李春燕
- 作品数:145 被引量:643H指数:12
- 供职机构:中国科学院更多>>
- 发文基金:贵州省农业攻关项目贵州省农业科技攻关项目贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达及其免疫原性的研究被引量:8
- 2012年
- 收集某猪场1例发病种公猪的睾丸病料,处理后采用细胞培养与乳鼠脑内接毒相结合的方法盲传并结合RT-PCR方法分离鉴定,命名为乙型脑炎病毒(JEV)贵州分离株(GZ株),然后根据GenBank登录的日本乙型脑炎病毒SA14和SA14-14-2株全基因序列设计并合成1对扩增E基因的特异性引物,用RT-PCR方法扩增出JEV贵州分离株E基因,并将E基因克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-T-E,经双酶切鉴定、测序及序列分析鉴定后,再将E基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建乙脑病毒E基因原核表达质粒pET-32a-E,将构建好的原核表达质粒pET-32a-E转化至宿主菌BL21(DH3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳和Western blot分析,得到了约59ku条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化和浓缩目的蛋白,并将其加入弗氏佐剂后免疫小鼠,免疫后采血检测抗体。结果显示:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达目的蛋白能诱导小鼠产生一定抗体水平,该研究为乙型脑炎亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 汤德元王凤马萍罗险峰李春燕曾智勇徐健刘建
- 关键词:乙型脑炎病毒贵州分离株E基因原核表达免疫原性
- 猪博卡病毒流行病学研究被引量:20
- 2012年
- 猪博卡病毒属于细小病毒科细小病毒亚科博卡病毒属单链线性DNA病毒,该病毒于2009年在瑞典发现。作为一种新型病毒,人们对其的研究仍处于初步探索阶段。本文从博卡病毒的由来、猪博卡病毒的发现、分类、基因组结构及流行病学等方面进行阐述,并根据GenBank收录的25条猪博卡病毒的部分基因和全基因序列,利用DNAStar分析软件,通过Jotun-Hein算法,分别从猪博卡病毒的NS、NP、VP以及全基因序列进行相似性临近排组分析,并建立了PBoV系统发育树。结果发现可将猪博卡病毒分为2个大支和若干遗传簇,但这些不同的遗传簇所包含的毒株在核苷酸序列上仍然存在着一定的差异。
- 郝飞汤德元李春燕罗险峰张华马萍曾智勇洪尼宁刘霞
- 关键词:分子流行病学遗传进化分析
- 某规模化猪场猪繁殖障碍性疫病ELISA及六重PCR的检测分析
- 2015年
- 为了解贵州省某规模化猪场6种繁殖障碍性疫病的感染状况,试验采用ELISA试剂盒对送检的血清样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒(PCV-2)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪伪狂犬病毒(PRV)和猪细小病毒(PPV)抗体水平的检测,同时对送检的组织病料进行六重PCR检测。结果表明:CSFV、PRRSV、PCV-2、JEV、PRV和PPV的抗体阳性率分别为93.2%、52.7%、49.4%、83.8%、87.3%和78.8%,其中PRRSV免疫效果较差;另外,该猪场未免疫PCV-2疫苗,但是其抗体阳性率相当高,血清学检测结果显示,该猪场很可能存在PRRSV和PCV-2感染;送检的组织病料经六重PCR检测结果显示,该猪场存在PRRSV和PCV-2野毒感染。说明该猪场应加强猪繁殖与呼吸综合征和猪圆环病毒病的预防工作。
- 罗险峰张华汤德元马萍李春燕曾智勇刘建郝飞李达
- 关键词:规模化猪场繁殖障碍性疫病ELISA抗体水平
- 黄果树毛峰春茶与夏茶香气成分研究
- 2021年
- 从香气组分的角度分析黄果树毛峰春茶与夏茶的差异,为茶叶品质物质基础的形成提供理论依据。方法:采用SPME-GC-MS法结合Nist2008和Wiley275谱库鉴定分析各香气成分,通过峰面积归一化法测定各成分相对含量。结果:春茶中检测并鉴定了65个化合物,夏茶中检测并鉴定了35个化合物,主要香气成分为醇类和酯类,春茶中醇类成分较夏茶高,酯类成分较夏茶低,二者共有香气成分32个,占总香气成分分别为84.6%和99.0%,其中春茶中含量较多的特有成分为Z-3-己烯醇和香叶醇,占总香气成分的12.0%,香叶醇作为一种玫瑰系香精主剂,能赋予春茶甜的玫瑰花气息。结论:春茶在香气成分的种类上较夏茶丰富,特有的Z-3-己烯醇和香叶醇,可能是春茶比夏茶气味浓郁的主要原因。
- 李春燕王若焱张明王道平潘卫东宋攀文治瑞
- 关键词:春茶夏茶香气成分SPME-GC-MS
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒与猪流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立被引量:7
- 2014年
- 为建立可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与猪流感病毒(SIV)二重RT-PCR方法,研究根据GenBank登录的相关病毒基因序列,选择保守区域设计引物,经过反应条件的优化,建立了可同时检测以上2种病毒的RT-PCR诊断方法,扩增的目的片段长度分别为364 bp(PRRSV)和981 bp(SIV)。通过实验证明该方法具有良好的特异性和较高的敏感性,对PRRSV和SIV的核酸检测最低浓度分别为3.2×10-3 ng和2.7×10-3 ng。应用该方法对32份临床样品进行检测发现,PRRSV阳性率为43.8%,SIV阳性率为31.3%,二重感染率为9.4%。该方法的成功建立为快速高效地检测以上2种病毒提供了有力手段。
- 王洪光汤德元曾智勇罗险峰李春燕郝飞刘建李达
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征病毒猪流感病毒
- 乙型脑炎的发病机理及毒力致病机理的研究进展被引量:7
- 2008年
- 主要介绍了乙型脑炎的病毒基因组成、发病机理和毒力致病机理的研究,从乙脑病毒的基因组结构及其所编码的蛋白质的功能上分析乙脑病毒的毒力致病机理与基因结构的关系及其研究进展,为进一步掌握乙脑病毒强弱毒株基因结构的差异及研究其基因工程疫苗提供了理论基础。
- 李春燕汤德元徐健刘玉攻黄涛
- 关键词:乙型脑炎发病机理
- 日本乙型脑炎病毒NS1基因及其疫苗的研究进展被引量:4
- 2012年
- 日本乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的严重的人畜共患传染病。乙型脑炎病毒的三种糖基化蛋白PrM、E和NS1是其主要免疫保护性抗原,其中PrM和E蛋白是日本乙型脑炎病毒的结构蛋白,其结构和相关疫苗研究的报道较多。NS1蛋白是日本乙型脑炎病毒的非结构蛋白,其主要参与病毒复制的早期阶段,推测可能参与病毒组装和释放。可诱导补体依赖性溶细胞反应,不能产生中和抗体,能诱发机体在非中和性抗体存在的情况下产生保护性免疫。在接种乙脑病毒的细胞的细胞内、细胞表面及上清液中均含有大量的NS1蛋白。对小鼠接种NS1蛋白或NS1蛋白特异性抗体,均能让小鼠产生对乙脑病毒感染的保护性免疫作用。本文主要就乙型脑炎病毒非结构基因NS1及其免疫疫苗的研究进展进行综述,为其更进一步深入研究JEVNS1基因及其相关疫苗奠定基础。
- 王凤汤德元李春燕曾智勇甘振磊刘建郝飞
- 关键词:日本乙型脑炎病毒NS1基因相关疫苗
- 抗体快速金标检测卡结合RT-PCR技术诊断猪繁殖与呼吸综合征
- 采用猪蓝耳病抗体快速金标检测卡对贵州省不同发病猪场进行血清学检测,其弱阳性检出率为54%。在此基础上参考GenBank登录的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和PRRSV VR-2332毒株核苷酸序列,设计一对特异...
- 汪忠荣汤德元曾智勇刘霞袁东波李春燕
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征血清学检测
- 文献传递
- 黔北茶叶矿质元素与生化品质含量特征分析被引量:7
- 2022年
- 探究贵州黔北地区茶叶中矿质元素及生化指标的含量情况,为黔北茶叶品质评价提供参考。对黔北地区当季春茶矿质元素、茶多酚、氨基酸的含量进行分析,钙含量范围为1.69 g/kg~3.86 g/kg,镁含量为1.08 g/kg~2.06 g/kg,锰含量为0.52 g/kg~1.19 g/kg,铁含量为67.04 mg/kg~123.35 mg/kg,锌含量为25.65 mg/kg~62.74 mg/kg,锶含量为2.83 mg/kg~8.18 mg/kg,硒含量为0.05 mg/kg~0.14 mg/kg。茶多酚含量为23.57%~43.24%,平均为32.41%,绿茶高于红茶;茶氨酸含量为1.06%~2.05%,平均为1.63%,绿茶高于红茶。钙和锶极显著正相关,镁与铁、锌显著正相关,锰与茶多酚显著负相关,与茶氨酸极显著负相关,茶氨酸与钙、锶显著负相关,总体微量元素含量较丰富,但元素含量差异较大。锰对茶氨酸、茶多酚的形成有一定的拮抗作用,钙、锶含量对茶氨酸的形成有一定的抑制作用。湄潭红茶、凤冈绿茶、道真绿茶酚氨比较高,茶汤较为苦涩,湄潭绿茶、道真红茶茶多酚含量较为合适,不会对茶汤口感产生影响。
- 颜秋晓颜秋晓李相楹王道平胡恩明张清海
- 关键词:茶叶矿质元素生化指标
- 我国规模化猪场主要病毒性疫病的综合防控对策被引量:44
- 2012年
- 猪病是制约规模化养猪业发展的重要因素之一,尤其是规模化猪场猪的病毒性疫病给养猪业带来了极大的损失。规模化猪场主要病毒性疫病有猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒感染、猪伪狂犬病、猪口蹄疫、猪细小病毒病、猪流感、流行性乙型脑炎、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻等。本文通过分析当前规模化猪场存在的主要病毒性疫病,结合规模化猪场的实际情况,提出了包括规模化猪场的选址布局、种源净化、防疫组织和制度、免疫接种和免疫监测、严格的消毒制度、加强猪群饲养管理并建立猪场疫病诊断和预警系统等综合性措施,为有效防控规模化猪场病毒性疫病发生提供参考。
- 郝飞张华汤德元罗险峰马萍李春燕刘霞甘振磊王凤刘建
- 关键词:规模化猪场