郑丽雅
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 鸭乙型肝炎病毒cccDNA TaqMan荧光定量PCR的建立
- 本文用PUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染TOP10菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在DHBV基因组负链两侧设计一对引物间设计和荧光标记一段TaqMan探针,严格优化反应物的组成和护增条件,建立了DHBV...
- 傅美丽林青刘小朋施水兰陈少华郑丽雅林福海李东良陈紫榕
- 关键词：乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸荧光定量PCR
- 文献传递
- 鸭乙型肝炎病毒cccDNA Taq Man荧光定量PCR的建立被引量：1
- 2007年
- 目的建立鸭乙型肝炎病毒(DHBV)cccDNA TaqMan荧光定量PCR方法。方法用pUCm-T载体和PCR纯化产物连接,转染TOP10菌,筛选阳性菌落,提取质粒,制作外标准品;在DHBV基因组负链两侧设计一对引物,并在引物间设计和荧光标记一段TaqMan探针,严格优化反应物的组成和扩增条件,建立了DHBV cccDNA TaqMan荧光定量PCR方法。结果最低可检出10~4拷贝/ml;批内误差为0.2%～3.14%,批间误差为2.22%～4.43%;在10~5～10^(12)拷贝/ml之间与C_t值具有很好的线性[Ct=-2.8361 ln(x)+41.45,r=-0.9985]。结论该法是一种灵敏度高、特异性强、较为简便的DHBV cccDNA定量检测技术。
- 付美丽林青刘小朋施水兰陈少华郑丽雅林福海李东良陈紫榕
- 关键词：乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸共价闭合环状
