赵大龙
- 作品数：8 被引量：18H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所教育部中草药物质基础与资源利用重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- A53T突变型人α-synuclein转基因细胞模型构建及鉴定
- 目的:构建A53T突变型人α-synuclein转基因细胞模型,为深入开展帕金森氏病机理研究及有效化合物筛选提供平台。方法RT-PCR扩增人α-synuclein基因,与T载体相连后,运用 SOE法进行定点突变。经双酶切...
- 赵大龙邹莉波朱海波
- 文献传递
- α-Synuclein转基因细胞模型建立及三个单体化合物的细胞保护作用研究
- 帕金森氏病(Parkinson’s disease，PD)是一种常见的神经退行性疾病，其特征是黑质多巴胺能神经元选择性减少以及路易小体(Lewy body，LB)小体形成，多见于老年人。目前该病的发病机制仍不十分明了，目...
- 赵大龙
- 关键词：帕金森氏病Α-SYNUCLEIN细胞模型
- 文献传递
- 小蜡树皮单体化合物—Esculin对MPP^+所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
- 2008年
- 目的:在MPP+诱导的SH-SY5Y细胞凋亡模型中,研究从小蜡树皮提取的单体化合物Esculin的神经保护作用。方法:应用MTT法检测Esculin对细胞存活率的影响。应用Annexin V-FITC与PI双染流式细胞仪检测Esculin对MPP+诱导的细胞凋亡的影响。此外,应用荧光染料DCFH-DA及Rhodamine 123对细胞内活性氧簇(ROS)及线粒体膜电位(ΔΨm)进行了检测。结果:在经过10-7mol/L,10-6mol/L,10-5及10-4mol/L浓度Esculin处理后,细胞存活率与MPP+处理组相比,有显著性提高。结果显示,Esculin具有显著的抗细胞凋亡作用。同时Esculin可明显改善MPP+引起的ΔΨm下降,并可以逆转MPP+诱导的ROS水平升高。结论:Esculin对MPP+诱导的细胞损伤有明显保护作用,该化合物可以作为治疗退行性神经疾病如帕金森病等的候选化合物。
- 赵大龙时利翟坤光邹莉波林生石建功朱海波
- 关键词：活性氧
- 羟基红花黄色素A上调低氧状态下血管内皮细胞中缺氧诱导因子-1α的表达被引量：17
- 2008年
- 羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)是从菊科植物红花中提取的查尔酮类化合物。本实验观察HSYA对低氧状态(1%O2)下人脐静脉内皮细胞株(Eahy926)增殖的促进作用及其调节Eahy 926细胞中林希氏基因(von Hippel-Lindau gene,VHL),抑癌基因p53(tumor suppressor gene p53,p53)和降解缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)的作用。采用MTT法测定低氧状态下HSYA(100、10和1μmol.L-1)对Eahy926细胞增殖率的影响。免疫组织化学方法测定VHL与p53蛋白表达数量和定位。RT-PCR方法检测细胞中VHL、p53和HIF-1α的转录水平。Western blotting方法检测VHL、p53和HIF-1α的蛋白表达。与低氧模型对照组相比,HSYA(100μmol.L-1)促使细胞增殖率升高,HIF-1α转录和蛋白表达水平显著增强,呈时间依赖性。给药8 h后,VHL与p53的蛋白表达和转录水平均明显降低。HSYA诱导HIF-1α表达增加并提高低氧状态下细胞增殖率的作用,可能通过抑制VHL和p53两种HIF-1α的降解调节因子实现。
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- 关键词：羟基红花黄色素A抑癌基因P53缺氧诱导因子-1Α人脐静脉内皮细胞株
- A53T突变型人α-synuclein转基因细胞模型构建及鉴定
- 2006年
- 目的：构建A53T突变型人α-synuclein转基因细胞模型，为深入开展帕金森氏病机理研究及有效化合物筛选提供平台。方法RT—PCR扩增人α-synuclein基因，与T载体相连后，运用SOE法进行定点突变。经双酶切，将突变型α-synuclein基因插入pcDNA3．1＋载体中。运用脂质体法进行稳定转染，并通过有限稀释进行单克隆筛选，得到初筛细胞株。转染90天后，运用Western blot法进行目的蛋白检测，选择高表达株细胞作为实验株。
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- 关键词：Α-SYNUCLEIN
- 人G209A突变型α－synuclein转基因SH－SY5Y细胞
- 本发明公开了我国抗帕金森氏病(Parkinson’s Disease)药物筛选及评价平台的建立，具体讲，该平台以基因克隆技术和转基因技术为支持，在体外模拟病变巴胺能神经元，可用于筛选抗帕金森氏病药物候选化合物和先导化合物...
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- 文献传递
- Liriodendrin对多巴胺所致SH-SY5Y细胞损伤的保护作用(英文)被引量：1
- 2007年
- 目的用多巴胺诱导的SH-SY5Y细胞凋亡模型,研究从小蜡树皮提取的单体化合物liriodendrin的神经保护作用。方法应用MTT法检测liriodendrin对细胞存活率的影响。应用Annexin V-FITC与PI双染流式法检测liriodendrin对多巴胺诱导的细胞凋亡的影响。应用荧光染料DCFH-DA及Rhodamine 123对细胞内活性氧簇(ROS)及线粒体膜电位(ΔΨm)进行了检测。此外,应用RT-PCR方法,对细胞内P53基因的转录水平进行了检测。结果在经过10–8,10–7,10–6,10–5及10–4mol·L–1浓度liriodendrin处理后,细胞存活率与多巴胺处理组相比有显著性提高。流式细胞术结果显示liriodendrin具有显著的抗细胞凋亡作用。同时liriodendrin可明显改善多巴胺引起的ΔΨm下降,并可以逆转多巴胺诱导的ROS水平升高。此外,liriodendrin还可以降低多巴胺引起的P53基因转录水平的升高。结论Liriodendrin对多巴胺诱导的细胞损伤有明显保护作用。推测主要机制可能与其调节细胞氧化应激反应及细胞凋亡的信号转导通路有关,提示该化合物可以作为治疗退行性神经疾病如帕金森氏病等的候选化合物。
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- 关键词：帕金森氏病多巴胺活性氧簇线粒体膜电位P53
- A53T突变型人α-synuclein转基因细胞模型构建及鉴定
- 赵大龙邹莉波朱海波
