杨世茂
- 作品数：27 被引量：91H指数：5
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- FGF2对成骨细胞矿化及矿化基因ENPP1，ANK和TNAP表达的影响
- 2012年
- 目的研究碱性成纤维细胞生长因子（FGF2）对分化不同阶段的成骨细胞（MC3T3．E1）矿化基因ENPP1，ANK和TNAP表达的影响，从细胞和分子水平上探讨FGF2对成骨细胞矿化的机制。方法构建不同分化阶段的MC3T3-E1细胞，诱导前为未分化阶段，矿化诱导后为分化阶段。50μg／LFGF2分别作用于未分化和分化阶段的MC313-E1细胞，测定细胞内碱性磷酸酶表达情况，用茜素红染色法观察MC3T3-E1细胞矿化结节的变化，实时荧光定量RT—PCR检测细胞矿化基因ENPP1，ANK和TNAP表达的差异并进行统计学分析。结果 茜素红染色显示FGF2抑制MC3T3-E1细胞的矿化。FGF2作用于未分化的MC3T3-E1细胞，ENPPl，ANK基因表达明显上调，TNAP基因表达明显下调；而FGF2作用于分化的MC3T3-E1细胞后基因表达变化不明显、结论体外细胞研究显示，FGF2可能是通过调节焦磷酸盐加工因子ENPPI，ANK，TNAP基因表达的变化来抑制MC3T3-E1细胞的矿化过程．
- 李静刘金盼杨世茂文玉珍王明国
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子成骨细胞
- 腺病毒介导HGF转染脂肪干细胞复合温敏型可注射水凝胶对兔颞下颌关节骨关节病髁突软骨的修复作用被引量：9
- 2017年
- 目的:探讨肝细胞生长因子(HGF)转染脂肪干细胞复合水凝胶支架材料对促进兔颞下颌关节炎病理状态微环境中受损软骨修复的意义。方法:培养兔脂肪干细胞,利用腺病毒介导对其进行HGF转染并制备ADSCs/HGF/水凝胶支架材料。兔颞下颌关节上腔为注射区并分为5组,A组为空白对照组,B组为模型组,C组为单纯细胞治疗组,单纯脂肪干细胞腔内注射,D组为干细胞复合材料组,为造模后腔内注射干细胞复合可注射水凝胶支架材料,E组为转染后干细胞复合水凝胶注射。所有材料移植成功后各组动物分别于用药第3、9周后取材,制备标本并行髁突软骨扫描电镜、组织学观察及实时定量PCR检测,采用SPSS17.0软件包对数据进行方差分析及t检验。结果:扫描电镜与组织学观察可见,D、E组软骨病变区改善情况优于B、C组。与模型组比较,实时定量PCR结果显示,E组MMP-13表达与空白组相对持平但低于C、D组,差异有显著性(P<0.05);E组TIMP-1表达与空白组相对持平但高于C、D组,差异有显著性(P<0.05)。结论:腺病毒介导HGF转染脂肪干细胞复合可注射型水凝胶对兔颞下颌关节骨关节病受损软骨具有明显修复作用。
- 张广德李荣亮岳从雷杨世茂郭延伟房殿吉
- 关键词：脂肪干细胞颞下颌关节骨关节病
- BMP-9/EPO双基因共转染ADSCs复合nHAC/PLA支架修复兔下颌骨缺损的实验研究被引量：5
- 2017年
- 目的:探讨腺病毒介导BMP-9/EPO双基因共转染脂肪干细胞(ADSCs)复合nHAC/PLA支架材料促进体内成骨的可行性。方法:分离培养兔ADSCs,利用重组腺病毒构建携带BMP-9、EPO、BMP-9/EPO基因的表达载体,并转染至兔ADSCs。14 d后,在荧光显微镜下观察各组细胞荧光表达情况,计算病毒转染效率,采用Western免疫印迹检测各组细胞BMP-9及EPO蛋白的表达。50只大白兔随机分为5组,A组为空白组,B组为单纯材料组,C组为BMP-9/nHAC/PLA组,D组为EPO/nHAC/PLA组,E组为BMP-9/EPO/nHAC/PLA组。制备兔双侧下颌骨缺损模型,按照实验分组,将转染组细胞分别与nHAC/PLA支架复合培养后植入兔下颌骨缺损处,于4、8、12周在缺损处取材进行影像学、组织学检测及扫描电镜观察,比较各组动物下颌骨缺损修复情况。采用SPSS17.0软件包对结果进行统计学分析。结果:荧光显微镜下观察,BMP-9、EPO及BMP-9/EPO重组腺病毒均能稳定转染ADSCs,转染效率为80%~93%。转染后,BMP-9、EPO及BMP-9/EPO基因和蛋白均能稳定表达。转染后的ADSCs与nHAC/PLA支架复合,其骨缺损区修复情况优于对照组,且BMP-9/EPO/nHAC/PLA组成骨情况优于其他各组。扫描电镜下见转染组骨缺损与材料结合修复情况优于对照组,BMP-9/EPO/nHAC/PLA组修复最明显。结论:BMP-9、EPO均可转染ADSCs并稳定表达。与nHAC/PLA支架材料复合后,可显著促进下颌骨缺损的修复,为骨组织修复工程提供了新的选择。
- 张广德靳霞李荣亮杨世茂郭延伟房殿吉
- 关键词：脂肪干细胞促红细胞生成素
- TGF-β3转染脂肪干细胞复合OGP-HA-ChS支架对兔髁突受损软骨的修复作用被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨TGF-β3转染脂肪干细胞ADSCs复合OGP(成骨多肽)-HA(透明质酸)-ChS(硫酸软骨素)支架修复兔髁突受损软骨的可行性。方法:分离培养兔ADSCs,利用重组腺病毒构建携带TGF-β3基因表达载体,并转染至兔ADSCs。14 d后,观察细胞荧光表达情况并计算病毒转染效率,Western印迹检测TGF-β3蛋白表达。50只大白兔随机分为5组,A组为空白组,B组为TGF-β3转染ADSCs组,C组为OGP-HA-ChS支架组,D组为ADSCs复合OGP-HA-ChS组。E组为TGF-β3转染ADSCs复合OGP-HA-ChS组,兔颞下颌关节骨关节病模型制备完成后,按照实验分组进行材料移植。各组动物分别于材料移植第3、9周后取材,制备标本并行髁突软骨扫描电镜、组织学观察及实时荧光定量PCR检测。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:扫描电镜与组织学观察可见,D、E组软骨病变修复改善情况优于B、C组。与模型组比较,实时定量PCR结果显示,E组MMP-3表达与A组相对持平但低于C、D组,差异有显著性(P<0.05);E组TIMP-1表达与A组相对持平但高于C、D组,差异有显著性(P<0.05)。结论:TGF-β3转染ADSCs复合OGP-HA-ChS支架对兔髁突受损软骨具有修复作用。
- 郭延伟杨世茂
- 关键词：脂肪干细胞TGF-Β3颞下颌关节骨关节病
- 重组腺病毒介导BMP-9及促红细胞生成素双基因共转染促进脂肪来源干细胞体外成骨的研究被引量：5
- 2016年
- 目的探讨重组腺病毒介导BMP-9及促红细胞生成素（erythropoietin,EPO）双基因共转染对脂肪来源干细胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）体外成骨分化的影响。方法取4月龄新西兰兔腹股沟脂肪组织,采用酶消化法与贴壁法分离培养ADSCs并鉴定其多向分化能力。将第3代ADSCs分为5组：A组为正常细胞,B组为空质粒转染细胞作为对照,C、D组分别采用BMP-9、EPO重组腺病毒转染细胞,E组采用BMP-9、EPO重组腺病毒共转染细胞。转染培养7 d后倒置相差显微镜观察各组细胞生长变化;计算48 h时病毒转染效率,14 d荧光显微镜下观察各组细胞荧光表达情况;14 d时Western blot检测各组细胞BMP-9及EPO蛋白表达。取转染培养14 d的5组细胞进行成骨诱导培养,于诱导培养3、7、14 d检测各组细胞ALP活性;3周时茜素红染色观察钙结节形成情况,实时荧光定量PCR检测骨桥蛋白（osteopontin,OPN）、骨钙素（osteocalcin,OCN）基因表达。结果转染培养7 d后倒置相差显微镜下见A、B组部分细胞变为椭圆形、圆形和不规则形;C、D组可见少量长梭形细胞;E组长梭形细胞明显增多,仅见少量圆形细胞。荧光显微镜下观察BMP-9、EPO及BMP-9/EPO重组腺病毒均能稳定转染ADSCs,转染效率为80%-93%。Western blot检测示E组BMP-9及EPO蛋白相对表达量显著高于其他组,差异有统计学意义（P〈0.05）。成骨诱导培养3、7、14 d时各组细胞ALP活性明显升高,E组优于其余各组（P〈0.05）;3周时茜素红染色示E组钙结节数亦显著高于其余各组（P〈0.05）,实时荧光定量PCR示E组OPN和OCN基因相对表达量明显高于其他组,C、D组高于A、B组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论重组腺病毒介导BMP-9及EPO基因均可转染ADSCs并稳定表达,双基因共转染后能显著促进成骨相关基因和蛋白的表达。
- 张广德苏成帅靳霞杨世茂房殿吉郭延伟
- 关键词：脂肪来源干细胞重组腺病毒促红细胞生成素
- SDF-1/NELL-1双基因转染促进脂肪干细胞体外成骨被引量：3
- 2022年
- [目的]观察腺病毒载体转染基质细胞衍生因子-1 (stromal cell-derived factor-1, SDF-1)和尼尔样-1型分子(Nellike molecule-l, NELL-1)基因对兔脂肪干细胞(adipose stem cells, ADSCs)体外成骨分化能力的影响。[方法]自兔分离培养ADSCs,分为单纯细胞组(original cell control, OCC)、空质粒转染组(empty vector control, EVC)、SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组,给予相应体外处理。成骨诱导14 d后,茜素红染色检测钙结节形成及碱性磷酸酶活性,Western blot检测和RT-PCR检测相应蛋白与m RNA表达水平。[结果]单纯SDF-1或NELL-1转染,或SDF-1/NELL-1两者共同转染均显著增加目标基因的蛋白表达水平(P<0.05),特别是共同转染同时增加两种基因标目蛋白的表达。茜素红染色钙结节计数和ALP活性检测方面,SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组均显著高于OCC组和EVC组(P<0.05),其中,SDF-1/NELL-1组最高。RT-PCR检测方面,SDF-1组、NELL-1组和SDF-1/NELL-1组的OPN和OCN m RAN表达水平高于OCC组和EVC组(P<0.05),其中SDF-1/NELL-1组的OPN和OCN m RAN表达水平最高。[结论] SDF-1、NELL-1单独转染,或两者共转染ADSCs均可获得目标蛋白的高表达,以上两种基因单独转染,特别是两种基因共同转染,可显著增强ADSCs的体外成骨。
- 郭延伟王永曼杨世茂房殿吉
- 关键词：脂肪干细胞成骨
- 复合ADSCs／β-TCP组织工程骨与PRF修复下颌骨缺损的实验研究被引量：8
- 2012年
- 目的:探讨脂肪干细胞/β-磷酸三钙(ADSCs/β-TCP)组织工程骨复合富血小板纤维蛋白(PRF)在修复下颌骨缺损中的作用。方法:新西兰大白兔27只,采用随机对照动物实验,随机分为3组,每组9只,培养家兔自体ADSCs,制备自体PRF。在每只兔子的双侧下颌骨制备下颌骨缺损模型。A组:将单纯的β-磷酸三钙(β-TCP)植入双侧下颌骨缺损区,B组:将ADSCs/β-TCP植入双侧下颌骨缺损区,C组:将ADSCs/β-TCP与PRF植入双侧下颌骨缺损区。分别于术后2、4、8周分别处死9只大白兔,并通过大体观察、X线片、以及组织切片观察下颌骨缺损的修复情况。结果:C组在2、4、8周3个时间点的成骨情况明显优于其他2组(P<0.01)。A组与B组之间的成骨情况差异无显著性(P>0.05)。结论:ADSCs/β-TCP复合物与PRF联合应用可促进下颌骨缺损的修复。
- 杨世茂王明国李静刘金盼
- 关键词：脂肪干细胞富血小板纤维蛋白下颌骨缺损
- 富血小板纤维蛋白的研究进展被引量：3
- 2012年
- 富血小板纤维蛋白(PRF)是一种富含细胞因子和生长因子的自体来源的新型生物材料,被誉为新一代血小板浓缩物。其分子结构类似天然血凝块,为组织细胞提供迁移、增殖和分化的场所。近来,许多学者将PRF作为移植材料应用于口腔种植前上颌窦底提升术后的骨移植中,并获得了良好的效果。本文就PRF及其在口腔种植上颌窦底提升术中的应用进展作一综述。
- 杨世茂王明国
- 关键词：富血小板纤维蛋白口腔种植上颌窦底提升
- 当归多糖对高糖状态下成骨作用的研究
- 研究目的:探讨当归多糖(Angelica sinensis polysaccharide, ASP)对高糖状态下成骨作用的影响。研究方法:分离培养大鼠(Bone marrow mesenchymal stem cells...
- 杨世茂
- 关键词：当归多糖骨髓基质干细胞成骨分化2型糖尿病
- 文献传递
- 富血小板纤维蛋白通过Wnt/β-catenin信号通路促进BMSCs成骨分化的研究被引量：1
- 2016年
- 目的 :研究富血小板纤维蛋白(PRF)通过Wnt/β-catenin信号通路对骨髓基质干细胞(BMSCs)分化的影响。方法:分离、培养原代兔BMSCs,取第三代细胞进行干细胞鉴定,收集同一只兔耳缘静脉血离心制备PRF,将PRF与BMSCs置于Transwell小室中共培养并进行成骨分化。实验分组:A组为单纯BMSCs对照组;B组为PRF与BMSCs共培养组;C组为加入DKK1的PRF与BMSCs共培养组;D组为加入Wnt3a的PRF与BMSCs共培养组。茜素红染色观察各组钙结节形成情况,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测各组ALP活性,定量聚合酶链反应(q RT-PCR)检测成骨成脂相关基因Runx2、OCN、PPARγ2及LPL的m RNA表达,同时检测Wnt/β-catenin信号通路关键因子Cyclin D1及β-catenin的m RNA表达。结果:流式细术检测结果显示,原代培养的BMSCs符合间充质干细胞鉴定标准。茜素红染色结果显示,B组和D组的钙结节数量明显多于A组和C组,A组和C组之间无明显差异。碱性磷酸酶(ALP)活性检测结果显示,B组与D组的ALP活性较A组和C组明显增加(P<0.05),且两组之间差异无明显统计学意义。q RTPCR结果显示B组与D组中的成骨分化标志基因Runx2、OCN的m RNA表达,较A组和C组显著增加(P<0.05),而成脂分化标志基因PPARγ2、LPL的m RNA表达显著降低(P<0.05)。此外,B组和D组中Wnt/β-catenin信号通路关键因子Cyclin D1及β-catenin的m RNA表达较A组和C组显著增加(P<0.05)。结论:PRF通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进BMSCs成骨分化而抑制其成脂分化。
- 杨世茂郭延伟李大鲁王明国
- 关键词：富血小板纤维蛋白骨髓基质干细胞成骨分化成脂分化WNT/Β-CATENIN信号通路
