公共文化服务平台

单纯疱疹病毒II型糖蛋白G主要抗原表位的表达和抗原性检测: 2007年; 利用PCR拼接技术，合成含单纯疱疹病毒II型糖蛋白G（gG2）抗原表位（氨基酸序列第561～578位）的片段，并进一步利用基因工程技术获得该表位的双拷贝片段，克隆入pET—KDO表达载体进行原核表达。经IPTG诱导后，高效表达出分子量大小约为39kDa的融合蛋白，经Western blot检测具有良好的抗原性。表达的融合蛋白经凝血酶切割和亲和层析纯化，得到双拷贝gG2（561～578aa）目的蛋白，经ELISA检测具有良好的灵敏度和特异性。该重组抗原的构建和表达可用于HSV-2特异性血清学诊断的研究。; 王晓红卢海蓉章刚陈少娟黄德新李凌云林枫; 关键词：抗原表位

新型钠肽、制备方法及其在制备基因工程药物中的应用: 本发明公开了一种新型钠肽，该新型钠肽由脑钠肽和蛇钠肽连接组成；脑钠肽位于所述新型钠肽的N端，且蛇钠肽位于新型钠肽的C端；其中，脑钠肽包括由两个半胱氨酸残基形成的二硫键环状结构。其制备方法包括：获取脑钠肽基因和蛇钠肽基因，...; 李凌云周兆平王晓红章刚林枫; 文献传递

弓形虫表面抗原P35基因片段的表达纯化和抗原性分析被引量：2: 2012年; 目的制备具有免疫活性的弓形虫表面抗原P35基因片段的重组蛋白,并对其抗原性进行分析。方法根据弓形虫RH株表面抗原P35的cDNA序列设计一对引物,利用PCR技术从RH株弓形虫基因组中扩增出P35的基因片段,将其克隆到T载体中,并通过基因测序加以证实;将其亚克隆至原核表达载体pET KDO中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达。采用免疫印迹法对表达产物进行抗原性分析。结果从弓形虫RH株基因组中成功扩增到P35目的基因,该基因在原核系统中经诱导表达出分子量约42 000 Da大小的融合蛋白,经免疫印迹实验表明,表达产物具有良好的抗原性,经亲和层析纯化后得到了重组蛋白。结论运用基因工程技术得到了高纯度并具有良好抗原性的弓形虫重组P35融合蛋白。; 易俊波王晓红买制刚章刚李凌云林枫; 关键词：刚地弓形虫免疫印迹

梅毒螺旋体重组抗原的表达及在梅毒血清学诊断中的应用被引量：3: 2009年; 目的:克隆、表达梅毒螺旋体(Treponema pallidum,Tp)膜蛋白TpN47、TpN17、TpN44.5和TpN15,建立双抗原夹心ELISA法,探讨其在梅毒血清学诊断中的应用。方法:应用聚合酶链反应法(PCR)从Tp全基因组中扩增4个目的片段,克隆到载体pET-HT-JKM中,在BL21(DE3)plysS菌中诱导表达,Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,辣根过氧化物酶标记,双抗原夹心酶联免疫吸附法检测人血清中的特异性IgM和IgG抗体。结果:成功表达了4种重组蛋白用作ELISA包被和酶标抗原检测国家Tp参比血清,特异性和灵敏度均为100%;检测385份临床血清样本,结果与TPPA法相比符合率达到99%(P<0.01),灵敏度和特异性分别为98.2%(162/165)和99.5%(219/220)。结论:表达的4种重组抗原具有很好的生物活性,为理想的梅毒的血清学诊断用抗原。以这4种表达蛋白为基础建立的双抗原夹心ELISA法灵敏度高,特异性好,而且方法简单,结果客观,易于自动化操作,值得临床大力推广。; 卢海蓉王晓红陈少娟王峰章刚黄德新; 关键词：重组蛋白梅毒螺旋体

钠肽、制备方法及其在制备基因工程药物中的应用: 本发明公开了一种钠肽，该钠肽由脑钠肽和蛇钠肽连接组成；脑钠肽位于钠肽的N端，且蛇钠肽位于钠肽的C端；其中，脑钠肽包括由两个半胱氨酸残基形成的二硫键环状结构。其制备方法包括：获取脑钠肽基因和蛇钠肽基因，通过PCR方法拼接合...; 李凌云周兆平王晓红章刚林枫; 文献传递

一种重组利钠肽及其制备方法: 本发明涉及一种重组利钠肽及其制备方法，所述重组利钠肽由38个氨基酸组成，从N末端到C末端的序列为：SLRRSSCFGGRMDRIGAQSGLGCPSLRDPRPNAPSTSA，其中两个半胱氨酸残基形成二硫键环状结构。本发...; 李凌云周兆平王晓红章刚林枫

一种重组利钠肽及其制备方法: 本发明涉及一种重组利钠肽及其制备方法，所述重组利钠肽由38个氨基酸组成，从N末端到C末端的序列为：S L R R S S C F G G R M D R I G A Q S G L G C P S L R D P R P...; 李凌云周兆平王晓红章刚林枫; 文献传递

梅毒螺旋体重组抗原TpN47的纯化工艺研究被引量：1: 2013年; 目的以含有TpN47基因的表达菌体为原料,纯化梅毒螺旋体重组抗原TpN47,并提高产品收率。方法表达菌体经超声破碎后离心取沉淀,沉淀变性溶解后采用金属螯合亲和层析进行纯化。通过对层析异常现象的分析和优化层析工艺操作提高收率。结果所得纯品经SDS-PAGE分析表明可用于检测梅毒相关抗体,优化后的操作工艺使产品收率大幅提高。结论利用金属螯合亲和层析可纯化得到符合要求的梅毒螺旋体重组抗原TpN47,通过改善层析操作提高目标蛋白收率是可行的。; 章刚黄德新骆晓栋; 关键词：梅毒螺旋体收率复性

人乳头瘤病毒HPV31型宫颈癌细胞模型的建立被引量：2: 2012年; 宫颈癌与人乳头瘤病毒感染密切相关,建立宫颈癌实验模型可为宫颈癌的研究提供理想的模拟实验条件。我们通过应用基因重组技术,分别以HPV31型E6和E7基因为目的基因,通过原核表达、蛋白纯化和免疫小鼠等获得其特异性检测抗体。我们还通过构建E6和E7基因真核表达载体、转染C33A细胞、博莱霉素抗性筛选和表达检测等步骤,获得一种稳定的体外宫颈癌细胞系。经酶切鉴定及测序证实细胞基因组已重组插入质粒中的目的基因。我们已成功筛选到稳定的目的mRNA和蛋白表达的阳性细胞系,建立了稳定的人乳头状瘤病毒31型(HPV31)的宫颈癌细胞株,为研究宫颈癌提供了体外实验模型。; 易俊波买制刚卢海蓉章刚周兆平; 关键词：宫颈癌基因表达

一种双功能抗体、其构建方法及双功能抗体基因工程药物: 本发明提供一种双功能抗体及其构建方法。该双功能抗体包括抗体的重链恒定区、抗体的轻链恒定区、以及分别与所抗体的重链恒定区和抗体的轻链恒定区相连接的第一目的蛋白和第二目的蛋白。该双功能抗体的构建方法包括：分别获取抗体的重链恒...; 易俊波周兆平苏庆宁买制刚章刚王玉树雷明军林枫; 文献传递

山东省滨州市滨城区黄河十二路662号电话

章刚