李少华
- 作品数：74 被引量：100H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- SELEX技术及Aptamer研究的新进展被引量：26
- 2006年
- 综述了近几年指数富集的配体系统进化(SELEX)技术的改良与寡核苷酸配基(aptamer)研究应用方面的新进展.Aptamer是指利用SELEX(systematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment)技术,从随机寡核苷酸文库中筛选获得的能够与靶分子特异结合的短单链寡核苷酸配基,通常具有纳摩尔到皮摩尔的亲和力.高通量筛选的技术特点与aptamer精确识别、易体外合成与修饰等特性,使得aptamer在分析化学与生物医药研究方面具有广阔的应用前景.
- 邵宁生李少华黄燕苹
- 关键词：高通量筛选
- 一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因鉴定方法和应用
- 本发明属于生物技术领域，涉及一种基于mRNA质核比变化的miRNA靶基因快速、准确鉴定方法；涉及该方法在生物医学领域中的应用。本发明通过以下技术方案实现：首先通过现有的miRNA靶标预测生物信息学软件，如Targetsc...
- 邵宁生李洁黄宝春夏伟陈留存李少华苏雪婷王芳丁红梅
- 文献传递
- 一种特异识别Vasorin(VASN)蛋白的寡核苷酸配基V4-2的序列和应用
- 本发明公开了属于分子生物医学技术领域的一种特异识别Vasorin(VASN)蛋白的寡核苷酸配基V4-2的序列和应用。本发明设计V4-2特异性的序列，采用5’端或3’端修饰、标记(如FITC、生物素或者地高辛)的方法检测V...
- 邵宁生李少华李慧王玮丁红梅李洁黄皑雪赵强
- 人vasorin蛋白的基因克隆、表达及纯化被引量：3
- 2014年
- 目的:克隆、表达人vasorin(VASN)蛋白。方法:利用PCR方法从HepG2细胞的cDNA中扩增获得目的基因,并插入带有6×His标签的原核高效可溶性表达载体pET28a中,构建重组表达质粒pET28a-VASN,将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后目的基因获得表达,对融合目的蛋白进行Ni2+金属螯合柱纯化。结果:内切酶鉴定及基因序列测定证实重组表达质粒构建成功;对目的蛋白进行了原核表达,SDS-PAGE显示相对分子质量为61×103的特异表达条带;Western印迹证实目的蛋白为VASN,且主要以包涵体形式存在;对经尿素变性的表达产物进行了亲和层析纯化,有利于以后的变性、复性过程。结论:获得了人VASN融合蛋白,为其进一步的生物学功能研究奠定了基础。
- 丁红梅赵强王玮李慧刘农乐李洁苏雪婷黄皑雪房涛李少华邵宁生
- 关键词：原核表达纯化
- 细胞靶向适配体的筛选与面临的问题
- 细胞的靶向调控和靶向递送是近年来国际上药物递送系统的研究热点,除纳米载体外,核酸适配体已然备受瞩目。作为靶向剂和递送分子,细胞膜表面受体靶向的适配体可以将小分子化合物或生物活性分子siRNA分子导入到特定的细胞内,发挥后...
- 李少华郭晓华丁红梅李慧白琛俊董洁李章华邵宁生
- 一种特异识别异质性核糖核蛋白A2/B1(hnRNPA2/B1)的寡核苷酸适配体C6-8的序列和应用
- 本发明公开了属于分子生物医学技术领域的一种特异识别异质性核糖核蛋白A2／B1(hnRNPA2／B1)的寡核苷酸适配体C6-8的序列和应用。通过针对多种肿瘤细胞的SELEX技术获得了单链DNA寡核苷酸适配体C6-8，标记F...
- 邵宁生李慧李少华黄皑雪丁红梅李洁苏雪婷赵强
- 病理类型特异的卵巢癌组织适配子的鉴定
- 2013年
- 目的鉴定经组织切片消减SELEX筛选获得的4条候选适配子对不同类型卵巢癌组织的识别特性。方法公司合成、荧光素修饰候选适配子,利用免疫荧光实验对筛选获得的适配子候选序列进行鉴定。结果免疫荧光实验证明,适配子OC-10-19和OC-10-36能够特异识别卵巢浆液性乳头状囊腺癌,且OC-10-36还能够对早期的不典型增生进行识别,另2条适配子OC-10-10和OC-10-37仅识别个别的卵巢浆液性囊腺癌。结论成功筛选获得识别不同类型卵巢癌组织的特异适配子,为适配子用于不同病理类型标志物的鉴定、临床辅助诊断等提供了理论基础。
- 王玮丁红梅李慧李洁夏伟邵宁生李少华
- 关键词：卵巢肿瘤适配子病理类型
- TNFα特异结合循环microRNA-146a的生物学功能研究
- Micro RNA是具有转录后调控功能的小分子非编码RNA,参与多种生理、病理过程。近年研究显示,体液中存在着大量游离于细胞之外的micro RNA,称为'循环micro RNA',可作为疾病诊断、病情监测、预后判定的生...
- 董洁沈雪莲李洁李少华黄皑雪丁红梅邵宁生
- 关键词：循环MICRORNAMIR-146ATNFΑ载体蛋白
- 文献传递
- 大鼠成骨细胞特异单链DNA适配体的筛选与鉴定
- 2015年
- 目的:筛选能特异识别大鼠成骨细胞的单链DNA(ssDNA)适配体并对其进行鉴定。方法:利用完整细胞为靶标的消减细胞SELEX技术筛选大鼠成骨细胞特异ssDNA适配体,通过荧光显微镜、流式细胞术、基因克隆测序、MEME在线软件和RNA structure分析软件,分析适配体的一、二级结构,并对筛选得到的适配体进行鉴定。结果:经过6轮消减细胞SELEX筛选,荧光显微镜鉴定文库已富集;通过流式细胞术检测及测序分析,得到2条适配体L54和L66与大鼠成骨细胞特异结合,其平衡解离常数分别为494.4±133.3和511.4±160.7 nmol/L。结论:筛选获得特异识别大鼠成骨细胞的ssDNA适配体。
- 李慧丁红梅李洁黄皑雪苏雪婷梁超张令强赵强李少华邵宁生
- 关键词：大鼠成骨细胞DNA文库适配体
- 一种利用miR-146a为标志物的肝癌患者血清检测试剂盒及方法
- 本发明公开了属于分子生物医学技术领域的一种利用miR-146a为标志物的肝癌患者血清检测试剂盒及方法。本发明设计miR-146a特异性的引物，采用定量PCR的方法检测正常人血清、肝癌患者血清中miR-146a的含量变化，...
- 邵宁生李慧李少华李洁王玮丁红梅黄皑雪苏雪婷赵强
- 文献传递
