翟永贞
- 作品数：39 被引量：122H指数：5
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定研究被引量：5
- 2014年
- 目的构建含丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)核心(core,C)蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体,为C蛋白与宿主蛋白相互作用机制研究奠定基础。方法聚合酶链反应(PCR)法扩增HCV 1b基因型C蛋白基因,经EcoR I和Pst I双酶切后插入到诱饵载体pGBKT7中,构建含HCV C蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-Core,经酶切分析及核酸测序分析加以鉴定。醋酸锂法将pGBKT7-Core转化入酵母菌株Y2HGold,蛋白印迹法检测C蛋白的表达,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母细胞的毒性作用及对报告基因的激活作用。结果重组质粒pGBKT7-Core中的C蛋白基因为576 bp,经核酸测序分析与NCBI中注册的HCV 1b基因型C蛋白基因序列一致;转化酵母菌后检测到C蛋白的表达;HCV C蛋白对酵母菌Y2HGold无毒性,且对报告基因无激活作用。结论含HCV C蛋白基因的酵母双杂交诱饵载体构建成功,表达稳定。
- 张丹翟永贞冯国和
- 关键词：丙型肝炎病毒病毒核心蛋白质类酵母双杂交技术
- 血清前白蛋白结合child-pugh及MELD评分对肝硬化肝脏功能评价临床研究
- <正>目的明确血清前白蛋白(prealbumin,PA)评价肝硬化肝脏功能临床意义。方法回顾性分析我科各种原因所致肝硬化患者351例。计算Child-Pu曲分级与MELD评分。将血清PA与Child-Pugh分级、MEL...
- 韦莉娅翟永贞冯国和
- 文献传递
- 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子编码基因对乙型脑炎DNA疫苗细胞免疫增强效应的影响
- 2009年
- 目的研究粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）编码基因对乙型脑炎（JE）DNA疫苗细胞免疫应答的影响。方法套式RT—PCR法获取BALB／c小鼠GM—CSF编码基因，构建含乙型脑炎病毒（JEV）前膜（prM）-包膜（E）蛋白与GM-CSF编码基因以及单纯GM—CSF编码基因的重组质粒，分别命名为pJME／GM—CSF和pGM—CSF。脂质体法转染上述质粒人中华仓鼠卵巢细胞（CHO），免疫荧光法检测编码蛋白的表达与分布。流式细胞仪检测经不同组合的免疫原免疫后小鼠脾T淋巴细胞亚群及Th细胞内细胞因子（IFN-γ、IL-4）变化，LDH法测定CTL活性。数据行单因素方差分析及最小显著差数法比较。结果重组质粒pJME／GM—CSF与pGM—CSF经鉴定构建正确，所编码的蛋白主要分布于胞质，少量分布于胞膜。pJME／GM—CSF组CD4^＋T淋巴细胞比例为（33．90±0．79）％，明显高于其他组（t值分别为9．818、6．804、6．594、10．061、9．380和17．675，均P％0．05）。pJME＋pGM—CSF同时注射组及pGM—CSF注射3d后接种pJME组CD4^＋T淋巴细胞比例分别为（29．83±0．61）％、（29．70±0．51）％，高于pJME注射3d后接种pGM—CSF组的（27．69±0．50）％（t=3．466、t=3．255，P〈0．05）。pJME／GM—CSF组与pJME＋pGM—CSF同时注射组CD8^＋T淋巴细胞比例较空载体（pcDNA3．1＋）组及JE灭活疫苗组升高（t值分别为3．811、2．627、10．537和3．811，均P〈0．05）。pJME／GM—CSF组CTL活性为（51．48±0．10）％，明显高于其他组（t值分别为22．868、13．823、5．377、32．287、34．632和53．795，均P〈0．05）。pJME／GM—CSF组、pJME＋pGM—CSF同时注射组及pGM—CSF注射3d后接种pJME组IFN-γ／IL-4比值分别为19．13±1．36、12．32±0．82、7．05±0．43，明显高于其他组（P〈0．05）。结论GM—CSF编码基因可增强JEDNA疫苗的细胞免疫应答效应。
- 翟永贞李喜梅周言张丹邓宝成冯国和
- 关键词：粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
- 以腹痛为首发症状的布鲁菌病一例被引量：1
- 2019年
- 布鲁菌病临床表现极其复杂多样,血清学检测会出现一定比例的假阴性和假阳性,外周血液细菌培养阳性率低于骨髓细菌培养,临床上常常容易被漏诊和误诊。本例患者有消瘦、腹痛、间歇性发热、肝脾肿大、门静脉增宽、肝损伤、心包积液、双肺膨胀不良伴炎性反应、胸腔积液、胸椎椎体骨质改变,几乎包含了所有布鲁菌病的常见和罕见的并发症,为该病诊治能力的进一步提高提供帮助。
- 翟永贞冯国和
- 关键词：布鲁菌病首发症状腹痛血液细菌培养间歇性发热肝脾肿大
- 不同途径接种乙脑病毒prME蛋白编码基因DNA疫苗所致BALB/c鼠的细胞免疫被引量：4
- 2007年
- 目的:研究经不同途径接种乙脑病毒prME蛋白编码基因DNA疫苗所诱导的细胞免疫。方法:将乙脑病毒prME蛋白编码基因DNA疫苗(命名为pJME)分别以肌注、滴鼻两种免疫方式免疫BALB/c鼠,流式细胞仪检测脾脏CD4+/CD8+T淋巴细胞亚群,乳酸脱氢酶释放实验测定脾脏特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性。结果:pJME肌注组与滴鼻组免疫鼠CD4+T淋巴细胞百分比(30.91+0.72)%、(27.89+0.42)%,均高于灭活疫苗与载体肌注组(23.73+0.17)%、(23.78+0.21)%(P<0.05),肌注组显著高于滴鼻组(P<0.05);而CD8+T淋巴细胞百分比(14.62+0.25)%、(13.73+0.50)%,也均高于灭活疫苗和载体肌注组(10.80+0.39)%、(11.97+0.06)%(P<0.05),肌注组与滴鼻组无显著差异(P>0.05);两组有明显CTL效应(pJME肌注组29.1%,pJME滴鼻组17.1%),明显高于载体肌注组6.0%,pJME肌注组明显优于滴鼻组。结论:pJME以两种途径免疫鼠时可诱导明显细胞免疫反应。
- 周言张琳翟永贞李喜梅王占英冯国和
- 关键词：T淋巴细胞亚群
- 纳米技术在日本脑炎新型疫苗中的应用研究
- <正>目的探讨载有日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)prME蛋白与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(Granulocyte-macrophage colony-stimulatin...
- 翟永贞
- 文献传递
- 细胞自噬调节免疫细胞分化的研究进展被引量：5
- 2020年
- 细胞自噬作为一种保守的溶酶体降解途径,其在免疫系统中的多种功能得到了很好的研究。自噬对于免疫细胞分化的调节作用逐渐被挖掘,为探索其中的具体机制,总结细胞自噬在免疫细胞增殖发育以及分化过程中的作用是十分必要的。已有文章通过介绍自噬选择性降解的功能,对自噬影响免疫细胞功能以及分化进行了总结,而本文从几类关键免疫细胞出发,阐述自噬以及自噬参与的营养信号代谢通路对于免疫细胞分化的重要调节作用。
- 朱君瑶翟永贞
- 关键词：细胞自噬
- 乙型脑炎病毒非结构蛋白4A编码基因构建与表达
- <正>目的构建流行性乙型脑炎病毒(JEV)非结构4A(NS4A)蛋白编码基因重组子并鉴定。方法以JEV SA14-14-2株Total RNA为模板,运用RT-PCR方法扩增JEV NS4A蛋白编码基因,克隆至pMD19...
- 翟永贞常彩芳冯国和
- 文献传递
- 壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米DNA疫苗肌注BALB/c鼠诱导细胞免疫效应的研究
- <正>目的探讨载有日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)prME蛋白与粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulatin...
- 翟永贞周言马力冯国和
- 文献传递
- 增强自噬的乙型脑炎重组DNA疫苗促进BALB/c小鼠树突状细胞功能被引量：1
- 2021年
- 目的探讨自噬介导的乙型脑炎重组DNA疫苗对BALB/c小鼠体内树突状细胞(dendritic cells,DCs)免疫相关功能的影响。方法取健康BALB/c雌性小鼠,随机分配成5组,分别用pcDNA3.1(+)空载体、pJME质粒、pJME-LC3重组质粒肌注免疫小鼠,并使用无菌PBS肌注作为空白对照组,乙型脑炎减毒活疫苗腹腔注射作为阳性对照组,免疫注射共3次,每次间隔2周,末次免疫2周后无菌取小鼠脾脏,研磨后从单细胞悬液中分离DCs,使用免疫荧光技术观察重组质粒在DCs中的表达水平;利用流式细胞术检测DCs表面主要组织相容性复合体Ⅱ(major histocompatibility complex Ⅱ,MHCⅡ)的表达水平以及小鼠脾脏DCs摄取FITC-Dextran后的平均荧光强度;CCK8法检测分析不同免疫组DCs对同种异体小鼠脾脏淋巴细胞的刺激增殖效果。结果相对于其他免疫组,pJME-LC3实验组大量DCs胞质中可见质粒编码蛋白表达;pJME-LC3实验组免疫鼠脾脏DCs摄取FITC-Dextran的能力明显强于其他免疫组(P<0.05);pJME-LC3组小鼠成熟DCs表面MHCⅡ分子的表达水平明显升高(P<0.05);进一步研究发现pJME-LC3组小鼠脾脏DCs对同种异体小鼠脾脏淋巴细胞刺激增殖能力高于其他免疫组(P<0.05)。结论pJME-LC3重组质粒可以促进免疫鼠脾脏DCs抗原提呈以及刺激淋巴细胞增殖的能力,提示自噬介导的乙型脑炎重组DNA疫苗可能通过影响BALB/c小鼠DCs功能促进免疫效应。
- 朱君瑶藏鑫翟永贞
- 关键词：乙型脑炎DNA疫苗树突状细胞自噬
