赵永祥
- 作品数：8 被引量：57H指数：3
- 供职机构：中南大学湘雅三医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- pcDNA3.1(+)TPA构建及其在人脐静脉内皮细胞的表达活性研究被引量：2
- 2004年
- 目的 建立TPA基因在人脐静脉内皮细胞外源性表达的方法 ,为缺血性心脏疾病的基因治疗及防止血管再狭窄提供理论依据和新方法。方法 构建真核表达载体pcDNA3 1( +)TPA ,并采用脂质体法将其转入体外培养的人脐静脉内皮细胞 ,并观察外源性TPA表达情况。结果 真核表达载体pcDNA3 1( +)TPA在人脐静脉内皮细胞中获有效表达 ,酶联免疫吸附法TPA蛋白表达定量检测结果为 5 68 6ng/10 6细胞 /2 4h ,未转pcDNA3 1( +)TPA的人脐静脉内皮细胞测得为 17 8ng/10 6细胞 /2 4h ;发色底物法测得外源性TPA活性为 10 8 8IU/10 6细胞 /2 4h ,未转pcDNA3 1( +)TPA的人脐静脉内皮细胞测得为 5 6IU/10 6细胞 /2 4h。结论 pcD NA3 1( +)TPA转入人脐静脉内皮细胞后 ,外源性TPA基因获有效表达 ,为缺血性心脏病的TPA基因治疗提供了理论依据和新方法。
- 赵永祥胡冬煦杨进福周新民陈勇赵迪成
- 关键词：脐静脉内皮细胞表达活性缺血性心脏疾病
- nm23、CerbB-2和p53蛋白表达对乳腺癌预后的多因素分析被引量：12
- 2004年
- 【目的】探讨乳腺癌组织中nm23、C erbB 2和p53基因蛋白表达及其与临床病理指标和预后的关系。 【方法】应用免疫组化S P方法检测157例乳腺癌石蜡切片中nm23、C erbB 2和p53蛋白的表达;应用Kaplan Meier法及多变量Cox比例风险模型分析3种蛋白表达与预后的关系。【结果】①nm23表达率为58.0%,与肿 瘤大小、TNM分期、腋淋巴结状态和远处转移有关;C erbB 2表达率为40.8%,与患者年龄、月经状况、肿瘤大 小、TNM分期和腋淋巴结状态相关;p53表达率为42.7%,与TNM分期和腋淋巴结状态及远处转移有关;② nm23阳性表达与C erbB 2阳性表达呈负相关,与p53阳性表达呈正相关;C erbB 2阳性表达与p53阳性表达 呈负相关;③nm23阳性组生存率高于阴性组;C erbB 2阳性组生存率低于阴性组;p53阳性组生存率高于阴性 组;④多因素Cox回归分析显示,nm23、C erbB 2不同表达及TNM分期3项指标反映乳腺癌预后情况,危险度 分别为0.395、2.009及1.446。【结论】nm23、C erbB 2表达和TNM分期是乳腺癌的独立的预后指标,检测 nm23、C erbB 2有助于筛选出具有高复发及转移危险的患者。
- 廖春梅赵永祥胡冬煦杨进福梁维君吴胜奇朱利军阳国平
- 关键词：肿瘤蛋白质类蛋白质P53基因,ERBB-2预后
- 组织型纤溶酶原激活因子构建及其在人脐静脉内皮细胞的表达活性(英文)
- 2005年
- 背景:组织型纤溶酶原激活因子被认为是血管系统内初期血栓清除的关键酶。目的:构建pcDNA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子真核表达载体转染人脐静脉内皮细胞,观察外源性组织型纤溶酶原激活因子的表达情况。设计:随机对照实验。单位:中南大学湘雅二医院及中国医学遗传学国家重点实验室。材料:实验于2002-09/2003-06在中国医学遗传学国家重点实验室完成。脐静脉内皮细胞取自中南大学湘雅二医院健康产妇分娩后胎盘脐带,pcDNA3.1为SmithKlineBeecham公司赠送。方法:构建真核表达载体pcDNA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子,并将pcDNA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子转入人脐静脉内皮细胞,用酶联免疫吸附法定量检测转基因后组织型纤溶酶原激活因子蛋白表达情况、发色底物法检测外源性组织型纤溶酶原激活因子活性。以转pcD-NA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子基因人脐静脉内皮细胞为观察对象,未转pcDNA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子基因人脐静脉内皮细胞作为对照。主要观察指标:组织型纤溶酶原激活因子蛋白定量及活性测定结果。结果:①组织型纤溶酶原激活因子蛋白定量表达结果为568.6ng/106细胞/24h,未转pcDNA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子的人脐静脉内皮细胞测得为17.8ng/106细胞/24h。②组织型纤溶酶原激活因子活性为108.8IU/106细胞/24h,未转pcDNA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子的人脐静脉内皮细胞测得为5.6IU/106细胞/24h。结论:pcDNA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子转染人脐静脉内皮细胞后,外源性组织型纤溶酶原激活因子基因获有效表达,为pcDNA3.1(+)组织型纤溶酶原激活因子转入人体细胞确立了有效依据。
- 杨进福胡冬煦夏家辉周新民陈勇周文武唐滔赵永祥赵迪成谭思创
- 关键词：基因疗法组织型纤溶酶原激活物
- PCR技术在快速筛选DNA文库中的应用被引量：3
- 2004年
- 目的探讨运用PCR (polymerase chain reaction)方法快速筛选DNA文库的可行性。方法以猪α-1,3GT cDNA片段为探针,用cDNA上的特异性序列合成的引物,采用噬菌斑原位杂交和PCR相结合的方法,对猪的gDNA文库进行α-1,3GT基因筛选,经酶切、Southern Blot、测序和荧光原位杂交定位。结果经过两次杂交和一次PCR即得信号很强的7个阳性单克隆,插入子均在8 kb以上,且包含第三内含子,其中3个片段测序证实含第三、第四外显子;荧光原位杂交证实该基因位于染色体1q2.10-q2.11。结论PCR可以应用于快速筛选DNA文库。
- 赵永祥刘斌张昊宇胡冬煦杨进福夏家辉潘乾薛志刚
- 关键词：PCRDNA文库基因筛选荧光原位杂交
- 创伤性主支气管断裂的诊断和外科治疗被引量：5
- 2004年
- 目的总结外伤性主支气管断裂的诊断和外科治疗效果。方法X片和CT以及支气管镜是诊断支气管断裂的主要方法。结果11例均行支气管断端吻合,术后肺膨胀良好,肺功能基本恢复。结论主支气管断裂的病人诊断一旦成立,尽可能外科治疗,且疗效满意。
- 赵永祥胡冬煦胡景云刘斌杨进福张权朱越
- 关键词：支气管断裂X线检查CT诊断支气管镜检手术时机
- 自体宫颈癌-树突细胞疫苗激活的CTL杀伤效应被引量：32
- 2006年
- 背景与目的:树突细胞(dendriticcells,DC)是目前已知的功能最强的抗原递呈细胞(antigen-presentingcell,APC),它可以在体内、外向T淋巴细胞递呈抗原,并诱发细胞毒T淋巴细胞(cytotoxicTlymphocyte,CTL)反应。本研究旨在探讨负载自体宫颈癌抗原的DC体外激发的CTL对自体宫颈癌细胞的杀伤效应。方法:先冻融宫颈癌细胞制备抗原,然后以GM-CSF、IL-4诱导自体外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)获得DC并负载抗原,刺激自体T淋巴细胞制备宫颈癌抗原特异性CTL,观察CTL对宫颈癌细胞的杀伤活性。结果:负载自体宫颈癌抗原DC诱导的特异性CTL对自体宫颈癌细胞的体外杀伤率高达79.32%～89.27%,显著高于淋巴因子激活的杀伤细胞(lymphokine-activatedkillingcells,LAK)的杀伤率(t≥2.89,P<0.05);且对宫颈癌HeLa细胞株具有一定杀伤效应(40.35%～58.09%),但低于自体癌细胞组(t≥2.97,P<0.05);特异性CTL对HepG2、MCF7、A549、MGC803细胞无明显杀伤效应。结论:自体宫颈癌-树突细胞疫苗体外诱导的CTL具有高效而特异的抗自体宫颈癌细胞免疫活性,可望成为宫颈癌生物治疗的一个有力手段。
- 周昌菊马薇周建大赵永祥谢慧清
- 关键词：宫颈肿瘤树突细胞细胞毒性淋巴细胞杀伤活性
- 长疗程倍他乐克治疗对慢性心力衰竭患者左心室重塑和功能的影响被引量：2
- 2004年
- 目的探讨倍他乐克治疗对慢性充血性心力衰竭患者左心室重塑和功能的影响。方法61例慢性充血性心力衰竭患者随机分为治疗组和对照组,对照组常规给予抗心衰治疗。治疗组加服倍他乐克,治疗前和治疗6个月后观察左心室结构和功能指标的变化。结果治疗组左心室结构和功能均有明显改善,与对照组相比,左心室射血分数和心输出量明显增加(P<0.05)。结论在强心、利尿。
- 胡景云赵永祥胡冬煦杨进福朱利军阳国平
- 关键词：慢性充血性心力衰竭倍他乐克左心室重塑心脏功能
- 异种移植供体猪α-1,3GT基因打靶引导序列获得及其染色体定位被引量：1
- 2002年
- 目的 :为阻止异种抗原靶分子的生成 ,抑制或减轻HAR发生 ,试图对异种抗原的合成酶α - 1,3GT基因进行打靶灭活 ,以产生α - 1,3GT表型缺乏且具有抗HAR反应能力的异种供体 (猪 )。方法 :以α - 1,3GT基因的cDNA片段为探针 ,采用噬菌斑原位杂交结合PCR技术筛选猪gDNA文库 ,经酶切、Southern杂交、测序鉴定所得片段 ,并采用荧光原位杂交定位。结果 :获 7个片段 ,均在 8kb以上 ,且包含第三内含子 ,其中 3个片段测序证实包括第三、第四外显子 ;荧光原位杂交证实该基因位于猪染色体 1q2 .10～q2 .11。结论 :研究表明所得片段可作为该基因打靶引导序列 ,染色体定位明确了基因打靶位点 ,PCR技术可以用于快速筛选
- 杨进福胡冬煦杨一峰赵永祥潘乾薛志刚夏家辉
- 关键词：染色体原位杂交异种抗原急性排异反应
