王琳
- 作品数：15 被引量：24H指数：1
- 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技重大专项国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程农业科学理学更多>>
- 圣路易斯脑炎病毒样颗粒的真核表达、纯化与鉴定
- 2011年
- 目的 利用293T细胞表达、纯化圣路易斯脑炎病毒样颗粒（Virus like particles,VLPs）,为研制圣路易斯脑炎病毒免疫诊断试剂奠定基础.方法 构建含圣路易斯脑炎病毒PrM和E基因的重组质粒pcDNA5/FRT-SJME,瞬时转染293T细胞,表达并纯化重组蛋白,通过透射电镜、间接免疫荧光试验、Western-Blot和ELISA对其进行鉴定.结果 表达的重组蛋白形成50 nm的球型颗粒,能与抗圣路易斯脑炎病毒抗体产生特异性反应,与部分黄病毒属阳性血清发生交叉反应.结论 已成功在哺乳动物细胞中表达并纯化了圣路易斯脑炎病毒样颗粒,其具有良好的抗原性和完整的颗粒形态,为进一步研制圣路易斯脑炎病毒感染的免疫诊断试剂奠定了基础.
- 郭雪刑福彬咸庆杰王琳杨鹏飞张丽萍平芮巾胡孔新
- 关键词：脑炎病毒荧光抗体技术酶联免疫吸附测定
- 人本管理思想在组织管理中的应用与实践
- 李怀林徐鉴林相宁王琳马钰崔征曾婷婷方舒正江丽
- 中国检验检疫科学研究院(简称中国检科院)是经国务院批准组建的公益性检验检疫中央科研单位，其历史可追溯到1954年。2008年以来，该院在以人本思想为核心的一系列内部管理机制改革实践的推动下，在科研创新能力、应对重大突发性...
- 关键词：
- 关键词：人本管理思想人力资源管理机制
- 应用DPO引物技术同时检测5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法被引量：20
- 2012年
- 目的应用双启动寡核苷酸引物(Dual Priming Oligonucleotide,DPO)技术建立同时检测日本脑炎病毒(JapaneseEncephalitisVirus,JEV)、黄热病毒(YellowFeverVirus,YFV)、西尼罗病毒(WestNileVirus,WNV)、圣路易斯脑炎病毒(St.Louis encephalitis virus,SLEV)和登革病毒(Dengue virus,DV)5种蚊媒病毒的多重RT-PCR方法。方法利用Primer Premier5.0软件设计5种病毒的特异性DPO引物,对引物浓度、Mg2+浓度和退火温度进行优化,测定多重RT-PCR反应的特异性和敏感性。结果应用DPO引物技术建立的多重RT-PCR方法可特异性扩增JEV、YFV、WNV、SLEV和DV的142 bp、293 bp、377 bp、630 bp和521 bp基因片段,灵敏度分别为5 000 PFU/ml、4 500 PFU/ml、2.3×105copies/μl、2.6×104copies/μl和1.37×104copies/μl,蚊虫模拟添加实验未发生非特异反应。结论应用DPO引物技术建立的针对5种蚊媒病毒的多重RT-PCR检测方法有良好的敏感性和特异性,可以同时对JEV、YFV、WNV、SLEV和DV进行检测。
- 徐焕洲平芮巾季汝武王琳杨鹏飞张丽萍岳启安胡孔新
- 关键词：多重RT-PCR日本脑炎病毒黄热病毒西尼罗病毒
- 一种基于RAA-CRISPR/Cas12a技术的快速检测桃成分试剂盒
- 本发明提供了一种基于RAA‑CRISPR/Cas12a技术快速检测桃成分的试剂盒及检测方法，所述试剂盒包括用于特异性检测桃成分的crRNA引物和RAA引物、Cas12a蛋白、荧光报告基因标记的FQ‑ssDNA以及NEBu...
- 陈颖邢冉冉王琳张九凯邓婷婷于宁
- 哺乳动物细胞西尼罗病毒样颗粒表达、纯化及其鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒(WNV)prM和E蛋白,形成病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株,构建重组质粒,转染293T细胞,表达并纯化西尼罗病毒prM-E蛋白,利用透射电镜、免疫印迹试验、间接免疫荧光实验(IFA)和酶链免疫吸附试验(ELISA)对表达产物进行鉴定。结果重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒(viruslike particles VLPs),转染细胞上清纯化物中透射电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒,免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明,表达的病毒样颗粒蛋白能够与抗西尼罗病毒抗体特异结合,具有良好的抗原性;间接ELISA证实,重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体。结论在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性,为西尼罗病毒感染快速特异诊断试剂研制奠定了基础。
- 咸庆杰姜宝芹郭雪王琳杨鹏飞张丽萍平芮巾岳启安胡孔新
- 关键词：西尼罗病毒293T细胞病毒样颗粒间接免疫荧光试验
- 鲜榨果汁基因组DNA快速提取方法的建立及优化被引量：1
- 2023年
- 目的建立及优化鲜榨果汁基因组DNA快速提取方法。方法本研究比较了植物DNA快速提取试剂盒法、棉签法、纤维素膜片法和滤纸片法4种方法提取15种鲜榨果汁基因组DNA的效果,并筛选不同的提取液和裂解液、优化裂解液中的盐酸胍浓度和果汁基因组提取时间。结果滤纸片法采用DNA裂解液(6 mol/L盐酸胍、1%聚乙烯吡咯烷酮、50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、20 mmol/L乙二胺四乙酸、21.3 mmol/L曲拉通-X-100;pH 6.4)、DNA漂洗液3(8 mol/L盐酸胍、50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐;pH 6.4)和DNA漂洗液4(10 mmol/L三羟甲基氨基甲烷盐酸盐、100 mmol/L氯化钠;pH 8.0)即可在5 min内从鲜榨果汁中提取得到适用于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的基因组DNA。结论本研究建立的滤纸片法不需要离心机等昂贵的仪器设备、操作简单、无刺激性气味、无环境条件限制,具有快速、价廉、环保等优点,为果汁基因组DNA快速提取与现场鉴定研究提供了参考。
- 王琳王琳邓婷婷邓婷婷王旭王旭
- 关键词：鲜榨果汁基因组DNA快速提取方法
- 一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽
- 本发明公开了一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽，该合成多肽的序列为：CVKNGTYDYPQYSEEARLNREEIS。本发明多肽合成过程简单快速，而且所得到的多肽偶联抗原就有较广泛的保护作用。对于亚单位疫苗的研制，...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 文献传递
- 一种用于特异性检测新型H1N1流感病毒的合成多肽
- 本发明公开了一种用于快速检测新型H1N1流感病毒的特异性合成多肽，其序列为：CKYVKSTKLRLATGLRNVPS。本发明特异性合成多肽具有抗原制备简单，不存在生物安全问题，且比天然微生物或寄生虫蛋白抗原的特异性强，检...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 文献传递
- 一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽
- 本发明公开了一种用于流感病毒亚单位疫苗研究的合成多肽，该合成多肽的序列为：CVKNGTYDYPQYS EEARLNREEIS。本发明多肽合成过程简单快速，而且所得到的多肽偶联抗原有较广泛的保护作用。对于亚单位疫苗的研制，...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
- 一种用于特异性检测新型H1N1流感病毒的合成多肽
- 本发明公开了一种用于快速检测新型H1N1流感病毒的特异性合成多肽，其序列为：CKYVKSTKLRLATGLRNVPS。本发明特异性合成多肽具有抗原制备简单，不存在生物安全问题，且比天然微生物或寄生虫蛋白抗原的特异性强，检...
- 胡孔新王琳郭雪杨鹏飞平芮巾张丽萍马雪征
