- BP-10对植物细胞CaM“区域化”调节作用的研究
- 李翠凤凌启阆刘华周铁林饶恩于韩静祁倩池方伊布清
- 该项目进一步深入研究BP-10与CaM在不同植物组织、器官、不同生长发育时期表达特征的相关性以及BP-10的亚细胞分布特点。以查明其是否对CaM具有区域化调节作用。研究结果表明BP-10在豌豆幼叶中的含量高于成熟叶,茎尖...
- 关键词:
- 关键词:CAMBP-10钙调素结合蛋白
- CaM对转脂蛋白BP10脂结合活性和抗真菌活性的影响
- 李翠凤刘华凌启阆刘秀峰祁倩池方伊布清王喆郝悦利王艳
- 采用5'-RACE和3'-RACE的方法,克隆了BP-10cDNA全长,发现其与植物转脂蛋白(LTP)的序列同源性高达95%以上,并具有信号肽序列。对重组BP-10的CD分析显示其具有典型的转脂蛋白特征图谱。荧光探针P9...
- 关键词:
- 关键词:钙调素
- 拟南芥钙调素结合蛋白cDNA克隆的分离和初步鉴定被引量:4
- 2006年
- 以生物素标记的钙调素为探针,从拟南芥(Arabidopsis thaliana)λZAPII cDNA表达文库中分离到9个阳性克隆.融合蛋白经CaM-gel overlay分析,其中Y1编码的融合蛋白在1 mmol/L Ca^(2+)存在下与胶体金标记的钙调素有明显结合.序列测定结果显示其外源片段全长为726 bp,含有一个476 bp的开放阅读框.GenBank数据库搜索及同源性分析结果表明该序列为拟南芥1号染色体基因组5661~7013序列,编码一未知蛋白,但与真核生物翻译起始因子5A(eIF-5A)具87%的同源性,并具相似的分子量、等电点和相同的保守序列.与eIF- 5A的结构特征比较,可初步确定Y1编码的蛋白为真核生物翻译起始因子5A家族中的新成员.即拟南芥1号染色体5661~7013序列为一尚未报道的翻译起始因子基因.蛋白质二级结构预测其C-端122~135氨基酸残基处有一双亲α-螺旋结构,这一结构与大多数钙调素结合蛋白中的钙调素结合位点的结构特征一致.该序列已提交NCBI BankIt数据库,登录号为AF492850.
- 詹红利李翠风祁倩李国亮凌启阆
- 重组CaMBP-10的表达、纯化与鉴定
- 钙调素(CaM)是Ca<'2+>信号传导系统中极其重要的组成部分,其诸多调节功能是通过与其结合蛋白(CaMBP)的相互作用而实现的.因此钙调素结合蛋白的研究对了解Ca<'2+>/CaM信号转导系统有重要意义.CaMBP-...
- 祁倩
- 关键词:CAMCAMBP-10分子生物学结合蛋白
- 文献传递
- CaMBP-10的cDNA克隆和表达及钙调素结合活性分析被引量:13
- 2004年
- 采用RT PCR法 ,从中国大白菜中分离了编码CaMBP 1 0的cDNA克隆 .该cDNA全长 4 96bp ,编码 92个氨基酸 ,3′端含有 2 1 6bp的非编码区和poly A尾 .将此BP 1 0cDNA的成熟蛋白序列导入表达质粒pET1 5b并转化至大肠杆菌E .coliBL2 1 (DE3)condonplus RIL进行表达 .以免疫印迹和钙调素结合分析法对重组BP 1 0进行鉴定 ,证明其保持了与天然BP 1 0相同的钙调素结合活性 .氨基酸和核苷酸序列分析结果显示 ,它与植物转脂蛋白高度同源 ,特别是含有 8个保守半胱氨酸 .BP 1 0与转脂蛋白之间具极为相似的理化性质如分子量、等电点、热稳定性等 .据此认为 ,CaMBP 1 0是转脂蛋白家族的新成员 ,Ca2 +
- 祁倩饶恩于王喆刘华凌启阆李翠凤
- 关键词:CAMBP-10结合活性