杨柳絮
- 作品数：22 被引量：67H指数：5
- 供职机构：长治医学院肝病研究所更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金山西高校科技研究开发项目山西省科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 青蒿琥酯抗大鼠免疫性肝纤维化的作用及机制研究被引量：22
- 2011年
- 目的研究青蒿琥酯抗实验性肝纤维化的作用及其可能机制。方法制备牛血清白蛋白免疫性大鼠肝纤维化模型。动物随机分为6组:正常对照组、模型对照组、Art组(5、15、45 mg.kg-1)、阳性对照Col组(0.1 mg.kg-1)。Masson染色观察肝组织病理变化,Jamall法测定肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,RT-PCR技术检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1),α-肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达。体外培养大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),用TGF-β1(5μg.L-1)刺激,与Art(终浓度6.25、25、50 mg.L-1)共培养后,检测HSC-T6中Ⅰ型前胶原(procollagenⅠ)mRNA及Ⅰ型胶原(collagenⅠ)蛋白的表达。结果与模型组相比,Art各组能减轻肝组织纤维增生的程度,降低肝组织Hyp含量,使肝组织α-SMA、TGF-β1 mRNA和HSC-T6中procollagenⅠmRNA和collagenⅠ蛋白的表达水平下降。结论 Art有明显的抗肝纤维化作用,其机制可能与抑制HSC活化,降低TGF-β1 mR-NA及collagenⅠ蛋白的表达有关。
- 来丽娜杨柳絮郭春花张晓一王黎敏范毅敏
- 关键词：青蒿琥酯肝纤维化肝星状细胞转化生长因子Β1
- 脂多糖诱导原代培养肝实质细胞与库普弗细胞表达和释放高迁移率族蛋白B1被引量：6
- 2007年
- 目的观察LPS诱导HMGB1在肝实质细胞（HC）与库普弗细胞（KC）的表达和细胞外释放。方法培养瓶中分别培养原代HE和KC,24h后收获对照组和500μg/L LPS诱导组两种细胞,反复冻融,用半定量RT-PCR和Western blot法检测HMGB1 mRNA水平和HMGB1表达水平;接种原代HC和KC于24孔板中,继续培养6、12、24h和48h,Western blot法检测各时间点对照组和LPS诱导组培养液中HMGB1含量。结果LPS诱导24h后,与相应对照组比较,HC和KC中HMGB1 mRNA表达水平明显增强（t值分别为31.32和45.90,P值均〈0.05）,HMGB1表达水平也明显增强（t值分别为46.19和38.44,P值均〈0.05）;在6、12、24h和48h,对照组两种细胞及诱导组HC培养上清液中仅检测到少量HMGB1,延长培养时间,培养上清液中HMGB1含量无明显变化（F=1.61,P〉0.05）;与对照组比较,诱导组KC培养液中的HMGB1含量在6h无显著增加（t=1.48,P〉0.05）,但随培养时间延长,其含量明显增高（F=42.74,P〈0.05）,且在12、24h和48h均明显高于对照组（t值分别为21.95,32.39和44.16,P值均〈0.05）。结论LPS可诱导HC和KC中HMGB1表达增强,HC不主动释放HMGB1,而KC能主动释放HMGB1到细胞外。
- 赵中夫韩德五刘明社张国英张芸杨慧杨柳絮
- 关键词：库普弗细胞脂多糖类高迁移率族蛋白B1
- 丙酮酸乙酯对急性肝损伤大鼠血清ALT、TNF-α和HMGB1水平的影响
- 2010年
- 目的:观察丙酮酸乙酯(EP)对急性肝损伤(ALI)大鼠血清ALT、TNF-α和HMGB1水平的影响,探讨EP对ALI的保护作用。方法:雄性Wistar大鼠30只,随机分为三组,每组10只。ALI组:用D-GalN/LPS复制大鼠ALI模型;EP干预组:于D-GalN/LPS注射24 h后,EP 40 mg/kg,2 mL生理盐水稀释腹腔注射;对照组:等量生理盐水腹腔注射。各组动物分别于处理后48 h腹主动脉采血,全自动生化分析仪检测血清ALT含量,ELISA方法检测血清TNF-α含量,Western blot方法检测血清HMGB1含量。结果:EP干预组血清ALT和TNF-α含量虽高于正常对照组,但显著低于ALI组(P<0.01);EP干预组HMGB1含量显著低于对照组和ALI组(P<0.01)。结论:EP可以抑制ALI大鼠血清ALT、TNF-α和HMGB1水平,减轻由炎症因子引起的ALI。
- 明慧香赵中夫乔京贵刘明社杨柳絮李瑞娟
- 关键词：丙酮酸乙酯急性肝损伤HMGB1ALT
- pGenesil-siHBV X对HepG2.2.15细胞HBV表达和复制的抑制效果研究
- 2007年
- 目的研究针对HBVX基因区设计的小干扰RNA(siRNA)表达载体质粒pGenesil-siHBVX对HepG2.2.15细胞HBV表达和复制的抑制效果及特异性。方法针对HBVX区设计siRNA表达载体质粒pGenesil-siHBVX。分别用培养液(空白对照)、脂质体Metafectene、pGenesil空载体、pGenesil-siHK(阴性对照)、pGenesil-siAFP(特异性对照)、pGenesil-siHBVX处理或转染HepG2.2.15细胞各3次。于每次转染后24h,取各组细胞培养上清液,用时间分辨荧光免疫测定技术检测上清液中HBsAg和HBeAg含量,用化学发光法检测AFP含量,用PCR荧光定量技术检测HBV-DNA复制水平。结果pGenesil-siHBVX转染能抑制HepG2.2.15细胞对HBV标志物的表达,且抑制作用随转染次数增加而增强。第3次转染后,pGenesil-siHBVX组细胞上清液中HBsAg、HBeAg和HBV-DNA检测结果分别为(6.26±1.07)ng/ml、(0.13±0.05)Ncu/ml和(3.01±0.40)×107拷贝/ml,与空白对照组的(22.50±1.39)ng/ml、(1.12±0.11)Ncu/ml和(12.33±1.28)×107拷贝/ml比较,差异有统计学意义(t值分别为12.80、12.21、9.71,P<0.05);pGenesil-siHBVX转染不影响细胞对AFP的表达(t=0.18,P=0.86)。结论pGenesil-siHBVX可以有效和特异地抑制HepG2.2.15细胞HBV-DNA的复制及HBsAg和HBeAg表达。
- 杨慧赵中夫张国英张芸刘明社杨柳絮
- 关键词：RNA干扰质粒
- RNA干扰技术在肝病防治中的实验研究
- 赵中夫张国英刘明社杨慧张芸武延隽南海茹建萍杨柳絮邓军辉张定琳郭建红
- RNA干扰（RNA interference，RNAi），是指用短双链RNA（dsRNA）进行转录后的基因沉默技术(post-transcriptional gene silencing PTGS)。从2001到2003...
- 关键词：
- 关键词：AFPHBVRNA干扰肝病
- 核苷类药物抗病毒治疗对HBV感染者血清IFN-γ和IL-2水平的影响及临床意义被引量：3
- 2008年
- 目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)慢性感染者抗病毒治疗后外周血Th1型细胞因子的水平变化及其临床意义。方法:分别在核苷类药物(拉米夫定与阿德福韦)抗病毒治疗前后,分离39例HBV感染者临床血清标本,用双抗体ELISA夹心法分别定量检测血清的IFN-γ和IL-2水平。结果:慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗后血清IFN-γ水平较治疗前明显升高(P<0.05);而IL-2则无明显变化(P>0.05)。慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗后完全应答组的IFN-γ和IL-2的水平均明显高于不完全应答组(P<0.05)。结论:抗病毒治疗可促进慢性乙肝患者的Th1型细胞因子分泌,有利于HBV的清除。
- 卢俊敏马丽娜赵中夫杨柳絮韩红莉常蕴青
- 关键词：TH1IFN-Γ
- ERK1/2信号通路在青蒿琥酯抑制PDGF-BB诱导HSC细胞增殖中的作用被引量：5
- 2011年
- 目的:观察青蒿琥酯(Artesunate,Art)对血小板衍生生长因子-BB(platelet derived growthfactor-BB,PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞(he-patic stellate cell,HSC)增殖,磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(phosphorylated extracellularsignal regulated kinase 1/2,p-ERK1/2)表达的影响,探讨Art抗肝纤维化的分子机制。方法:实验分为对照组、PDGF-BB组、PDGF-BB+Art组和PDGF-BB+PD98059组。以PDGF-BB诱导HSC增殖,再分别加入不同浓度的Art和ERK1/2抑制剂PD98059。CCK-8法检测各组HSC细胞的增殖情况,ELISA法测定细胞上清液中Ⅰ型胶原的含量,免疫印迹(Western blot-ting)法检测各组细胞ERK1/2的表达及活化情况。结果:PDGF-BB可诱导HSC细胞增殖,p-ERK1/2表达增高,而PDGF-BB+Art组、PDGF-BB+PD98059组HSCⅠ型胶原的含量及p-ERK1/2活性均降低。结论:ERK1/2参与了PDGF-BB诱导HSC细胞增殖的作用,Art抗PDGF-BB所诱导的HSC细胞增殖作用与其抑制ERK1/2的活化有关。
- 来丽娜任泽恩杨柳絮张晓一王黎敏范毅敏
- 关键词：青蒿琥酯肝星状细胞血小板衍生生长因子-BB
- 慢性乙型肝炎不同感染谱患者外周血特异性T淋巴细胞功能的研究
- 2010年
- 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)不同感染谱患者外周血人类白细胞抗原(HLA)-A2限制性HBV核心抗原(HBcAg)特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的功能。方法将HBV感染者分为显性感染组、隐性感染组、无症状携带组、健康对照组,用HBcAg18-27V和HBcAg18-27I2条特异性多肽刺激各组外周血单核细胞(PBMC)后,酶联免疫斑点(ELISPOT)检测抗原表位特异性CTL分泌干扰素(IFN)-γ的应答比例和平均反应强度。结果各组对2条多肽的应答比例和平均反应强度差异均无统计学意义(P>0.05);隐性组的应答比例和平均反应强度均明显高于显性组、携带组和对照组(P<0.05);携带组应答比例和平均反应强度与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HBV不同感染谱患者外周血特异性CTL对HBcAgl8-27V/I刺激应答水平有差别,隐性感染者有较高水平特异性CTL应答。
- 李瑞娟赵中夫卢俊敏刘明社明慧香杨柳絮
- 鼠HMGB1蛋白的原核表达及分离纯化被引量：1
- 2007年
- 目的:克隆小鼠HMGB1基因,构建原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并分离纯化获得His-HMGB1的融合蛋白。方法:脂多糖刺激后的RAW264.7细胞,提取总RNA,经RT-PCR扩增出含HMGB1的目的片段,克隆于pMD-19T载体,再亚克隆至含有pelB引导肽及His-标签肽的高效表达载体pET-26b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后行SDS-PAGE鉴定目标蛋白表达,用镍鳌合琼脂糖凝胶亲和层析法分离纯化含His-标签肽的目的蛋白。结果:经PCR扩增出大小为648bp的HMGB1基因片段,成功构建目标蛋白的融合表达载体,经诱导表达及分离纯化,获得了约30kD的融合蛋白。结论:构建HMGB1的融合表达载体,获得分离纯化融合蛋白His-HMGB1,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
- 赵中夫杨慧刘明社张芸杨柳絮封江南
- 关键词：高迁移率族蛋白1原核表达载体纯化
- HMGB1对肝星状细胞细胞外基质合成的影响被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对肝星状细胞(hepatic stellate cell HSC)合成细胞外基质(extracellular matrix ECM)的影响。方法:剂量效应组分别用含HMGB10mg/L,0.1mg/L,1.0mg/L,10mg/L,20mg/L和40mg/L的HMGB1培养液培养HSC-T66h;时间效应组以含有10mg/LHMGB1的培养液培养0h、6h、12h、18h和24h,对照组以不含HMGB1的培养液分别培养HSC-T6细胞,留取各组培养液离心后的上清,用双抗体夹心ELISA方法检测其上清中PⅢP和CⅣ的含量。结果:对照组HSC-T6细胞ECM分泌量较低;HSC-T6的ECM分泌量与HMGB1呈剂量依赖关系(r=0.835,0.955,P<0.05);10mg/LHMGB1时间效应组的PⅢP,CⅣ分泌量在18h和24h均明显高于对照组(P<0.05)。结论:HMGB1能诱导HSC-T6细胞分泌ECM,可能在肝纤维化的发生、发展中发挥重要作用。
- 韩红莉杨柳絮吴红样赵中夫
- 关键词：HMGB1HSC-T6细胞外基质肝纤维化
