胡庆亮
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 供职机构：内蒙古大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌诱导牛原代乳腺上皮细胞的凋亡被引量：7
- 2013年
- 【目的】观察金黄色葡萄球菌能否诱导牛原代乳腺上皮细胞发生凋亡。【方法】先以新鲜牛奶为材料分离培养牛乳腺上皮细胞并鉴定,然后用金黄色葡萄球菌侵染牛乳腺上皮细胞,采用普通光镜和扫描电子显微镜观察金黄色葡萄球菌诱导牛乳腺上皮细胞凋亡的形态学变化;用流式细胞仪(Annexin V/PI双染法)定量检测金黄色葡萄球菌感染对牛乳腺上皮细胞凋亡的诱导作用;RT-PCR检测细胞凋亡通路中关键蛋白caspase 3和caspase 8的变化情况。【结果】从乳汁中分离的细胞经原代培养后,细胞呈典型的铺路石状,细胞表层可产生大小不等的乳滴,RT-PCR法扩增出乳腺上皮细胞的骨架蛋白8特异性条带;免疫荧光细胞染色法结果显示分离培养的牛乳腺上皮细胞表达角蛋白8;金黄色葡萄球菌感染牛乳腺上皮细胞3 h后,可诱导牛乳腺上皮细胞发生凋亡,表现为细胞核皱缩,染色质边缘化和细胞浆内空泡增多等典型凋亡特征;Annexin V/PI双染法检测后发现,与对照组相比,感染组细胞凋亡率明显升高,差异极显著(P﹤0.01);与对照组相比,感染组细胞caspase3及caspase 8表达量明显增高。【结论】金黄色葡萄球菌可以诱导牛原代乳腺上皮细胞凋亡,具有细胞凋亡的典型形态特征和生化特性,凋亡通路可能涉及caspase 3和caspase 8参与的外源性凋亡途径。
- 崔新洁胡庆亮李奕平陶琳修磊刘秉春陈媛王潇
- 关键词：金黄色葡萄球菌牛乳腺上皮细胞细胞凋亡
- SIRT1与衰老分子机理研究进展被引量：3
- 2013年
- 指出了SIRT1(沉默信息调节因2相关酶1)是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)+依赖的组蛋白去乙酰化酶,可使多种蛋白的赖氨酸残基脱去乙酰基。SIRT1可作用于p53、FOXO、NF-κB、PPAR-γ等一系列底物,参与不同的信号途径,调控细胞的应激反应、凋亡和衰老。深入研究SIRT1对衰老的调控机理,有助于揭示衰老的复杂分子机制,并为以SIRT1为靶点延长人类寿命的新思路提供理论基础。对从SIRT1与衰老的分子机理最新研究进展进行了综述。
- 李凌娟胡庆亮
- 关键词：SIRT1衰老乙酰化细胞凋亡
- 病原菌毒力因子诱导宿主细胞凋亡机理的研究进展被引量：3
- 2013年
- 细胞凋亡可能在病理条件下发生,其中细菌感染在引起细胞凋亡方面扮演着非常重要的角色。致病菌可通过激活某些促凋亡因子或者抑制某些抗凋亡因子的活性,改变宿主细胞信号通路进而诱发细胞凋亡。近些年,研究者对细菌诱导宿主细胞凋亡的机理进行了大量研究发现,细胞凋亡主要与致病菌的毒力因子有关。结合当前的研究成果,对病原菌毒力因子诱导机体细胞凋亡的作用机理进行归纳总结,并对病原菌毒力因子诱导宿主细胞凋亡机理在癌症及某些抗药性细菌性疾病方面治疗的应用前景进行探讨与展望。
- 胡庆亮李凌娟王潇
- 关键词：细菌毒力因子宿主细胞凋亡
- SIRT1与衰老相关疾病的研究进展被引量：2
- 2013年
- SIRT1(沉默信息调节因子2相关酶1)是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的去乙酰化酶,是Sir2的同源物。SIRT1以多种非组蛋白和组蛋白为底物参与多种细胞生物学功能如基因转录沉默、细胞生长周期调节、能量代谢包括糖异生和脂质累积、胰岛素分泌、血管生成、神经保护、病毒感染以及细胞衰老,故SIRT1与心血管疾病、神经退行性疾病、癌症等衰老相关疾病的发病机理有着密切关联。近几年随着对SIRT1深入彻底的研究,SIRT1与上述疾病的病理研究已初见成果,对SIRT1与多种衰老相关疾病病理最新研究进展作一综述。
- 李凌娟李春凤胡庆亮
- 关键词：衰老SIRT1去乙酰化
- 金黄色葡萄球菌黏附素及其靶位疫苗的研究进展被引量：2
- 2013年
- 金黄色葡萄球菌是引起奶牛乳腺炎的主要病原体,因其具有细胞内定殖和对抗生素极易产生耐药性的特点,使得用抗生素治疗的效果越来越差,为此疫苗防治成为首选。黏附素在金黄色葡萄球菌致病过程中起着至关重要的作用,在金黄色葡萄球菌感染的早期,黏附素是最重要的致病因子,只有当金黄色葡萄球菌黏附到宿主细胞上,毒素和荚膜才能开始表达。因此阻断金黄色葡萄球菌感染的初始阶段,特别是阻止细菌黏附到细胞和定殖在黏膜表面,将是预防和治疗奶牛乳腺炎的最有效途径。因此近些年研究者致力于黏附素的结构及功能的研究,试图以黏附素为靶点设计金黄色葡萄球菌疫苗。本研究对近几年黏附素的种类和作用,以及其相关疫苗的研究进行了综述。
- 李凌娟胡庆亮王潇
- 关键词：金黄色葡萄球菌黏附素乳腺炎
- 牛白细胞介素-17真核表达载体的构建及在牛乳腺上皮细胞中的表达
- 2014年
- 【目的】在体外分离培养牛乳腺上皮原代细胞,并构建牛白细胞介素-17(bIL-17)基因真核表达质粒,观察重组质粒在牛乳腺上皮细胞的表达.【方法】提取牛脾脏细胞总RNA,通过RT-PCR扩增bIL-17,将bIL-17连入pMD19-T进行测序,测序成功后将bIL-17插入含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达质粒pEGFP-N3上,构建真核表达质粒pEGFP-N3-bIL-17.用脂质体法将pEGFP-N3-bIL-17质粒转染于牛乳腺上皮细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达,RT-PCR检测bIL-17基因在细胞内的转录,定量ELISA检测bIL-17蛋白在细胞内的表达情况.【结果和结论】成功构建具有绿色荧光和新霉素抗性的双选择标记的牛白细胞介素-17真核表达载体,并可在牛乳腺上皮细胞成功表达.
- 王婷崔新洁刘秉春陶琳胡庆亮修磊王潇
- 关键词：牛乳腺上皮细胞转染
