胞脱分化为施万细胞祖细胞后大量增殖分化参与神经再生过程。
- 王万山朴仲贤韩明虎王启伟朴英杰
- 关键词：坐骨神经再生施万细胞细胞自噬
- 流式细胞仪分析癌细胞对肥大细胞募集的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:研究食管癌细胞迁移到小鼠腹腔时肿瘤细胞周边微环境的变化。方法:将食管癌细胞株EC109和/或诱导试剂植入小鼠腹腔,利用组织化学的方法、荧光标记的肥大细胞蛋白酶和流式细胞术,我们在小鼠模型观察肠组织的形态和腹腔的MC亚型的变化。结果:胰酶导致小鼠肠道平滑肌层和黏膜下层的组织增厚,细胞间隙的增加可能有益于MC在组织移动或迁移进入腹腔;它引起小鼠腹腔液的总MC增加,MCC亚型的相对比例增加,MCT亚型减少。EC109细胞不能明显地改变小鼠肠道组织的形态,但它显著地引起腹腔MCT亚型的相对比例增加。结论:根据肥大细胞内颗粒的类胰蛋白酶和类糜蛋白酶的差异表达,可证实小鼠的MC亚型;并且不同的诱导物可能影响腹部微环境的变化。目前的研究表明,食道癌细胞可以诱导MCT(含有类胰蛋白酶)亚型迁移到小鼠腹腔,造成肿瘤细胞周围的内部环境的变化。
- 林珏龙刘柳沈志忠陈春桂金玲爽吴淑献朴仲贤方泽曼
- 关键词：流式细胞仪食管癌细胞微环境
- 抑癌基因PTEN在鼻咽癌细胞株中表达的研究被引量：1
- 2004年
- 目的:检测人鼻咽癌细胞株中PTEN表达情况,探讨鼻咽癌细胞中PTEN表达与细胞分化程度的关系。方法:进行细胞株的培养,采用流式细胞仪和共聚焦显微镜检测方法对细胞中PTEN的表达进行定位定量检测。结果:两种细胞株均有PTEN的表达,表达强度和分布与分化程度有关,分化越好,表达越高,流式细胞仪检测PTEN在细胞株中表达强弱顺序为CNE1>CNE2,阳性表达细胞数CNE1>CNE2差异有统计学意义(P<0.01);激光共聚焦扫描显微镜检测PTEN主要表达在细胞核和细胞浆,分布与分化程度有关,细胞核表达强度CNE1
- 杨海伟霍霞朴仲贤徐锡金林珏龙
- 关键词：抑癌基因PTEN流式细胞仪激光共聚焦扫描显微镜
- 人生长分化因子-5完整成熟肽基因的克隆
- 2004年
- 目的 :克隆人生长分化因子 5 (hGDF 5 )完整成熟肽基因。方法 :根据Genbank中hGDF 5的序列化学合成两条引物 ,从人胎儿软骨组织提取总RNA ,通过反转录聚合酶链式反应 (RT PCR )得到hGDF 5完整成熟肽基因。将所得基因片段插入克隆载体 pMD18 T并转化大肠杆菌DH5α ,提取重组质粒 ,酶切鉴定并测序。结果 :DNA琼脂糖凝胶电泳显示 :PCR产物为一长约 3 80bp的带 ,阳性克隆质粒经双酶切可切出约 3 80bp的片段。全自动DNA测序表明与Genbank中的序列完全相符。 结论 :通过反转录聚合酶链式反应从人胎儿软骨组织中成功克隆出人GDF 5完整成熟肽基因 ,基因序列完全正确。
- 王万山王启伟朴仲贤朴英杰
- 关键词：生长分化因子-5克隆
- 用免疫荧光标记对人组织中肥大细胞亚型的分选与形态观察被引量：3
- 2008年
- 方法:利用中性蛋白酶成分、特征性酶抗体的免疫荧光染色和流式细胞仪确定分选肥大细胞亚型,以激光扫描共聚焦显微镜显示肥大细胞内分泌颗粒。结果:三种免疫表型被确定:肥大细胞的类胰蛋白酶阳性(MCT)、类糜蛋白酶阴性;类糜蛋白酶阳性(MCC)、类胰蛋白酶阴性和类胰蛋白酶阳性、类糜蛋白酶阳性(MCTC)。肥大细胞内分泌颗粒分散或聚集存在,分泌颗粒突起分泌或以分散的方式释放。分泌颗粒大范围释放后,肥大细胞的形态结构发生了改变。结论:利用肥大细胞的特征性酶抗体、免疫荧光标记和流式细胞仪可将人组织中的肥大细胞分选纯化为三种亚型;以共聚焦显微镜显示肥大细胞含有丰富的分泌颗粒,它说明肥大细胞具备了为人体I型变态反应提供快速反应的物质基础。
- 林珏龙沈志忠方泽曼朴仲贤李欣欣何韶衡
- 关键词：激光扫描共聚焦显微镜肥大细胞免疫荧光流式细胞仪
- BLU基因慢病毒表达载体的构建被引量：1
- 2008年
- 目的:构建BLU基因慢病毒表达载体。方法:采用PCR技术从人脐带来源的间充质干细胞中扩增出BLU基因,将其接入慢病毒载体(pSL6-IRES-EGFP)中,经菌落PCR、酶切和测序鉴定,然后转染293T细胞观察表达情况。结果:PCR、酶切和测序鉴定克隆了重组子(pSL6-BLU-IRES-EGFP),并在293T细胞中成功表达BLU基因。结论:成功地克隆了含有BLU基因的慢病毒表达载体。
- 陈刚建张宝李燕朴仲贤陈松建刘俊晓黄晋荣郑桂娜郭勇勇霍霞
- 关键词：慢病毒载体
- 感染冠状病毒的大鼠胸腺组织超微结构观察被引量：2
- 2003年
- 目的通过对感染大鼠冠状病毒(rat coronavirus,RCV)的大鼠胸腺组织进行超微结构的研究,阐明RCV在细胞内形成的形态学机制.方法用在进行自噬性形态学研究中的Wistar大鼠做模型,常规电镜取材、固定、包埋、切片和观察.结果胸腺上皮细胞的胞质内出现大小不等的内质网池,并相互融合形成巨大的内质网湖,湖内充满RCV颗粒,称为病毒包涵体.病毒在内质网囊壁上通过出芽方式进入内质网湖基质,发育为成熟的RCV,最终排出于细胞外.病毒颗粒呈圆形,直径约100～130 nm.病毒胞浆成均质状,病毒的膜蛋白有二层,外层为包膜,内层为核衣壳.包膜与核衣壳之间为低电子密度的中间层,其内有时可见1～2层较薄的膜样结构.钉突成放射状贯穿包膜,其内侧端连于核衣壳,外侧端膨大,由一层絮状的糖蛋白包绕,形成日冕状.病毒颗粒分布在胸腺上皮细胞的内质网湖、胞浆、内吞体/溶酶体以及胸腺上皮细胞间,溶酶体内的病毒无包膜和核衣壳.结论内质网湖参与RCV包膜的形成,从细胞外侵入的RCV均在内吞体/溶酶体内脱去包膜和核衣壳,脱下的包膜和核衣壳被其降解,而RCV在胸腺上皮细胞基质中进行复制.在胸腺细胞内未见有RCV.
- 朴英杰徐锡金朴仲贤
- 关键词：重症急性呼吸综合征胸腺冠状病毒溶酶体
- 生物可吸收高强度固态压缩聚丙交酯的降解特征和强度维持被引量：11
- 2003年
- 用特殊的加热压缩方法固态压缩法 (solid statecompression ,SC)加工左旋聚丙交酯 (poly L lac tide ,PLLA) ,获得高强度SC PLLA(弯曲强度 2 5 0Mpa,剪切强度 190Mpa)。将SC PLLA棒 (3.2mm× 30mm) ,置于PBS液或植入兔的皮下和股骨内 ,定期观察粘均分子量、结晶度、扫描电镜 (SEM )形态和机械性能 (弯曲强度和剪切强度 ) ,研究该材料的降解特征和强度特性 ,以评价其作为矫形外科骨固定装置材料的价值。结果表明 ,各组分子量在前 12周下降迅速 ,其后缓慢下降 ,至 72周时 ,各组分子量降解 98%以上 ;结晶度则与此相反 ,12周内上升迅速 ,36周达最大。SEM见SC PLLA降解前内部有大量排列整齐的纵向纤维 ,并随降解而破坏并出现孔隙。SC PLLA降解 2 4周后 ,各组的弯曲强度仍维持在 180MPa以上 ,剪切强度在 75MPa以上 ,都大于皮质骨强度 ,提示材料的强度维持时间满足一般的骨内固定要求。因此SC
- 王立金大地朴仲贤
- 关键词：生物可吸收内固定骨折
