胡俊
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
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- 2型单纯疱疹病毒糖蛋白G基因片段的表达及其抗原性分析被引量：1
- 2013年
- 目的获得单纯疱疹病毒2型(HSV-2)糖蛋白G(gG2)免疫优势片段gG321-580并初步研究其抗原性。方法 PCR扩增gG321-580基因,利用Bac-to-Bac表达系统表达gG321-580His融合蛋白,Western blot和间接ELISA鉴定蛋白活性。结果在Sf9细胞中成功表达HSV-2 gG321-580His蛋白,gG321-580His能与小鼠抗HSV-2 gG2单抗结合,在60 KDa附近出现特异性结合条带,ELISA分析初步证实gG321-580His能够与HSV-2阳性血清反应,而不与HSV-1阳性血清和正常人血清反应。结论 gG321-580His蛋白获得成功表达,ELISA检测显示其具有良好的抗原性,为研究以gG321-580蛋白作为靶区域的HSV-2型特异性诊断试剂盒打下实验基础。
- 刘涛刘继峰斯国静俞骅胡俊李钧
- 关键词：单纯疱疹病毒2型酶联免疫吸附
- 食品中阪崎肠杆菌多重PCR检测方法的建立和改良
- 楼秀芹斯国静戚建江刘涛胡俊俞骅
- “食品中阪崎肠杆菌多重PCR检测方法的建立和改良”系杭州市科技局“社会发展科研专项项目”（20110533B19），项目执行日期2011年7月至2014年5月。该项目以阪崎肠杆菌ITS序列，16s，rDNA和ompA基因...
- 关键词：
- 关键词：食品检测阪崎肠杆菌
- 单纯疱疹病毒Ⅱ型G蛋白免疫优势肽段在杆状病毒表达系统的表达及其反应原性
- 2013年
- 目的利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对单纯疱疹病毒II型(HSV-2)糖蛋白G(gG-2)免疫优势片段gG321-580进行表达,纯化并评价其反应原性,以探索HSV-2免疫诊断试剂的研制。方法提取HSV-2DNA作为模板,PCR扩增gG321-580基因,克隆至pFastBac HTC载体中,通过Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达His-gG321-580融合蛋白,SDS-PAGE和Western-blotting鉴定表达产物,NTA-Ni 2+纯化后间接ELISA评价其反应原性。结果 HSV-2gG321-580在昆虫细胞Sf9中得到特异性表达,纯化后的重组gG321-580蛋白对HSV-2阳性血清抗体有较好的抗原性和特异性。结论 gG321-580蛋白在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中成功表达,表达产物表现出良好的反应原性,为发展HSV-2免疫诊断试剂奠定了基础。
- 刘涛刘继峰斯国静俞骅胡俊李钧
- 杭州市2009年食品污染状况及食源性疾病调查分析被引量：7
- 2012年
- 目的:了解杭州市食品污染及食源性疾病状况。方法:对杭州市区农贸市场和超市销售的168件食品分别进行了沙门氏菌、大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌、副溶血性弧菌及海鸥弧菌的定性检测和大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、单增李斯特菌的定量测定。对360件食品检测金属污染物、食品添加剂、农药残留、兽药残留等。对2家社区卫生服务中心在2009年5月-10月间就诊,以腹泻为主要症状的275例食源性疾病病例检测沙门氏菌、志贺氏菌、副溶血性弧菌、大肠杆菌O157:H7等主要食源性病原菌。结果:从168份检样中共检出各类病原菌32株,在各类检测到的病原菌中以单增李斯特菌检出率最高,共检得15株,其次为沙门氏菌,检得9株;对130份食品样品进行铅含量的测定,检出109份,检出率为83.85%,合格率为96.92%。镉含量的测定,检出128份,检出率为98.46%,合格率为93.85%。油条类的平均值为154.5mg/kg,路边摊所购买的油条铝含量超标较为严重。110个食品样品进行17种农药的监测共检测到8种有机磷农药。对275例病人的食源性病原菌的有关项目的检测,共检出相关病原菌45株,总检出率为16.36%。结论:保障食品安全必须先了解食品污染物和食源性疾病状况并及时做出预警,进而提出有针对性的控制措施,达到减少食品污染、预防食源性疾病的目标。
- 黄利明斯国静金铨方叶珍朱晓霞俞骅刘辉胡俊王玲莉
- 关键词：食品安全污染食源性疾病
- 单核细胞增生李斯特菌在市售食品中污染现状分析
- 目的了解杭州市市场销售的部分食品受单增李斯特污染状况。方法于2007年5月至2009年11月,采集杭州市4家超市及5家农贸市场数类食品样品共计244件,其中生畜、生禽肉类样品143件,即食食品101件,按GB/T4789...
- 斯国静俞骅刘涛胡俊
- 关键词：冷藏食品单增李斯特菌污染状况
- 文献传递
- 重组免疫优势肽段为抗原的ELISA法在检测2型单纯疱疹病毒感染中的应用
- 2012年
- 目的表达2型单纯疱疹病毒（HSV-2）糖蛋白G免疫优势片段gG321-580，探讨重组gG321-580作为检测HSV-2特异性IgG诊断抗原的可行性，为进一步开发诊断试剂盒奠定基础。方法整合有sG32l-5踟基因的重组杆状病毒接种s19昆虫细胞，NTA-Ni^2＋纯化表达His-gG32M80融合蛋白。应用HSV-2感染Vero细胞，制备HSV-2病毒抗原。将gG321-580蛋白和HSV-2病毒抗原分别作为包被抗原，建立间接ELISA法（gG321-580-ELISA和病毒抗原-ELISA）。分别用gG32M80-ELISA和病毒抗原-ELISA检测105份临床样本，两者的检测结果以HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒作为金标准，在特异性、灵敏性和符合率等方面进行比较。结果SDS-PAGE和Western印迹结果显示，表达的gG321-580蛋白相对分子质量约为60000，具有良好的免疫学活性。与HerpeSelect 2 ELISA IgG试剂盒相比，gG321-580-ELISA的灵敏度、特异度、符合率分别为83．3％、81．8％、82．9％，病毒抗原-ELISA的灵敏度、特异性和符合率分别为20．8％、93．9％、43-8％。gG321-580-ELISA敏感度和符合率高于病毒抗原-ELISA。结论表达的HSV-2重组gG32M80蛋白作为包被抗原的ELISA法是一种敏感、特异的方法，具有较大的应用价值。
- 刘涛斯国静俞骅胡俊李钧
- 关键词：疱疹病毒2型酶联免疫吸附测定
- 杭州市食品中食源性病原菌污染状况调查分析被引量：6
- 2009年
- 目的：了解杭州市食品中沙门菌、单核细胞增生李斯特菌、大肠埃希菌O157：H7和副溶血弧菌的污染状况。方法：2008年5月-10月采集杭州市生肉、熟肉制品、水产品、生食蔬菜等食品共95件,按GB/T4789-2003相关方法进行检测。结果：95件检样中检出沙门菌11株,检出率为11.58%;检出单增李斯特菌9株,检出率为9.47%;检出副溶血弧菌1株,检出率为1.05%;未检出大肠埃希菌O157：H7。结论：杭州市市售食品中存在致病菌的污染,特别在生肉类食品中沙门菌和单增李斯特菌污染比较严重,应当加强食品卫生管理。
- 胡俊斯国静俞骅王一泓
- 关键词：食品污染物致病菌
- 淡水鱼中香港海鸥菌污染状况调查研究被引量：3
- 2009年
- 目的:了解杭州市市售淡水鱼受香港海鸥菌污染状况。方法:于2007年6月及2008年6月分二次共采集杭州市5家农贸市场淡水鱼检样共计80件,将鱼肠中、后段内容物直接分离含头孢哌酮麦康凯琼脂平板,用API20E生化试剂条鉴定确证。结果:80件检样共检出香港海鸥菌5株,总阳性率为6.25%(5/80),其中草鱼的阳性率为13.16%(5/38)。结论:杭州市场淡水鱼中香港海鸥菌的污染率不可忽视,应重视此菌的致病性并加强监测。
- 斯国静胡俊俞骅王一泓
- 关键词：香港海鸥菌淡水鱼污染
- 单纯疱疹病毒II型糖蛋白G基因免疫优势表位片段在昆虫杆状病毒系统中的表达及其初步应用
- 俞骅刘涛刘继峰斯国静李钧胡俊
- 1.该研究以HSV-2基因组DNA为模板克隆gG321-580基因，利用Bac-to-Bac表达系统在草地夜蛾昆虫细胞(Sf9)中成功表达了重组His-gG321-580融合蛋白，NTA-Ni2+纯化后的重组gG321-...
- 关键词：
- 关键词：疱疹病毒免疫诊断试剂杆状病毒系统
