李西睿
- 作品数:29 被引量:20H指数:3
- 供职机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 转录因子ZBED6调控家猪肌肉生长发育功能的分子机制
- 目的:为了解决我国家猪瘦肉率低、可供改良利用的转基因猪缺乏等难题.方法:基于申请人对国外瘦肉型家猪的长期研究发现的、与肌肉发育密切相关的转录因子ZBED6,采用最新的CRISP/Cas9基因打靶技术来构建ZBED6基因敲...
- 蒋琳潘登科杨敏李西睿刘雪雪马月辉
- 关键词:家猪转录因子分子机制
- 体细胞克隆制备肌肉生长抑制素(Myostatin)基因敲除猪
- 【目的】肌肉生长抑制素(Myostat in,MSTN)是一类对骨骼肌生长具有负调控作用的因子,MSTN基因的缺失或突变会引起其骨骼肌重量的显著增加。因此,生产MSTN基因敲除猪有望提升猪胴体瘦肉率,达到提高饲料利用率的...
- 李鸿辉冯冲王宁闫军龙川郑道山李西睿罗学明朱彦宾潘登科
- 关键词:基因打靶MYOSTATIN基因胎儿成纤维细胞
- 锌指核酸酶技术制备肌肉生长抑制素基因敲除的五指山小型猪成纤维细胞被引量:6
- 2013年
- 敲除猪肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因可能提高猪瘦肉率,MSTN基因敲除猪也可作为相关疾病的动物模型。文章利用锌指核酸酶(Zinc-finger nucleases,ZFNs)技术敲除五指山小型猪胎儿成纤维细胞MSTN基因,为制备MSTN基因敲除猪奠定基础。ZFNs质粒或编码ZFNs的mRNA均能高效敲除MSTN基因,使用ZFNs mRNA能直接得到MSTN+/-和MSTN-/-两种基因型的细胞克隆。DNA序列测定与分析发现,细胞克隆的突变类型多为ZFNs作用靶位点处不大于10 bp的碱基插入或缺失(92.18%);氨基酸预测发现,突变型MSTN基因的终止密码子常常提前出现。将MSTN基因敲除的细胞进行体细胞核移植(Somatic cell nuclear transfer,SCNT)发现,胚胎体外早期发育潜力与野生型无显著差异,表明这些细胞可用于后续MSTN基因敲除猪的制备。
- 曹随忠岳成鹤李西睿冯冲龙川潘登科
- 关键词:肌肉生长抑制素基因敲除五指山小型猪锌指核酸酶
- 应用半乳糖表型差异高效筛选α-1,3半乳糖苷转移酶基因缺失的猪成纤维细胞
- 2014年
- 【目的】筛选α-1,3半乳糖苷转移酶(α1,3galactosyl transferase,GGTA1)基因缺失的猪成纤维细胞。【方法】用同源重组载体pBS-GGTA1-SKO和pBS-GGTA1-DKO电转染GGTA1单等位基因敲除(GGTA1+/-)的五指山小型猪胎儿成纤维细胞,利用磁激活细胞分选(MACS)、MACS联合流式细胞术(FACS)、TcdA联合FACS等3种方法进行细胞筛选;对MACS筛选获得的单细胞克隆进行PCR和FACS鉴定,对MACS联合FACS、TcdA联合FACS获得的细胞集落进行PCR鉴定。【结果】经MACS筛选获得了11个细胞克隆,经鉴定2个是GGTA1-/-细胞克隆,阳性率为18.2%;MACS联合FACS筛选获得了3个细胞克隆,经鉴定无GGTA1-/-细胞克隆,阳性率为0;TcdA联合FACS筛选获得了3个细胞克隆,经鉴定均为GGTA1-/-细胞克隆,阳性率为100%。【结论】MACS法筛选和TcdA联合FACS法筛选这2种方法均可以高效筛选出GGTA1双等位基因缺失的猪成纤维细胞,可用于进一步制备供异种器官移植的基因修饰小型猪。
- 岳成鹤曹随忠李西睿冯冲龙川余树民储明星潘登科
- 关键词:五指山小型猪基因缺失成纤维细胞
- 用于异种移植的GTKO/hCD46/hTBM多基因修饰五指山小型猪
- 小型猪是理想的异种器官移植供体,猪器官移植到人体后会诱发超急性免疫排斥反应(Hyperacute rejection,HAR)、凝血功能障碍等一系列问题,通过对小型猪进行多基因修饰,可以阻断HAR及凝血功能障碍的发生,为...
- 潘登科冯冲石宁宁龙川李西睿
- 转基因猪的繁育及多基因复合育种
- 引言 随着国家转基因猪新品培育的实施和转基因猪在生物医学研究的开展,转基因克隆猪的繁育是否正常、遗传是否稳定等问题也是转基因猪研究的重要内容.课题组2010-2012年获得了转线虫sfatI基因的富含ω-3多不饱和脂肪酸...
- 潘登科冯冲石宁宁龙川李西睿
- 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
- 潘登科龙川石宁宁冯冲李西睿于淑珍曾国敏唐雨婷高景波
- 导师主导的校企合作研究生培养模式的探索被引量:3
- 2014年
- 导师主导型的校企合作模式,是指研究生导师作为合作的主体,与高科技企业进行科研合作、搭建科研合作平台,研究生作为导师的科研助手参与企业研发工作,是实践中出现的一种校企合作的新形式。这种新型的校企合作模式顺应了国民经济发展的需要,同时又为研究生的科技创新提供了基础和广阔空间。作者结合自身与企业合作培养研究生的经历,阐述了建立导师主导型的校企合作模式的意义,开展了在新模式下培养研究生的效果观察,提出了实施该模式的几点建议和所需的制度保障。
- 田兴华张表王梦佳李西睿
- 关键词:校企合作研究生教育
- 异种抗原GGTA1/CMAH双基因敲除猪的创建及鉴定
- 人类异种器官移植的理想供体,α1,3-半乳糖基转移酶基因(GGTA1)敲除有效克服了猪器官移入灵长类的超急性免疫排斥.引起猪-人异种移植体液免疫排斥的抗原中,N-羟乙酰神经氨酸(Neu5Gc)是另一种已知的重要异种抗原,...
- 李西睿冯冲龙川纪慧丽魏静石宁宁蒋应弟潘登科
- 关键词:基因敲除
- CRISPR/Cas9介导的敲除ASGR1基因五指山小型猪
- 猪内皮细胞的去唾液酸糖蛋白受体1 (asialoglycoprotein receptor 1,ASGR1)是诱发异种肝移植后受体发生血小板减少症的主要诱因之一.本研究在α-1,3-半乳糖基转移酶基因(α-1,3-gal...
- 石宁宁李西睿龙川冯冲潘登科
- 关键词:异种肝移植体细胞核移植