李昌
- 作品数：254 被引量：338H指数：8
- 供职机构：吉林大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 二硫键稳定的抗HIV-1 gp41单链抗体的构建及原核表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建二硫键稳定的抗HIV-1 gp41单链抗体(dsFv)基因原核表达载体,并进行表达和鉴定。方法采用PCR定点突变的方法,构建含二硫键稳定的抗HIV-1 gp41单链抗体突变基因质粒pUC57-d41,BamHⅠ和HindⅢ双酶切后,定向插入pET-28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,用SDS-PAGE、Western blot鉴定表达产物。对目的蛋白进行纯化和复性,并进行抗原结合活性及相对稳定性检测。结果重组载体pET-d41经酶切鉴定,证实构建正确。表达产物相对分子质量约为28000,与理论预期值完全相符。目的蛋白最高表达量可占菌体总蛋白的45.48%。经Ni-NTA亲和层析法纯化并复性后,蛋白纯度达95%以上,抗HIV-1 gp41 dsFv具有抗原结合活性,稳定性优于scFv。结论已成功构建了二硫键稳定的抗HIV-1 gp41单链抗体(dsFv)基因原核表达载体,并获得表达,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 佟敬山李昌金宁一于源华刘玉生于芳胡宁宁李霄张钰
- 关键词：人免疫缺陷病毒GP41单链抗体原核表达稳定性
- 四种内固定方式固定胫骨中下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折有限元分析
- 背景： 胫骨中下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折是一种特殊类型的复合骨折，发病率高，常发生于低能量创伤中。由于胫骨中下1/3螺旋形骨折合并后踝骨折其受伤机制，导致后踝骨折移位常不明显，在常规X线中不易被发现漏诊率较高。胫骨...
- 李昌
- 关键词：有限元分析
- 乳酸菌破壁方法的比较研究被引量：8
- 2017年
- 本实验旨在探索一种快速、高效、经济的乳酸菌破壁方法。通过甘氨酸破壁法、反复冻融破壁法、溶菌酶破壁法、氧化锆珠破壁法、超声波破壁法以及3种复合破壁法对植物乳杆菌Lactobacillus.plantarum 1.557进行破壁处理,并以革兰氏染色和十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)为评价方法,比较破壁效果和破壁时间的差异。此外,通过β-葡萄糖醛酸酶(GUS)活力的测定对氧化锆珠破壁法所提蛋白进行活性检测,通过琼脂糖凝胶电泳对氧化锆珠破壁法所提RNA的质量进行了检测。结果表明:氧化锆珠破壁法优胜于其他几种处理方法,该法所提取的GUS蛋白具有蛋白活性,提取的RNA的OD_(260)/OD_(280)的比值在1.8~2.1之间,符合标准的比值,纯度较高,降解程度低。因此,氧化锆珠破壁法适用于快速提取乳酸菌菌体蛋白和总RNA,它是一种快速、高效、经济的乳酸菌破壁方法。
- 潘荣荣王茂鹏李昌邸洋荣凤君杜寿文朱羿龙刘立明朱国强金宁一
- 关键词：乳酸菌蛋白提取RNA提取
- 斩断动物病毒病传播的“利剑”——我国动物病毒病防控工作还任重道远
- 2013年
- 动物病毒病防控是全球共同面临的难题,"重要动物病毒病防控关键技术研究与应用"项目解决了我国动物病毒病综合防控技术中的一些问题。但我国整体水平与国外还有一定的差距,仍需在动物病毒监测、跨种感染、致病机制、快速诊断试剂、新型疫苗研发和预警机制等方面加强体系建设,以提升我国动物疫病的综合防控能力。
- 鲁会军李昌
- 关键词：动物病毒病
- 口蹄疫基因工程疫苗在牛的试验免疫研究
- 口蹄疫(Foot-and-Mouth disease,FMD)偶蹄动物易感的最烈性传染病之一。免疫接种已经被证明是控制并消灭该病的有效措施。尽管目前广泛使用的FMD灭活疫苗是有效的,但在使用中存在安全隐患。此外,近年来F...
- 郑敏金宁一秦晓冰金扩世尹革芬田明尧郭建顺徐敬龙李昌夏志平
- 文献传递
- 口蹄疫病毒泛亚株VP1基因的克隆与原核表达
- 根据口蹄疫流行毒株设计一对包含VP1部分基因编码区的特异性引物,扩增出VP1基因633bp的特异带,并将纯化的扩增产物克隆到pMD18-T载体上.再用设计的酶切位点将VP1基因分别连接到两种原核表达栽体上,构建了重组质粒...
- 鲁会军韩松郑敏李旭李昌金扩世金宁一
- 关键词：口蹄疫VP1基因基因克隆基因表达
- 禽流感疫苗的研究进展被引量：1
- 2008年
- 禽流感（AI）是由禽流感病毒（AIV）引起的一种禽类传染病。根据AIV对易感鸡致病性的差异，可将AIV分为高病性AIV（HPAIV）和低致病性AIV（LPAIV）。
而对于疫苗的使用，多数国家政府则采取禁止或不提倡的政策，在学术界同样存在是否应该使用禽流感疫苗的争议。
- 海洋金宁一陈晓月李昌邹伟
- 关键词：禽流感疫苗禽类传染病禽流感病毒学术界
- 流感复合多表位核酸疫苗的构建及其表达研究
- 目的：研究流感病毒复合多表位核酸疫苗的构建及其表达产物的抗原性.方法：根据各表位基本独立的要求,结合计算机分析,以H3、H9亚型流感的HA抗原表位,H5、H7亚型的HA全基因,流感病毒的其它主要抗原(NP、NA、M)表位...
- 金扩世金宁一贾雷立郑敏金洪涛连海李昌王瑞琳鲁会军
- 关键词：流感表位核酸疫苗流感病毒
- 文献传递
- 牛对表达口蹄疫病毒复合多表位基因的重组鸡痘病毒以及DNA疫苗联合免疫的免疫应答被引量：3
- 2006年
- 将构建的共表达口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)复合多表位基因和猪白细胞介素18基因的重组鸡痘病毒活载体疫苗vUTA2-OAT以及DNA疫苗pVRI-OAT,分别以vUTA2-OAT/vVTA2-OAT(首免/加强免疫)、pVRI-OAT/vUTA2-OAT(首免/加强免疫)和vUTA2-OAT/pVRI-OAT(首免/加强免疫)等3种方式接种牛,然后通过间接ELISA、中和试验和T淋巴细胞增殖试验评价其诱导的特异性体液和细胞免疫水平。结果表明,这3种方式均能诱导牛产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答,其中pVRI-OAT/vUTA2-OAT联合免疫方式的免疫效果最佳,诱导的中和抗体达1∶64,已接近于常规灭活疫苗免疫方式,而且其可以诱导比灭活疫苗免疫方式高得多的细胞免疫水平(P<0.01)。上述试验结果为进一步进行免疫攻毒试验,并最终筛选出最佳疫苗和免疫程序奠定了基础。
- 郑敏金宁一田明尧李昌秦晓冰刘棋贾雷立张林
- 关键词：DNA疫苗
- 一种双特异抗肿瘤重组腺病毒及其构建方法和应用
- 本发明提供了一种双特异抗肿瘤重组腺病毒，其包括腺病毒载体和引入其中的表达盒，所述腺病毒载体的复制必须基因突变，所述表达盒包括由肿瘤特异性启动子与E1a基因组成的表达盒和由真核启动子与Apoptin基因组成的表达盒。本发明...
- 金宁一李霄李昌鲁会军田明尧金扩世陈漉刘妍高鹏杨恩成
- 文献传递
