梁铭霖
- 作品数：15 被引量：75H指数：6
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省卫生厅科研基金黑龙江省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 卵巢癌的筛查和早期诊断被引量：14
- 2012年
- 卵巢癌是目前妇科肿瘤中病死率最高的恶性肿瘤,若能做到早期诊断,则将大大提高其5年生存率。而在世界范围内仍然缺乏有效的筛查手段,妇科检查、经阴道超声检查和血清学CA125的联合检查可以起到一定的判别作用。蛋白质组学技术以及新的肿瘤标志物,可能为未来卵巢癌的筛查提供更为敏感的方法。
- 梁铭霖王泽华
- 关键词：卵巢癌经阴道超声检查
- 小分子干扰RNA对卵巢癌紫杉醇耐药株的多药耐药性逆转的研究被引量：6
- 2007年
- 目的探讨小分子干扰RNA(smallinterferingRNAs,siRNA)对A2780/Taxol细胞多药耐药性的逆转作用。方法2005-07-2005-12华中科技大学同济医学院附属协和医院根据多药耐药基因1(MDR1)序列设计2条siRNA,将siRNA包装入质粒,经转化、克隆、扩增、纯化,与pEGFPN-1质粒一起共转染A2780/Taxol细胞,流式细胞仪、MTT、RT-PCR和Westernblot分别检测转染效率、紫杉醇的半数抑制浓度(IC50)、细胞P-gp蛋白及MDR1mRNA表达。结果两种重组质粒与EGFP质粒转染效率无明显差异,P-gp表达水平明显下调。两条siR-NA对紫杉醇敏感性的相对逆转率分别达63·8%及51·2%。MDR1基因不同程度的沉默,MDR-A能更有效封闭MDR1基因,MDR1mRNA相对水平下降(67·3±0·8)%。结论siRNA能有效逆转MDR1基因编码P-gp介导的A2780/Taxol细胞多药耐药。
- 肖兰卢实高瑞梁铭霖刘福安王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤小分子干扰RNAMDR1基因多药耐药
- 血小板源性生长因子对体外培养子宫肌瘤细胞增殖的影响被引量：9
- 2005年
- 目的: 研究血小板源性生长因子 (Platete-DerivedGrowthFactor, PDGF) 对体外培养的子宫肌瘤细胞和子宫平滑肌细胞增殖性核抗原 (PCNA) 和细胞内前胶原α1多肽的表达的影响。方法: 用基因重组人PDGF-AB (10ng/ml) 作用体外培养的子宫肌瘤细胞, 以邻近正常子宫肌层细胞作对照, 用RT-PCR法从mRNA水平检测在有无PDGF-AB作用下, PCNA、前胶原α1多肽 (Ⅰ、Ⅲ) 表达的差异; 用免疫组化SABC法从蛋白水平显示PDGF对PCNA表达的影响。结果: 两种细胞受PDGF-AB刺激后, PCNA、collagenα1 (Ⅰ) 表达均有增加, 但两者在肌瘤细胞中表达的增加显著高于子宫平滑肌细胞 (P<0. 01); 而collagenα1 (Ⅲ) 在子宫肌瘤细胞和子宫平滑肌细胞中的变化无显著性差异。结论: PDGF在体外可同时促进子宫肌瘤细胞增殖和细胞外基质分泌的增加, 从而使肌瘤组织不断增长。
- 汪宏波梁铭霖王泽华
- CXCR4及其配体SDF-1在宫颈癌转移中的作用及其机制研究被引量：20
- 2008年
- 背景与目的:趋化因子CXCR4[chemokine(C-X-C)receptor 4]受体及其配体基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)可能与某些恶性肿瘤的迁移、侵袭和转移有关。本研究拟探讨CXCR4受体及其配体SDF-1(CXCR4/SDF-1轴)通过激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases,MAPK)信号通路在宫颈癌转移中的作用及其机制。方法:采用激光共聚焦显微镜检测宫颈癌HeLa细胞内钙离子波动,Western blot法分析CXCR4/SDF-1对宫颈癌HeLa细胞中细胞外调节信号激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)(包括ERK1和ERK2)磷酸化的影响;分别通过粘附实验、明胶酶谱法检测CXCR4/SDF-1对宫颈癌细胞粘附能力、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)分泌的影响。结果:SDF-1α与CXCR4相互结合后诱导了HeLa细胞胞内钙的迅速动员,其荧光强度(fluorescent intensity,FI)平均基础值与峰值差异有统计学意义(P<0.01);诱导了HeLa细胞ERK1/2快速磷酸化,作用后30min时磷酸化程度最强;增加了HeLa细胞粘附能力,不同浓度的SDF-1α与CXCR4结合后不同程度地增加了HeLa细胞粘附于纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、层粘连蛋白(laminin,LN)的粘附细胞数,与对照组比较其差异均有统计学意义(P<0.05);加入ERK1/2信号通路抑制剂PD98059后,粘附于FN和LN的细胞数下降,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);促进宫颈癌HeLa细胞分泌活性的MMP-2,这一作用随SDF-1α浓度升高而增强,SDF-1α在800ng/mL浓度处分泌达高峰,以后开始下降。结论:CXCR4/SDF-1通过激活MAPK通路调控宫颈癌细胞的粘附能力,促进活性MMP-2分泌,进而参与宫颈癌侵袭和转移。
- 沈晓燕王绍海梁铭霖汪宏波肖兰王泽华
- 关键词：CXCR4SDF-1宫颈肿瘤HELA细胞
- 潜伏活性的人可溶性TNFⅠ型受体融合蛋白真核表达载体的构建及表达
- 2007年
- 目的:采用基因工程技术,将转化生长因子β前体相关蛋白(LAP)通过基质金属蛋白酶(MMP)水解部位与人可溶性TNFⅠ型受体(hsTNFRⅠ)连接,构建pcDNA3.1/LAP-MMP-hsTNFRⅠ融合蛋白真核表达载体,获得LAP-MMP-hsTNFRⅠ融合蛋白。方法:将编码MMP水解部位氨基酸的正反义DNA序列退火形成互补双链后定向克隆插入真核表达载体pcDNA3.1(+),得到pcDNA3.1/MMP重组体;将TGF-β1的LAP段和hsTNFRⅠ与MMP水解部位连接,获得pcDNA3.1/LAP-MMP-hsTNFRⅠ真核表达载体。测序鉴定后,脂质体介导重组质粒转染COS-7细胞,通过RT-PCR检测融合基因的表达。结果:酶切及测序结果证实pcDNA3.1/LAP-MMP-hsTNFRⅠ重组载体构建成功,转染后RT-PCR结果表明重组质粒在COS-7细胞中得到有效表达。结论:成功构建了融合蛋白真核表达载体pcDNA3.1/LAP-MMP-hsTNFRⅠ,并获得融合基因的瞬时表达,为进一步研究融合蛋白在子宫内膜异位症中的靶向治疗奠定了实验基础。
- 胡沙熊宙芳梁铭霖黄勇王泽华
- 关键词：基质金属蛋白酶融合蛋白
- 血小板源性生长因子与子宫肌瘤细胞增殖相关性研究
- 目的检测子宫肌瘤患者血小板源性生长因子(Platelet-Derived Growth Factor,PDGF)及其受体PDGFR-α和PDGFR-β在肌瘤组织及其病变周围正常平滑肌组织中的表达,比较在月经周期不同时期它...
- 梁铭霖
- 关键词：子宫平滑肌瘤
- 文献传递
- 卵巢癌耐药细胞株的P38 MAPK活性与凋亡关系的研究被引量：6
- 2007年
- 目的研究卵巢癌细胞耐药过程中P38 MAPK活性与凋亡的关系,探讨P38 MAPK信号转导途径在卵巢癌细胞耐药中的作用。方法流式细胞技术分析P38 MAPK特异性抑制剂SB203580对A2780/Taxol细胞凋亡的影响;利用免疫细胞化学法观察SB203580处理后细胞内P38 MAPK表达水平。四甲基偶氮唑蓝检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC50),Western blot检测细胞内P-gp蛋白表达。结果与未干预组和对照组比较,SB203580(10μmol/L)干预24h后A2780/Taxol细胞凋亡率为23.7%(P<0.01);A2780/Taxol细胞的P38 MAPK表达颗粒密度减低,数量减少;紫杉醇对A2780/Taxol细胞的IC50显著降低(P<0.01);P-gp蛋白表达水平明显降低。结论P38 MAPK信号转导途径与卵巢癌耐药密切相关,可能参与卵巢癌耐药的形成。其可能机制为P38 MAPK通路起到保护A2780/Taxol细胞逃避凋亡的作用。因此,阻断该通路可增强卵巢癌耐药细胞发生凋亡。
- 卢美松邓锁肖兰梁铭霖王泽华
- 关键词：卵巢癌耐药细胞凋亡P38MAPK通路多药耐药
- CXCR4及其配体SDF-1α在卵巢癌SKOV3细胞黏附和侵袭中的作用被引量：7
- 2009年
- 目的:探讨趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)与其配体基质细胞衍生因子-1α(stromal derived factor-1α,SDF-1α)通过激活丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路在卵巢癌黏附和侵袭中的作用及其机制。方法:采用激光共聚焦显微镜观察SDF-1α处理前、后卵巢癌SKOV3细胞中钙离子的波动;Western印迹法检测SDF-1α对SKOV3细胞中细胞外调节信号激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)-1和-2磷酸化的影响;通过黏附实验、明胶酶谱法检测SDF-1α/CXCR4对卵巢癌细胞黏附能力以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-2和MMP-9活性的调控。结果:SDF-1α诱导卵巢癌细胞内钙的迅速动员及ERK1和ERK2的快速磷酸化;增加卵巢癌细胞黏附于纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和Ⅳ型胶原的能力;加入ERK1/2信号通路的抑制剂PD98059后,可降低SDF-1α促进卵巢癌细胞黏附于细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的能力;同时SDF-1α可促进卵巢癌细胞分泌活性MMP-2和MMP-9。结论:SDF-1α/CXCR4通过激活MAPK信号通路调控卵巢癌细胞的黏附能力,促进活性MMP-2和MMP-9的分泌,进而参与卵巢癌的侵袭和转移。
- 沈晓燕王绍海汪宏波梁铭霖许静王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤CXCR4配体
- Aurora B在子宫内膜和子宫内膜癌组织中的表达及其意义被引量：9
- 2009年
- 目的:探讨Aurora B在正常子宫内膜和子宫内膜癌组织中的表达及其与子宫内膜癌临床病理参数之间的关系。方法:采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(streptavidin-biotin peroxidase,SP)法对10例正常增殖期子宫内膜组织、10例正常分泌期子宫内膜组织和72例子宫内膜癌组织Aurora B的表达情况进行了检测,分析其在正常子宫内膜组织中的表达规律及其与子宫内膜癌临床病理特征的关系。结果:Aurora B表达的阳性指数在正常增殖期子宫内膜组织中明显高于分泌期子宫内膜组织,差异有极显著性意义(P<0.01);增殖期的表达也高于子宫内膜癌组织的表达,差异有极显著性意义(P<0.01);Aurora B表达阳性指数在高分化、低手术分期和肌层浸润深度≤1/2的子宫内膜癌组织中低于中、低分化、高手术分期和子宫肌层浸润深度>1/2的子宫内膜癌组织,差异有显著性意义(P<0.01、P<0.01、P<0.05,respectively)。结论:Aurora B参与正常增殖期子宫内膜腺体上皮细胞的增生和复制;Aurora B在子宫内膜癌组织中的表达与其生物学行为有关,Aurora B的表达升高提示子宫内膜癌的恶性生物学行为增加。
- 任利容郭建峰肖兰梁铭霖王泽华
- 关键词：子宫内膜子宫内膜癌AURORA免疫组织化学
- MDR1及MDR3基因沉默逆转卵巢上皮性癌细胞对紫杉醇耐药的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的研究多药耐药基因——MDR1及 MDR3基因沉默逆转卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞 A2780/taxol 对紫杉醇耐药的作用。方法用真核质粒介导的针对 MDR1及 MDR3基因的短发夹状 RNA(shRNA)转染 A2780/taxol 细胞(分别为 MDR1组、MDR3组),空质粒转染作为对照(空载体组)。流式细胞仪分别检测细胞早期凋亡、罗丹明123(Rh123)积聚情况,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)检测细胞晚期凋亡情况,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞对紫杉醇的半数抑制浓度(IC_(50)),RT-PCR 技术检测 MDR1及 MDR3 mRNA 的表达,蛋白印迹法(western blot)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达。结果转染后,MDR1组及MDR3组 A2780/taxol 细胞的早期凋亡率分别达(20.21±0.56)%和(10.87±1.24)%。MDR1、MDR3组 A2780/taxol 细胞内的 Rh123平均荧光强度分别为116.6±8.1、98.4±3.8,显著高于空载体组的40.2±1.6,差异有统计学意义(P<0.05)。TUNEL 检测显示细胞发生了晚期凋亡。MDR1、MDR3组A2780/taxol 细胞对紫杉醇的 IC_(50)明显下降,分别与空载体组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。转染48 h 后,A2780/taxol 细胞中 MDR1和 MDR3 mRNA 的表达水平分别下降了(73.3±0.8)%和(51.6±0.4)%;MDR1、MDR3组细胞 caspase-3的表达量分别为(80.8±2.6)%、(72.0±4.7)%,均较空载体组增加。结论 MDR1及 MDR3基因沉默能恢复 A2780/taxol 细胞对紫杉醇的敏感性并诱导细胞凋亡,从而逆转 A2780/taxol 细胞对紫杉醇的耐药性。
- 肖兰高瑞卢实卢美松梁铭霖任利容王泽华
- 关键词：卵巢肿瘤紫杉酚
