马素贞
- 作品数：53 被引量：158H指数：8
- 供职机构：新疆农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 牛环形泰勒虫巢式PCR诊断方法的建立被引量：10
- 2008年
- 根据GenBank上发表的环形泰勒虫Tamsl基因序列设计2对巢式引物，成功建立了环形泰勒虫病的巢式PCR快速检测方法。验证试验结果表明，PCR扩增产物测序结果与GenBank收录的Tamsl序列同源性在92％～99％，对环形泰勒虫检测具有良好的特异性、重复性以及灵敏度。对新疆焦虫病疫区牛群血样检测发现，巢式PCR检出率为62．2Yoo（61／98），高于常规PCR检出率（58．2％，57／98）和血涂片镜检检出率（35．7％，35／98），提示该巢式PCR方法可用于大规模的环形泰勒虫病的流行病学调查。
- 简子健黄家雨马素贞王晓萍袁江玲苏贵成苗中秋沈炯玉张兰江李晓军
- 关键词：牛环形泰勒虫巢式PCR
- PRRSV新疆分离株的ORF5序列分析与同源性比较被引量：1
- 2008年
- 采用RT—PCR技术，分别对PRRSV新疆分离株XJ—a，XJ—b，XJ—C的ORF5片段的ORF5基因进行扩增，获得长度为603bp的特异性目片段。ORF5片段序列分析表明，新疆3个分离株的ORF5基因与欧洲型PRRSV毒株序列核苷酸的同源性为56．1％～56．4％，与标准美洲型PRRSV毒株序列的核苷酸同源性达到86．6％～87．2％，与国内部分省市流行株的同源性在96．0％～99．2％。PRRSV新疆分离株属于北美洲型PRRSV的变异毒株，属同一亚型，毒株间也存在一定的差异，具有高度致病性的生物学特征。
- 苏贵成盛卓君马素贞胡峻王薇袁江玲黄家雨简子健
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒同源性比较
- 牛双芽巴贝斯虫巢式PCR诊断方法的建立被引量：2
- 2010年
- 【目的与方法】根据Genbank上登陆的双芽巴贝斯虫HSP20基因设计两对引物,SHSP-P1与SHSP-P2和SHSP-P3与SHSP-P4,以其建立牛双芽巴贝斯虫巢式PCR快速检测方法。【结果】第一次、第二次扩增的退火温度均为57℃,分别扩增出约631和409 bp的条带,与预期的大小相符,而作为对照样本的牛巴贝斯虫、牛环形泰勒虫基因组DNA均无此扩增目的条带出现。将感染双芽巴贝斯虫的全血基因组DNA做10倍递减稀释到106倍扩增时,巢式PCR还能见到目的条带,其灵敏度相当于4.6 pg/mL全血基因组DNA。在对50份疫区牛全血DNA样本检测中,阳性检出率分别为22%(11/50)。【结论】所建立的牛双芽巴贝斯虫巢式PCR方法准确、敏感、特异,可以用于牛双芽巴贝斯虫病的快速检测和小范围的流行病学调查,具有重要的临床意义。
- 简子健马素贞孙其吉吉沈炯玉苗中秋吕伟
- 关键词：巢式PCR
- 新疆克拉玛依地区奶牛隐性乳房炎病原菌的分离鉴定被引量：18
- 2008年
- 用兰州乳房炎检测试剂(Lanzhou mastitis test,LMT)对克拉玛依规模化奶牛场进行了奶牛隐性乳房炎流行病学调查。结果显示,该地区奶牛隐性乳房炎的发病率为70.43%(543/771)。对543份阳性牛乳样品进行了病原菌的分离鉴定,结果发现,阳性乳样品中细菌分离率达89.13%(484/543),葡萄球菌、链球菌、肠杆菌和棒状杆菌为主要致病菌,且多为几种致病菌的混合感染。
- 简子健马素贞袁江玲李军金鑫白丽朱维杜振昆王登峰夏俊颜焰黄家雨
- 关键词：隐性乳房炎致病菌奶牛
- 新疆高致病性猪蓝耳病病毒分离与鉴定被引量：6
- 2008年
- 从新疆发病仔猪的肺脏和淋巴结内体内分离到1株PRRSV病毒。该病毒能直接在Marc-145细胞上生长,继代培养72 h后产生细胞病变(CPE)。经特异性荧光抗体和ELISA检测均为阳性,RT-PCR方法能扩增出该病毒的400 bp的特异性片段。从该病的流行病学、临床症状、病理学、病原的生物学特征来看,该分离株为猪繁殖与呼吸综合症病毒的变异株。这一结果提示PRRSV毒株变异是引起新疆地区猪场母猪、仔猪大量发病死亡的重要原因,必须引起各级兽医部门和猪场的高度重视。
- 简子健盛卓君苏贵成马素贞王晓萍胡峻王薇马晓艳冉多良
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒变异株
- 新疆成年绵羊对口蹄疫Asia-Ⅰ型与O型二价灭活疫苗免疫效果观察
- 2008年
- 与牛和猪的口蹄疫（foot—and—mouth disease，FMD）相比，绵羊FMD通常不表现出明显的临床症状，但其在FMD流行病学中的传播作用不可低估。本研究选择有免疫接种史的成年绵羊来验证3种FMD二价灭活疫苗的免疫效果，并进行跟踪免疫监测。实验结果表明，3种疫苗免疫绵羊30d后，所有被检绵羊的血清0型和Asia一工型ELISA抗体滴度≥lg2．19，在此后的不同检测时间段分别达到峰值，随后下降，免疫150d时，被检绵羊的0型和Asia-Ⅰ型ELISA抗体滴度仍维持在lgl．86～lg2．20。实验结束时，3种疫苗的O型ELISA抗体合格率≥70％，Asia-Ⅰ型ELISA抗体的合格率≥80％，均达到了国家标准。这些结果提示，在我国FMD防控计划中，对有免疫接种史的成年绵羊每年2次接种二价灭活FMD疫苗是可行的。
- 简子健马素贞吕春华
- 关键词：免疫监测ELISA抗体
- 检测牛轮状病毒抗体间接ELISA方法的建立与应用被引量：1
- 2008年
- 以田间分离的轮状病毒CHLY(G6型)作为抗原,建立了犊牛轮状病毒(BRV)抗体检测与监测的间接ELISA方法。田间监测牛轮状病毒感染率为32.91%(26/79),疫苗源性抗体高峰出现在二次免疫后第40天至第60天,抗体持续期为3个月。该方法可用于粪便、血清样品的检测,具有特异性强、快速简便等优点,适合于对轮状病毒特异性抗体的动态监测和批量检测。
- 曹竹亭马素贞高文斌王晓萍袁江玲黄家雨苏贵成简子健
- 关键词：轮状病毒间接ELISA抗体效价
- RT-PCR检测CPIV方法的建立与应用被引量：3
- 2011年
- 【目的】建立CPIV的RT-PCR检测方法。【方法】从临床上疑似犬副流感(CPI)的犬鼻腔分泌物中提取CPIV总RNA。根据Genebank中收录的CPIV(序列号AY581307)中NP基因保守序列,设计一对特异性引物,扩增出667 bp片段,以此建立CPIV的RT-PCR检测方法。【结果】特异性试验表明该引物不能扩增犬其它常见的传染病病毒基因。敏感性试验表明该引物能检测到10^(-6)的CPIV总RNA量。重复性试验表明该引物具有良好的稳定性和重复性。对临床采集的32份样品进行RT-PCR检测时,阳性率为53.12%。【结论】实验建立了CPI的RT-PCR检测方法,可适合于临床CPIV的早期快速诊断和小规模的分子流行病学调查。
- 简子健马素贞刘腾飞翟少华赵森
- 关键词：犬副流感病毒NP基因反转录聚合酶链反应早期快速诊断
- 狂犬病病毒SRV_9突变株的构建与拯救
- 2010年
- 为构建人工修饰的狂犬病病毒,首先用人细胞色素C基因替换狂犬病病毒SRV9株基因间隔区中的非必需区域Ψ区并缺失基因组全长cDNA的糖蛋白CD编码区,得到突变型SRV9cDNA质粒。然后,该质粒与表达野生型SRV9四种结构蛋白N、P、G和L的质粒共转染BHK-21细胞。免疫荧光试验显示转染细胞中有大量特异性荧光,电子显微镜观察可见大量典型的狂犬病病毒粒子。上述结果表明已成功地拯救出了人工修饰的狂犬病病毒。狂犬病病毒SRV9突变株的成功构建与拯救,为新型狂犬病减毒活疫苗的研究提供了重要的实验工具。
- 魏玉荣易忠符子华马素贞简子健胡尔玛西
- 关键词：拯救
- 犬细小病毒VP2基因的克隆表达与免疫印迹分析被引量：1
- 2010年
- 根据基因库已发表犬细小病毒序列设计合成了VP2基因的1对特异引物,以细小病毒感染的犬粪样品中提取的总DNA为模板,进行PCR扩增。把扩增产物克隆至pMD18-T载体进行测序、鉴定。将克隆的VP2基因片段克隆至原核表达载体pGEX-4T-2,再将构建成功的原核表达质粒载体pGEX-4T-2-VP2转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,进行鉴定、测序、表达。结果表明,克隆的VP2基因片段全长1 755 bp,与13个VP2基因序列的同源性为98.4%～99.8%。系统进化树分析表明,所克隆的VP2 CSN830611序列同日本株(AB054222)、意大利株(AF306445)的进化途径一致。Western-blotting分析显示,表达产物为90 kD的融合蛋白,可被犬细小病毒阳性血清所识别,具有良好的反应原性。
- 陈胜男马素贞陶玉成申卫红刘腾飞简子健
- 关键词：犬细小病毒VP2基因克隆原核表达反应原性
