王三虎
- 作品数：7 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南华大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省研究生科研创新项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 智力低下相关蛋白(FXR1P)与CMAS相互作用的生物学效应研究(英文)被引量：2
- 2013年
- 脆性X综合征(FXS)是一种遗传性智力低下疾病,其发病率仅次于21三体综合征.脆性X智力低下蛋白(FMRP)是FXS的关键性致病因子,该蛋白由脆性X智力低下基因1(FMR1)编码所得.FMR1在神经肌肉和睾丸组织中广泛表达.脆性X相关蛋白1(FXR1P)则是由FMR1的同源基因脆性X相关基因1(FXR1)编码所得,并且与蛋白质和RNAs之间存在着相互作用.许多疾病都涉及到FXR1表达的改变.为了了解FXR1P与CMAS(胞嘧啶单核苷酸-N-乙酰神经氨酸合成酶)相互作用所产生的的生物学效应,我们构建了FXR1的过表达载体,并观察其在PC12细胞(大鼠鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞)和VSMC(血管平滑肌细胞)中的表达以及继而对于细胞形态和CMAS活性相关的许多细胞指标的效应.我们证实,FXR1基因的过表达可以提高PC12细胞中CMAS的活性,并对于该类细胞的生长提供一定程度的保护作用.PC12细胞是一种较为常见的用于研究神经系统疾病的细胞系.结论:我们推测FXR1P是一个组织特异调节因子,可以改变PC12细胞而非VSMC细胞中神经节苷酯(GM1)的浓度.
- 马云秦凌雪董晓李斌元王昌博许璨王三虎何淑雅
- 关键词：GM1生物学效应PC12细胞VSMC
- 脆性X相关蛋白1的靶标鉴定及其对IQCE翻译的影响
- 脆性X综合征(Fragile X syndrome, FXS)是世界范围内最常见的遗传性智力低下疾病之一。99％的患者是由于FMRP（Fragile X mental retardation protein，脆性 X智力...
- 王三虎
- 关键词：脆性X综合征
- 文献传递
- 智力低下相关蛋白FXR1P与CMAS相互作用区域的鉴定
- 本文通过构建不同的FXR1P选择剪接异构体诱饵载体，进行其与本实验室经酵母双杂交、Co-IP和细胞内蛋白共定位技术证实与FXR1P有相互作用的蛋白质CMAS(胞嘧啶单核苷酸N-乙酰神经氨酸合成酶)间的相互作用区域研究，鉴...
- 符向辉何淑雅董晓李斌元王三虎秦凌雪陈小卫马云
- 关键词：脆性X综合征酵母双杂交发病机制
- 文献传递
- FTH1真核表达载体的构建与鉴定
- 2011年
- 目的构建携带人铁蛋白重链多肽1(FTH1)基因的真核表达载体pCMV-Myc-FTH1,为研究FXR1P与FTH1体内相互作用奠定基础。方法以人胎脑cDNA文库为模板进行聚合酶链反应(PCR)特异扩增FTH1基因片段,将扩增片段经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切后克隆到同样经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切的pCMV-Myc载体,酶切鉴定阳性克隆并进一步测序鉴定。结果成功构建了pCMV-Myc-FTH1重组真核表达载体。结论 pCMV-Myc-FT1重组真核表达载体的构建为进一步在细胞内鉴定FXR1P与FTH1相互作用奠定了基础,对研究FXR1在脆性X综合征中的作用机理提供了依据。
- 董晓何淑雅李斌元王三虎自映萍马云
- 关键词：脆性X综合征真核表达载体
- 分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP—IQCE3’UTR的构建
- 2012年
- 目的构建分泌型碱性磷酸酶（secretedalkalinephosphatasereportergene。SEAP）报告基因重组载体pSEAP—IQCE3’UTR，为鉴定FXR1P是否是通过与IQCE的3’UTR发生相互作用，进一步探索FXR1P的功能奠定基础。方法首先设计目的基因片段IQCE3’UTR的PCR引物，然后通过RT—PCR扩增加CE基因3’UTR基因片段，酶切扩增的片段和报告基因空载体，并将空载体去磷酸化，去磷酸化后的空载体与目的基因片段进行连接反应，将连接产物转化人大肠埃希菌JM109，最后筛选阳性克隆，PCR鉴定插入序列的正反。结果构建了分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP—IQCE3’UTR，经酶切鉴定、正反鉴定和测序分析可知重组载体构建成功。结论成功构建了分泌型碱性磷酸酶报告基因重组载体pSEAP—IQCE3’UTR，为进一步探索FXR1P的功能及其在脆性X综合征中的发病机理有着重要的意义。
- 王三虎马云秦凌雪何彬彬李斌元苏泽红何淑雅
- 关键词：SEAP脆性X综合征
- 智力低下相关蛋白FXR1P与CMAS相互作用区域的鉴定
- 目的FXR1P是一种对于神经和肌肉系统发育有重要调控作用的蛋白,FXR1是脆性X致病相关基因家族成员,通过构建不同的FXR1P选择剪接异构体诱饵载体,进行其与本实验室经酵母双杂交、Co-IP和细胞内蛋白共定位技术证实与F...
- 符向辉何淑雅董晓李斌元王三虎秦凌雪陈小卫马云
- 关键词：脆性X综合征酵母双杂交
- 文献传递
- 耐辐射奇球菌未知功能基因DR_2566的克隆与生物信息学分析
- 2013年
- 克隆与辐射抗性相关但功能未知的新基因DR_2566,并应用生物信息学初步探讨其功能。应用PCR技术从耐辐射奇球菌基因组中扩增DR_2566基因全长ORF,选用pGEM-T载体进行TA克隆,通过限制性酶切及测序进行鉴定。应用生物信息学初步分析其染色体定位、蛋白序列、结构域及功能。成功克隆了耐辐射球菌未知功能基因DR_2566,生物信息学分析显示此基因全长为507 bp,编码168个氨基酸,其编码蛋白的理论分子量为19.136KDa,三级结构预测显示DR_2566蛋白质具有短修复内切酶性质。成功克隆了耐辐射奇球菌基因DR_2566全长ORF,生物信息学预测DR_2566蛋白可能具有错配修复作用。
- 何彬彬李斌元马云杨杰王三虎苏泽红唐艳何淑雅
- 关键词：耐辐射球菌基因克隆生物信息学
