王震
- 作品数：25 被引量：76H指数：5
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- 人脐带非酶解法培养MSCs的方法建立被引量：1
- 2017年
- 目的建立从人脐带Wharton's jelly组织中直接培养间充质干细胞(MSCs)的方法。方法将人脐带切成5 cm左右的片段,纵向剖开,剔除血管,把富含Wharton's jelly组织的脐带面置于10 cm2塑料培养皿的培养面上,加入含20%FBS的LG-DMEM培养基连续培养10 d;移去脐带组织后,培养皿中的细胞继续培养至80%-90%融合。传代和扩增3代(次)后,以倒置光学显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞免疫表型及细胞周期,用含有成骨细胞诱导剂、脂肪细胞诱导剂对传代培养至第3代的细胞分别定向诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞,并对诱导后细胞用碱性磷酸酶检测试剂、Von-Kossa染色检测试剂和茜苏红染色试剂作细胞生物学检测。结果脐带组织在贴壁培养5 d,组织周围可见有少量细胞贴壁生长,主要呈"成纤维样",形状不规则,移去脐带组织后继续培养至14-15 d时,细胞达到80%-90%汇合;细胞表面表达CD73、CD105、CD90、CD44、CD29、CD71及CD13,不表达CD34、CD14、CD133、CD45、HLA-DR;培养至第4代时约72.724%的细胞处在G1期,S期细胞占18.069%,第6代时,G1期细胞约为83.875%、S期细胞仅为9.606%左右。细胞经成骨细胞诱导分化后,碱性磷酸酶染色显示呈强阳性,茜苏红染色和Von-Kossa染色显示细胞有钙盐沉积并形成钙结节;细胞经成脂细胞诱导分化后,油红O染色呈红色,显示胞浆内有大量甘油三酯的聚集。结论采用非酶解法从人脐带Wharton's jelly中分离及培养扩增的细胞具备MSCs的基本特性,具有分化为成骨细胞和脂肪细胞的能力。
- 李素萍王震王超王永珍周学勇吴学忠杨宏友吕蓉
- 关键词：人脐带JELLY成骨细胞脂肪细胞
- 人脐带间充质干细胞诱导分化成脂细胞
- 2015年
- 目的观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)在体外向脂肪细胞诱导分化过程中细胞形态及表面抗原表达量变化。方法从脐带中分离培养间充质干细胞,至第3代,流式细胞仪检查其细胞表面抗原的表达量,加入成脂肪诱导剂体外诱导分化。诱导7 d,14 d,21 d,分别采用流式细胞仪分析细胞表面抗原的表达情况,结合油红O染色,观察细胞诱导分化情况。结果细胞培养至第3代,细胞表面表达CD90、CD44、CD29、CD71、CD73、CD105及CD13,不表达CD34、CD14、CD45、CD133、CD80、CD83、CD86、HLA-DR。成脂诱导7 d,细胞表面CD71表达量明显下降(P<0.05),但其他一些重要的标志物仍处于高表达水平;诱导14 d细胞表面抗原的表达量下降更为明显,如CD44为65.21%,CD71为42.05%(P<0.01),油红O染色有明显脂滴形成;诱导21 d细胞表面抗原的表达量均明显降低(P<0.01),油红O染色胞浆中充满红色油滴。结论 HUC-MSCs成脂肪诱导剂作用下,可诱导成脂肪细胞,且细胞表面抗原的表达量会在诱导过程中发生相应的改变。
- 李素萍王震王超邢昕李敏吴学忠吕蓉
- 关键词：间充质干细胞细胞分化脂肪细胞表面抗原
- 不同冷冻温度、时间对冻干血小板回收率和残留水的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨不同冷冻温度、时间对冻干血小板回收率及残留水的影响。方法依据温度、时间不同的冻干流程分3组(A组、B组和C组),分别进行血小板冻干、复水试验。用干燥称重的方法检测冻干血小板残留水含量,比较不同冷冻温度、时间对冻干血小板回收率和残留水的差异,同时比较不同冷冻温度、时间冻干血小板复水后MPV、PDW的差异。结果不同冷冻温度、时间条件下,冻干前与冻干复水后血小板MPV结果的差异均无统计学意义(P>0.05);冻干前与复水后血小板PDW结果比较,A组和C组的差异均无统计学意义(P>0.05),而B组冻干复水后血小板PDW高于冻干前血小板PDW,且差异有统计学意义(P<0.05);A组、B组和C组冻干血小板复水回收率分别为(81.72±12.43)%、(81.40±8.79)%和(94.37±7.02)%,3组冻干血小板复水回收率的差异均无统计学意义(P>0.05);A组、B组和C组冻干血小板残留水分别为(6.55±0.96)%、(7.10±1.20)%和(5.18±0.89)%,3组冻干血小板残留水含量的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 3组不同冻干温度、时间冻干血小板残留水、复水回收率相比,选择C组血小板冻干流程为后续研究血小板冻干程序,为血小板冻干流程的建立奠定基础。
- 吴学忠吕蓉吴君胜金惠新王震胡晓玉郭晓婕
- 关键词：温度
- HPA配型在免疫性血小板输注无效中的应用研究被引量：25
- 2011年
- 目的探讨以HPA配型解决免疫性血小板输注无效的方案。方法 1)建立PCR-SSP方法检测HPA-1～5基因型检测方法,建立机采血小板供者库;2)采用微柱凝胶法和Capture-P法对32名血小板输血无效患者作血小板同种抗体筛查,并对2种方法比较;3)对血小板同种抗体筛查阳性患者采用已知HPA基因型的标准谱血小板作抗体鉴定并采取HPA基因型同型输注的原则寻找供者。结果 1)采用PCR-SSP方法成功检测出HPA-1～5基因型,并对1 000名血小板供者的HPA-1～5基因型定型;2)32例血小板输注无效病例中,微柱凝胶法检测血小板同种抗体阳性率为50%,Capture-P法血小板抗体阳性检出率为40%;3)32例血小板输血无效病例中2种方法同时血小板抗体阳性13例,其中2例鉴定为抗-HPA,分别为抗-HPA-5b(P=1/84)、抗-HPA-1a(P=1/55)。结论对抗-HPA引起的血小板输注无效患者采用HPA基因型相合的方法寻找供者是有效的。
- 刘忠王震张印则李敏吕蓉李天君赵峰
- 关键词：血小板输注无效血小板抗体PCR-SSP微柱凝胶法
- HLA高分辨组织配型检测方法的建立和应用
- 吕蓉王震邹宇飞邢昕於娟李敏盛琪琪刘婷婷王超李素萍吴学忠赵阳蒋菲菲
- 该项目在HLA高分辨分型中同时采用PCR-SSO和PCR-SBT方法进行检测，相互补充相互佐证，有助于避免采用单一方法出现HLA分型错误，提高HLA分型的准确性。通过大量实验积累，建立了HLA高分辨组织配型检测方法，并对...
- 关键词：
- 关键词：中华骨髓库组织配型高分辨率
- 荧光定量PCR法在不同孕期通过母体血浆检测胎儿RhCcE血型
- 2012年
- 目的比较荧光定量PCR法(FQ-PCR)在不同孕期通过母体血浆检测胎儿RhCcE血型的准确性。方法随机采集孕期8～38周的孕妇外周血334份,分离血浆,提取游离胎儿DNA,用FQ-PCR方法检测胎儿RhCcE血型,利用胎儿脐带血标本检测的结果做验证。结果在妊娠8～≤12、13～≤20及21～38周的孕妇中,RhCcE血型各基因型的FQ-PCR检测结果与脐带血血清学检测结果比较:C基因型正确率分别为94.1%(16/17)、91.6%(22/24)、100%(18/18),漏检率为5.9%(1/17)、8.3%(2/24)、0%(0/18);c基因型正确率分别为97.6%(41/42)、100%(55/55)、100%(30/30),漏检率为2.4%(1/42)、0%(0/55)、0%(0/30);E基因型正确率分别为97.8%(46/47)、98.4%(60/61)、100%(35/35),漏检率为2.1%(1/47)、1.6%(1/61)、0%(0/35)。结论随着孕期的增加,FQ-PCR法检测胎儿RhCcE血型的准确性相应增加,孕晚期时达100%。
- 李玲陈青王震杨美霞邓余翠刘萍吕蓉周娟刘忠
- 关键词：孕期母体血浆胎儿DNA新生儿溶血病
- 无偿献血者HIV初筛检测策略探讨被引量：6
- 2013年
- 目的探讨无偿献血人群HIV初筛检测策略，为采供血单位制定合理的H1V筛查方案提供试验数据支持，以供参考。方法收集2011年2月-2013年5月合肥市无偿献血者的血液标本214807份。每份血液标本分别用1种进口试剂（伯乐）和1种国产试剂新创／万泰）同时进行EIA检测，对至少1种试剂呈反应性的标本用WB（蛋白免疫印迹）法进行确认检测。并对所搜集到的214807份标本检测结果进行ROE分析。结果1）EIA检测结果：用EIA法检测标本214807份，其中119127份标本用伯乐和新创试剂联合检测，95680份标本用伯乐和万泰联合检测；2种试剂检测的S／CO值都在0～0．5组段的标本有214436例，直接判为真阴性；呈反应性标本共371例，其中伯乐试剂和新创试剂检测均呈反应性的有24例，伯乐试剂和万泰试剂检测均呈反应性的有18例；伯乐、新创和万泰试剂检测单独呈反应性的分别是232、66、31例，反应率分别为0．11％、0．06％、0．03％。2）WB检测结果：371例初筛呈反应性标本，经WB确证检测，阳性28例，不确定32例，阴性311例；初筛检测S／CO值在0．5—1．0组段的所有标本，经WB检测，没有阳性结果。伯乐、新创、万泰试剂检测呈反应性的标本中，经WB检测后真阳性率分别为10．22％、17．78％、24．49％。3）全部标本检测资料的ROC分析：对3种试剂检测结果分别进行ROC分析，3种试剂的ROC之AUC均大至极限状态，近似为1．000；3种检测结果经z检验，两两比较的P〉0．05，无统计学显著性差异；当S／CO值为1．0时，3种试剂的灵敏度近似为1．000；特异度在0．999～1．000。4）伯乐试剂初筛呈反应性标本资料的仿ROC分析：ROC-AUC为0．907，S／CO值在3．8以上并靠近6．0时的灵敏度较高，特异度为0．75以上。结论伯乐、新创和万泰试剂检测标本的反应率差异无统计学意义；进行初筛检测时，
- 李玲吴君胜戚应杰吕蓉王震赵阳朱义媛刘鱼刘忠
- 关键词：HIV检测血液筛查蛋白印迹
- 血站质量管理体系内部评审工作的实践与体会被引量：3
- 2009年
- 王震程卫芳
- 关键词：血站质量管理体系管理评审内审
- 冻干血小板聚集和活化的实验研究
- 2016年
- 目的了解血小板在冻干前、后功能活性的变化。方法应用流式细胞仪检测冻干复水(再水化)血小板及未冷冻干燥血小板胞膜CD61、CD62p、PAC-1的分子表达,评价冻干复水后血小板活化状态;应用血小板聚集仪检测通过诱导剂瑞斯托霉素、二磷酸腺苷诱导的血小板最大聚集率,分析冻干血小板复水后血小板聚集率变化。结果血小板冻干保护剂渗透压值为(2 055.6±123.8)m OSmol/kg;冻干前及复水后血小板分布宽度(PDW)(%)分别为15.50±3.05、18.29±0.55,MPV(f L)分别为9.01±1.84、8.63±0.58;冻干血小板复水回收率(%)为81.57±12.57;冷冻前及复水后血小板最大聚集率(%)分别为34.30±33.14、22.10±23.25;冷冻前及冻干复水后血小板胞膜CD61分子表达(%)分别为43.17±13.55、48.64±13.24,CD62p分子表达(%)分别为17.34±6.47、9.79±4.48,PAC-1分子表达(%)分别为4.92±6.32、4.22±4.64。结论冷冻前及复水后血小板最大聚集率的变化甚微,冻干复水后血小板仍具仍具有一定的存活能力;冷冻前及冻干复水后血小板胞膜CD61、CD62p和PAC-1分子表达略有变化(P>0.05)。
- 吴学忠金惠新李素萍吕蓉王震郭晓婕胡晓玉
- 关键词：血小板冻干复水活化
- 正常大鼠胃黏膜中肌球蛋白轻链激酶定性和定位观察被引量：1
- 2013年
- 目的观察正常大鼠胃组织中肌球蛋白轻链激酶的表达及分布特点。方法取11只SD正常雄性大鼠,在饥饿状态下,处死后取胃组织。通过免疫组化染色,观察正常大鼠胃组织中MLCK的表达及分布。结果 MLCK在黏膜肌层、肌层和黏膜下层血管壁平滑肌均有大量表达;在胃底腺中,MLCK主要表达于壁细胞和主细胞胞浆内。结论 MLCK不仅存在于平滑肌细胞内,还分布于胃底腺壁细胞和主细胞内,可能参与胃底腺腺细胞的分泌活动。
- 王震陈浩邢蓓蓓黄大可李响汪渊朱华庆贾雪梅
- 关键词：MLCK免疫组织化学
