李育敏
- 作品数：24 被引量：40H指数：3
- 供职机构：暨南大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金广西中医药管理局中医药科技专项课题更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学语言文字更多>>
- 研究生双语带教的实践体会被引量：1
- 2011年
- 研究生通过参与本科医学生物化学实验课程的实践教学,将规范的教学与标准的实验操作与适当的板书相结合,灵活利用多媒体,双语教学等手段融入到本科实践教学中,增加师生互动,拓展学生思维,这种方式除了可提高研究生的综合素质外,更有利于本科生的实践与创新能力的培养,从而达到本科生与研究生教育协同发展的目的。
- 谷景义朱雪娇李育敏费嘉
- 关键词：生物化学实验课程
- 三氧化二砷联合miR-203对人白血病K562细胞的抑制作用及其机制被引量：2
- 2014年
- 目的:研究三氧化二砷(As2O3)联合过表达的微小RNA-203(microRNA-203,miR-203)对白血病K562细胞的抑制作用及其可能的分子机制。方法:将miR-203的真核表达载体pmiR-203转染K562细胞,Real-time PCR检测细胞内miR-203的表达。将K562细胞分为空白对照组、As2O3组、pmiR-203组、空质粒对照组、As2O3联合空质粒对照组和As2O3联合pmiR-203组,MTT法检测各组细胞增殖抑制率,流式细胞术仪检测细胞凋亡率,Western Blotting检测细胞内Bcr/abl蛋白的表达水平。构建Bcr/abl 3'UTR和Bcr/abl mut-3'UTR的双荧光素酶报告基因载体,将其与pmiR-203共转染K562细胞,通过荧光素酶活性分析判断miR-203是否与Bcr/abl基因的3'UTR结合。结果:miR-203的真核表达载体pmiR-203转染K562细胞后,细胞内miR-203的表达水平明显增高(P<0.05)。高表达miR-203联合As2O3使K562细胞对As2O3的敏感性提高到单用As2O3的4.86倍,IC50从3.4μmol/L降低至0.7μmol/L,两者联用表现为协同作用。As2O3联合pmiR-203组的细胞凋亡率显著高于As2O3联合空质粒对照组[(29.97±3.19)%vs(10.77±1.71)%,P<0.05]。过表达miR-203显著下调K562细胞内Bcr/abl蛋白的表达水平。Bcr/abl 3'UTR中带有明确的miR-203结合位点。结论:miR-203可提高白血病K562细胞对As2O3的敏感性,miR-203和As2O3联用对K562细胞具有协同抑制作用,其作用机制可能与miR-203直接下调Bcr/abl融合基因的表达有关。
- 黄之虎韦思羽农朝赞韦仕喻农少云郭凌霄李育敏何金花杨林杰
- 关键词：三氧化二砷白血病K562细胞BCR/ABL
- 靶向抑制miRNA-21提高白血病K562细胞对阿糖胞苷的敏感性被引量：10
- 2011年
- 为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)提高白血病K562细胞对阿糖胞苷(Ara-C)的敏感性及可能的作用机制,在LipofectamineTM2000介导下,将化学合成的AMO-miR-21转染K562细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测单独使用AMO-miR-21、Ara-C以及两者联合使用对细胞增殖抑制作用,并计算抑制率和IC50;流式细胞仪检测细胞凋亡;实时定量PCR(Real-time PCR)检测miRNA-21及其候选靶基因Pdcd4 mRNA的表达水平;免疫印迹(Western blot)检测Pdcd4蛋白的表达水平.结果显示Ara-C与AMO-miR-21联合使用后,IC50从1.95μmol/L降低到0.84μmol/L,敏感性提高到单用Ara-C的2.3倍.AMO-miR-21联合Ara-C组细胞凋亡明显增加(P<0.05).AMO-miR-21显著抑制K562细胞中miRNA-21的表达水平(P<0.05),同时Pdcd4的表达明显增加(P<0.05).提示AMO-miR-21可以提高K562细胞对Ara-C的敏感性,其作用机制与靶向抑制miRNA-21,进而诱导细胞凋亡有关.
- 朱雪姣李育敏谷景义郭敏费嘉
- 关键词：MIRNA-21阿糖胞苷K562细胞化疗敏感性
- RALA基因的小干扰RNA在制备抗白血病药物中的应用
- 本发明公开了一种RALA基因的小干扰RNA及其在制备抗白血病药物中的应用。所述小干扰RNA的序列如下：正义链为：5′-CGUGGAAACAUCUGCUAAATT-3′；反义链为：5′-UUUAGCAGAU GUUUCCA...
- 费嘉李育敏谷景义朱雪姣姚君琳林春燕黄康康李灿峰
- 文献传递
- miRNA-21反义核酸对人淋巴瘤Raji细胞的生长抑制作用研究被引量：1
- 2009年
- 为研究以miRNA-21为靶标的反义核酸(AMO-miR-21)对淋巴瘤Raji细胞的生长抑制作用,使用LipofectamineTM 2000将化学合成的反义核酸转染Raji细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率;实时定量PCR技术检测细胞miRNA-21水平改变;PI和Annexin V双染,流式细胞仪检测细胞凋亡.结果显示转染Raji细胞48～72h,反义核酸组细胞生长受到明显抑制,反义核酸抑制细胞活性的最佳浓度是0.4μmol/L;细胞内miRNA-21的表达水平明显下调;细胞凋亡明显增加;此外,反义组细胞中抑癌基因Pdcd4的mRNA和蛋白质呈高水平表达.提示以miRNA-21为靶标的反义核酸是人淋巴瘤Raji细胞生长的有效抑制剂和凋亡诱导剂.miRNA-21可能是淋巴瘤治疗的潜在靶标,其通过下调抑癌基因Pdcd4的表达水平发挥抗肿瘤作用.
- 李育敏董大伟唐杰坷霍毅民王丽鹏费嘉
- 关键词：MIRNA-21反义核酸RAJI细胞细胞凋亡
- 微小RNA在白血病中的作用及治疗策略
- 2011年
- 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类由19～25个核苷酸组成的非编码蛋白质的单链小分子RNA,其在白血病中扮演着癌基因和抑癌基因的角色,针对miRNA在白血病中的不同作用,可采取相应的治疗策略。对于在白血病中高表达的具有癌基因功能的miRNA,可采用反义寡核苷酸等技术下调或抑制miRNA;而对于在白血病中显著低表达、发挥着抑癌基因作用的miRNA,可采用基因治疗的方法,导入相应的外源miRNA,使其正常表达。因此,miRNA对于白血病的基因治疗或作为白血病治疗的新靶标具有广阔的应用前景。
- 谷景义朱雪娇李育敏费嘉
- 关键词：微小RNA癌基因抑癌基因反义寡核苷酸白血病
- 以mRNAs和microRNAs为靶标的反义寡核苷酸设计及抗肿瘤实验研究
- 费嘉张洹何冬梅刘誉李育敏谷景义
- 1.用RNAstructure(version3.7)软件设计并经实验筛选获得2条高效VEGF反义核酸序列，并揭示反义核酸的抑制效率与Overall△G37负相关(论文见CELLBIOLINT，2005，29(9)737...
- 关键词：
- 关键词：抗肿瘤实验白血病
- RALA基因的小干扰RNA在制备抗白血病药物中的应用
- 本发明公开了一种RALA基因的小干扰RNA及其在制备抗白血病药物中的应用。所述小干扰RNA的序列如下：正义链为：5′-CGUGGAAACAUCUGCUAAATT-3′；反义链为：5′-UUUAGCAGAU GUUUCCA...
- 费嘉李育敏谷景义朱雪姣姚君琳林春燕黄康康李灿峰
- 以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对人白血病K562细胞的抑制作用被引量：11
- 2009年
- 目的:探讨以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸对白血病K562细胞的生长抑制效应及可能的作用机制。方法:依据与microRNA-21序列互补的原理,设计反义寡核苷酸,人工合成并全硫代修饰,在Lipo-fectamineTM2000介导下,转染K562细胞。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法筛选最佳作用浓度,台盼蓝拒染法检测其对细胞生长抑制的作用,姬姆萨染色观察细胞的形态学变化,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化。利用荧光定量PCR技术检测反义寡核苷酸作用后细胞内microRNA-21表达水平的改变。结果:MTT结果显示反义寡核苷酸有效抑制细胞生长,分别与随机组、空白对照组进行比较有显著差异(P<0.05),反义寡核苷酸作用的最佳浓度是0.6μmol/L。台盼蓝拒染法结果显示从转染K562细胞24 h开始,反义寡核苷酸组细胞生长明显受到抑制,抑制效应持续到72 h。姬姆萨染色显示反义寡核苷酸作用K562细胞24 h后,可在细胞中见凋亡小体。流式细胞仪检测结果显示反义寡核苷酸组出现明显的亚二倍体峰,细胞周期无发生明显变化。荧光定量PCR结果显示,反义寡核苷酸可有效抑制细胞内microRNA-21的表达水平。结论:以microRNA-21为靶标的反义寡核苷酸可有效抑制人白血病K562细胞的生长,并显著促进细胞凋亡。
- 郭敏李育敏费嘉张洹
- 关键词：寡核苷酸类反义K562细胞
- hsa—miR-218下调Survivin表达影响鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡被引量：2
- 2014年
- 目的研究hsa-miR-218对人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖和凋亡的影响，探讨其作用机制。方法构建hsa-miR-218的真核表达载体（pmiR-218），利用LipofectamineTM2000将PmiR-218转染CNE-2Z细胞，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测PmiR-218对CNE-2Z细胞增殖的影响；AnnexinV／PI双染流式细胞仪检测，miR-218对CNE-2Z细胞凋亡的影响；Western印迹检测细胞内Survivin蛋白表达水平。结果成功构建hsa-miR-218的真核表达载体，miR-218。与随机对照组相比，转染PmiR-218的CNE-2Z细胞增殖受到明显抑制（P〈0．05），细胞早期凋亡显著增加（P〈0．05）。与随机对照组相比，PmiR-218抑制细胞内Survivin蛋白的表达。结论，miR-218可抑制人鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖，诱导细胞凋亡，其作用机制与下调Survivin基因表达有关，提示hsa-miR-218在鼻咽癌的发生发展中扮演着肿瘤抑制基因的作用，可能是鼻咽癌治疗的新靶点。
- 农朝赞黄之虎韦士喻郭灵霄李育敏杨林杰
- 关键词：SURVIVIN鼻咽癌CNE-2Z细胞
