毕薇薇
- 作品数：17 被引量：67H指数：4
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- 脑出血并发高钠血症的临床分析
- 2006年
- 目的:研究脑出血急性期高钠血症发生的特点、原因及临床意义。方法:对我院神经科住院救治的202例脑出血患者的临床资料进行回顾分析。结果:出现高钠血症29例,占14.3%。结论:大剂量脱水剂治疗与下丘脑损害是引起高钠血症的主要原因,高钠血症可作为判断病情和估计预后的重要依据。
- 李志刚毕薇薇杨贤瑞
- 关键词：脑出血高钠血症
- 人羊膜间充质干细胞体外大量扩增的方法被引量：1
- 2013年
- 背景:一个胎盘羊膜的面积约600 cm2,羊膜来源间充质干细胞即取材于胎盘上的羊膜。目的:建立一种简单的体外分离培养人羊膜来源间充质干细胞的方法,并分析其生物学特性。方法:采用胰酶和直接贴壁相结合的方法分离获取人羊膜来源间充质干细胞并进行体外培养,观察细胞形态,分析传代第5代细胞生长曲线,检测第5代细胞表面标志表达和检测细胞周期。取传代第4代细胞行体外成骨细胞诱导和成脂诱导,冻存第4代细胞6个月后复苏,计数复苏后细胞存活率并绘制复苏细胞生长曲线。结果与结论:原代接种后第9天有少许细胞爬出,15 d左右细胞达80%-90%融合,细胞以梭形为主。细胞传代后,细胞形态均一,螺旋状排列。传代细胞潜伏期48 h,对数增殖期4 d左右,对数增殖期后进入平台期。间充质干细胞表面CD34、CD14、CD19、CD45、HLA-DR呈阴性表达,CD73、CD105、CD90呈阳性表达。茜素红染色及油红O染色阳性,证实具有向脂肪细胞、成骨细胞分化的能力。流式细胞术细胞周期检测,S期占28%。冻存复苏后细胞存活率达90%以上,且与未冻存传代细胞具有相同的生长特性。结果证实实验成功地建立了一种简化的人羊膜来源间充质干细胞大量扩增的方法。
- 毕薇薇何丽嵘李超聂德志
- 关键词：干细胞人羊膜间充质干细胞羊膜间充质干细胞成骨诱导
- 人胎儿肝脏间充质干细胞的体外培养及生物学特性研究被引量：3
- 2010年
- 目的建立一种在体外分离、培养人胎儿肝脏来源的间充质干细胞(MSC)的方法,并研究其生物学特性。方法采用双酶消化法分离获取人胎儿肝脏MSC并进行体外培养,待细胞达80%以上融合时传代,各传代细胞依次记为P1～P10代细胞,并于倒置相差显微镜下观察细胞形态。取P3、P7、P10代细胞,连续培养7d,观察分析细胞生长曲线。取P5代细胞,采用流式细胞仪检测MSC表面CD34、CD44、CD105、CD13、HLA-ABC、HLA-DR等抗原标志的表达。取P4代细胞,进行体外成骨细胞诱导培养后,采用碱性磷酸酶染色鉴定。冻存传代细胞,分别于2、6个月后复苏细胞,台盼蓝染色计数复苏后细胞存活率。结果原代细胞3d贴壁,6d后开始快速增长并形成集落,11d左右达80%～90%融合,多呈纤维样;传代培养后细胞维持纤维样形态。传代细胞生长曲线具有共同特征:潜伏期约24～48h,对数增殖期约3～4d,对数增殖期后第5～6天进入平台期。流式细胞仪检测显示,MSC表面CD34、HLA-DR呈阴性表达,CD44、CD105、CD13呈阳性表达,HLA-ABC呈弱阳性表达。碱性磷酸酶染色显示,诱导后细胞的细胞核染成均一的淡蓝色。冻存复苏后细胞存活率达90%以上,且与未冻存传代细胞相比具有相同的生长特性。结论本研究成功地从人胎儿肝脏培养出MSC,为MSC应用于科学研究和临床治疗提供了新的细胞来源。
- 毕薇薇黄若洋刘洋
- 关键词：间质干细胞
- 人脐带源间充质干细胞体内外移植的免疫学特征被引量：3
- 2011年
- 背景:部分体外实验证实人脐带源间充质干细胞具有同种异体的免疫耐受特性,然而对其体内研究尚处于异种异体之间,且结果及机制缺少统一性。目的:培养人脐带源间充质干细胞,通过体内外试验分析其移植免疫学特性。方法:应用组织块贴壁法提取人脐带源间充质干细胞,通过体外淋巴细胞混合反应检测其同种异体免疫耐受作用;应用流式细胞仪检测体内行人脐带源间充质干细胞移植前后患者血液中CD4、CD8浓度及比值变化,并通过ELISA方法对比体外淋巴细胞混合培养前后血液、培养上清及体内移植前后患者血液中白细胞介素2,10、γ-干扰素的浓度变化。结果与结论:体内外实验中,混合淋巴细胞反应前后血浆及细胞上清中的细胞因子浓度变化呈相似趋势:白细胞介素10较反应前上升(P<0.05),γ-干扰素较反应前下降(P<0.05)。人脐带源间充质干细胞移植后患者T细胞亚群中CD4+/CD8+比值较移植前轻度下降。说明人脐带源间充质干细胞具有同种异体免疫耐受及免疫调节作用。
- 野向阳徐岩毕薇薇郭立斌李相军刘建国
- 关键词：同种异体免疫耐受免疫调节细胞移植
- 成人骨髓间充质干细胞的体外培养及生物学特性被引量：9
- 2007年
- 目的:观察成人骨髓间充质干细胞体外分离培养方法及其生物学特性,为骨髓间充质干细胞的临床应用奠定技术基础。方法:实验于2005-12在吉林省四平市中心医院中心实验室进行。实验材料:人骨髓间充质干细胞,Ficoll淋巴细胞分离液,胎牛血清,牛血清白蛋白,α-MEM培养基,胰蛋白酶,FITC标记的CD44和CD90。实验方法:①人骨髓间充质干细胞的分离与培养:采集成人骨髓,密度梯度法分离单个核细胞,条件培养基培养和扩增,倒置光学显微镜下观察细胞形态及生长情况。②人骨髓间充质干细胞生长曲线的测定:取生长良好的P1,P5,P10细胞,用胰酶消化,接种于24孔板培养,每天各取3孔消化计数细胞,取平均值,连续培养7d,绘制生长曲线。③人骨髓间充质干细胞表面标志的测定:取生长良好P5细胞进行免疫荧光染色鉴定(CD44,CD90并设同型对照)。④人骨髓间充质干细胞的冻存及复苏:收集生长良好细胞,计数细胞密度及冻前存活率。将细胞加入到细胞冻存液中液氮冷冻保存。30d后复苏细胞,每日倒置光学显微镜下观察细胞生长状况。结果:①倒置显微镜下观察细胞形态:倒置显微镜下观察细胞呈纤维形,漩涡状生长。②人骨髓间充质干细胞的生长曲线分析:传代的细胞生长较原代要快,从第10代开始细胞生长开始出现缓慢征象。③细胞表面标记检测结果:免疫荧光染色后细胞膜着色明显,CD44,CD90阳性率均大于90%。④细胞冻存及复苏生长特性分析:椎虫蓝计数细胞存活率90%以上,增殖能力强,和未冻存过的传代细胞具有同样的生长特性。结论:应用密度梯度法分离法能获得较高纯度的骨髓间充质干细胞,能在体外长期培养,在传代培养5代内生长旺盛且生物学特性稳定。
- 毕薇薇郭巍赵春明郭立斌李志刚
- 关键词：人骨髓间充质干细胞生物学特性
- 人脐带间充质干细胞体外成骨及其免疫学特征被引量：23
- 2009年
- 背景:目前关于脐带源性干细胞的研究主要是针对其多向分化、组织修复方面,而对脐带干细胞的同种异体之间移植免疫学的报道较少。目的:观察体外培养的人脐带间充质干细胞生物学特性、成骨分化潜能及移植免疫学特征。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2008-11在吉林大学药学院病理学实验室完成。材料:脐带来源于健康产妇足月剖腹产的胎儿,靠近胎儿侧5cm,均征得孕妇同意。方法:应用组织块贴壁法分离培养脐带间充质干细胞,胰酶消化传代。取传至第5代细胞,加入含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的α-MEM完全培养基进行成骨诱导。另取传至第5代细胞,分别进行正常培养及应用γ-干扰素刺激48h。主要观察指标:脐带间充质干细胞形态观察、生长曲线分析、免疫表型分析。碱性磷酸酶染色观察细胞成骨分化情况。流式细胞仪检测γ-干扰素刺激后细胞免疫表型变化。结果:培养7d倒置显微镜下可见组织块边缘出现呈长梭形、多角形或三角形的贴壁细胞,且随时间延长组织块周围细胞数量逐渐增多。第2,5,9代细胞之间的生长曲线无明显变化,培养20代内未见细胞衰老及增殖速度减慢等现象发生。第2代贴壁细胞CD44,CD105均呈阳性表达,CD34,CD45均呈阴性表达。成骨诱导14d后,碱性磷酸酶染色可见胞核染成均一的淡蓝色。第5代脐带间充质干细胞HLA-ABC呈弱阳性(40.50%),HLA-DR,CD80,CD86呈阴性表达;γ-干扰素刺激48h后,HLA-ABC阳性率增加至87.44%,HLA-DR,CD80,CD86仍呈阴性表达。结论:人脐带间充质干细胞体外诱导成骨能力确切,具有类似骨髓间充质干细胞的特异性表面标记,且具有同种异体移植的低免疫原性。
- 野向阳李相军徐岩毕薇薇刘建国
- 关键词：脐带间充质干细胞成骨生物特性免疫学
- 肿瘤患者尿液多胺检测结果分析被引量：1
- 2006年
- 李志刚毕薇薇杨贤瑞
- 关键词：肿瘤患者尿液多胺肿瘤早期诊断恶性肿瘤肿瘤标志
- 实时荧光定量PCR的应用体会被引量：1
- 2007年
- 毕薇薇郭巍崔玉风崔诗晗
- 关键词：实时荧光定量PCR荧光定量PCR技术PCR反应体系实时监测污染问题
- 富含半胱氨酸的分泌型酸性蛋白与肿瘤的关系被引量：5
- 2005年
- 富含半胱氨酸的分泌型酸性蛋白(SPARC)是一种调节细胞外基质的糖蛋白,与某些基质成分、生长因子和细胞因子作用,参与组织重建、形态生成、细胞迁移和增殖,调节机体的生理和病理过程。现就其分子结构、生物学功能、相应机制、表达调节及与肿瘤的发生、发展、侵袭和转移的关系等作一简述。
- 毕薇薇车轶群李振家
- 关键词：半胱氨酸肿瘤糖蛋白病理机制细胞迁移
- 脐带源间充质干细胞治疗脑出血后遗症的临床观察被引量：3
- 2011年
- 目的观察脐带源间充质干细胞移植对脑出血后遗症的治疗效果。方法对脑出血患者在术中血肿腔内预留置硅胶导管,1个月后自此将干细胞移植到出血部位;对于丘脑出血破入脑室的患者则脑室直接穿刺的方法做干细胞脑室内移植。观察语言、肌力、肌张力、意识的改善程度。结果经干细胞移植术后,患者肌张力均有所下降,肌力提高1～2级,语言功能有所改善。结论脐带源间充质干细胞移植对脑出血后遗症有治疗效果。
- 李志刚毕薇薇杨贤瑞
- 关键词：脐带源间充质干细胞脑出血后遗症
