高前应
- 作品数：67 被引量：229H指数：9
- 供职机构：中山大学中山眼科中心更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学自动化与计算机技术更多>>
- 基于Gullstrand-Emsley和Liou-Brennan模型眼的四种人工玻璃体引起的屈光状态改变
- 高前应陈翔葛坚刘永基蒋招信林智刘亚琴
- 诱导骨髓间质干细胞分化为角膜上皮样细胞的初步研究被引量：18
- 2007年
- 目的:观察人骨髓间质干细胞(MSCs)移植到兔角膜基质后的分化发育情况,探讨MSCs分化为角膜上皮细胞的可行性。方法:24只新西兰兔随机分为2组。实验组:将人MSCs接种在保存人羊膜上培养4d,用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后移植到兔角膜基质;对照组:采用保存羊膜移植到兔角膜基质。分别于移植后1、2、3、4、6和8周,摘取各组实验眼行组织学和免疫组织化学检查,检查移植到兔角膜基质的MSCs的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况;免疫组织化学检测移植到角膜基质的带有BrdU标记的细胞角蛋白K3/12(CK3/CK12)和角蛋白K13(CK13)的表达。结果:MSCs接种到羊膜后能在羊膜上生长,与羊膜共培养4d后,MSCs贴附羊膜生长迅速,组织学特征无明显改变。羊膜负载MSCs移植到兔角膜基质表面,术后免疫组织化学检测角膜上皮层CK3/CK12表达阳性,CK13表达阴性,在重建的角膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞并同时表达角膜上皮细胞特异性表面标志蛋白K3/K12,未发生免疫排斥反应,未见异常增殖细胞。结论:羊膜负载MSCs移植到兔眼表角膜基质后,MSCs能存活、增殖并向角膜上皮样细胞分化。
- 黄丹平葛坚高楠卢蓉高前应
- 关键词：骨髓间质干细胞羊膜上皮角膜细胞分化
- 眼调节各因素与眼屈光不正的相关性被引量：39
- 2003年
- 目的 :评价与眼屈光不正状态可能相关的各项眼调节功能状况 ,探讨眼屈光不正与眼调节之间的相关性。方法 :分别对 4 7名学生 94只眼进行屈光不正、调节幅度、调节灵敏度、调节准确度 (双眼交叉柱镜FCC法 )检查。然后将各项结果与屈光不正状况进行相关性统计分析。结果 :被检者的屈光不正度平均值为 (- 2 .4 6± 2 .2 8)D ,调节幅度均值为(7.90± 2 .95 )D ,调节灵敏度为 (17.2 8± 4 .92 )次 /min ,调节准确度均值为 (0 .5 8± 0 .6 0 )D ,其中调节幅度与眼屈光度有显著相关性 (r=0 .377,P≤ 0 .0 5 ) ;调节准确度与眼屈光度有显著相关性 (r=- 0 .4 71,P≤ 0 .0 5 )。结论 :眼的屈光不正与眼调节幅度和眼调节滞后量有显著相关 ;眼的调节灵敏度与屈光不正无明显关系。提示我们可通过训练调节幅度和准确度来减缓近视加深。
- 林智高前应黄娟王颂科陈翔
- 关键词：眼屈光不正近视
- 地塞米松磷酸钠球周和球后注射后在兔眼内的分布被引量：1
- 2014年
- 目的观察地塞米松磷酸钠(DEXP)经球周和球后注射后在血清以及眼部的分布情况。方法将18只新西兰兔随机分为球周注射组和球后注射组,每组9只,分别予右眼球周、球后注射DEXP 2.5 mg(0.5 mL);在注射后第3、7、14天采用超高效液相色谱串联质谱法、检测兔眼各组织中的DEXP。结果在注射后第3、7、14天,两组血清、房水、玻璃体中均未能检测到DEXP,角膜和晶状体中都仅检测到微量DEXP,而虹膜、睫状体、视网膜和脉络膜均检测到较高浓度的DEXP;且注射后第3天球后注射组脉络膜中DEXP浓度为(466±152)ng/g,高于球周注射组的(92±33)ng/g(P<0.05);注射后第7天,球后注射组兔虹膜、睫状体和视网膜中DEXP浓度分别为(441±132)、(346±46)、(965±283)ng/g,明显高于球周注射组的(185±62)、(133±116)、(92±24)ng/g(均P<0.05)。结论球周和球后注射DEXP溶液14 d内可在兔视网膜、脉络膜、睫状体和虹膜中达到较高的药物浓度,且球后注射较球周注射可在眼后段达到更高的药物浓度。
- 黄珍周玉婷谢智勇高前应
- 关键词：地塞米松超高效液相色谱串联质谱法
- 蛋白激酶C_α在小鼠胚胎干细胞诱导分化为神经样细胞中的表达变化被引量：2
- 2004年
- 目的:研究小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)定向诱导分化为神经样细胞过程中蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)的表达变化,探讨可能涉及ESC定向分化的信号机制。方法:ES-D3细胞株用不含小鼠白血病抑制因子(mouse leukemia inhibitory factor,mLIF)的ESC培养液培养4 d,形成胚胎体(embryoid bodies,EBs),再分别种植于预置有盖玻片的6孔板和直径100 mm的培养皿,经5×10-7mol/L维甲酸(retinoic acid,RA)诱导后,用神经特异性烯醇化酶(NSE)和NF-200来鉴定分化细胞的类型,在诱导后第1、3、5、7和14天用Western印迹和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测PKCα亚型的表达变化。结果:诱导前免疫组化发现PKCα在ES-D3细胞有广泛的棕黄色的阳性表达,以细胞浆和细胞膜最明显:Western印迹发现PKCα出现一条蛋白印迹条带,分子量约为84 kD;诱导后第3天,NSE和NF-200开始表达,第7天达到高峰:诱导后Western印迹和RT-PCR方法都显示PKCα表达量急剧下降,以后逐渐升高,至第14天基本恢复至正常水平。结论:在RA诱导ESC定向分化为神经样细胞过程中,PKCα有独特的时空表达特点,它可能对ESC的分化有非常重要的调控作用。眼科学报2004;20:107-112.
- 高前应葛坚王智崇陈慧怡黄丹平袁钊辉
- 关键词：蛋白激酶CΑ胚胎干细胞神经样细胞信号机制
- 蛋白激酶C亚型在小鼠胚胎干细胞中的表达研究被引量：2
- 2003年
- [目的]研究5种蛋白激酶C(PKC)亚型PKC_α、PKC_β、PKC_γ、PKC_δ和PKC_ε在小鼠胚胎干细胞(ES细胞)株ES-BALB/c的表达情况。[方法]ES-BALB/c细胞株用普通ES细胞培养液培养,分别种植于预置有盖玻片的6孔板和直径100mm的培养皿,培养2d和4d后分别进行PKC亚型免疫组织化学和Western印迹检测。[结果]免疫组化发现PKC_α在ES-BALB/c细胞有广泛的棕黄色的阳性表达,以细胞浆和细胞核最甚,而PKC_β、PKC_γ、PKC_δ和PKC_ε4种亚型无明显表达;Western印迹发现PKC_α出现一条蛋白印迹条带,分子质量约为84ku,而PKC_β、PKC_γ、PKC_δ和PKC_ε4种亚型无蛋白印迹条带。[结论]PKC_α在ES细胞阶段即有表达,在将来的细胞分化阶段可能有非常重要的作用,而PKC_β、PKC_γ、PKC_δ和PKC_ε4种亚型在ES细胞阶段没有表达。
- 高前应葛坚王智崇杨智宽黄丹平袁钊辉陈慧怡陶靖
- 关键词：胚胎干细胞蛋白激酶C蛋白表达WESTERN印迹法
- 聚乙烯醇水凝胶模拟自然玻璃体的实验研究被引量：2
- 2018年
- 目的筛选与自然玻璃体性能相似的聚乙烯醇[poly(vinyl alcohol),PVA]水凝胶,为探索寻找新的玻璃体替代物提供依据。方法采用γ-射线(Co^(60))辐照交联得到1%PVA水凝胶、3%PVA水凝胶、7%PVA水凝胶。通过检测PVA水凝胶的物理光学性能(比重、含水率、透光率、屈光率、p H值、溶胀性能)和流变性能及细胞毒性,筛选与自然玻璃体性能相似的PVA水凝胶。结果 (1)物理光学性能:1%PVA水凝胶的含水率、屈光指数、透光率、p H值、比重分别为98.90%、1.335 5、94.80%、7.22、1003.9 g·L^(-1);3%PVA水凝胶的各指标分别为98.10%、1.336 1、93.20%、7.25、1014.4 g·L^(-1);7%PVA水凝胶的各指标分别为93.50%、1.342 5、88.20%、7.41、1114.7 g·L^(-1),3%PVA和1%PVA水凝胶与自然玻璃体有相似的光学物理性能。(2)流变性能:三种浓度PVA水凝胶储存模量(G')均大于损耗模量(G″),表明三种物质均为有黏弹性能的凝胶体,且其弹性性能大于黏性性能。1%PVA:G'、G″分别为(3.2±1.1)Pa、(0.8±0.5)Pa;3%PVA:G'、G″分别为(6.1±1.3)Pa、(1.3±0.9)Pa;7%PVA:G'、G″分别为(106.5±18.6)Pa、(18.3±12.8)Pa。在顺应性方面,7%PVA>3%PVA>1%PVA;在蠕变方面,3%PVA>7%PVA>1%PVA。(3)细胞毒性:MTT比色实验结果显示细胞在1%PVA、3%PVA、7%PVA浸泡液中培养72 h后,各组间吸光度(A值)值比较差异均无统计学意义(均为P>0.05),表明三种水凝胶均无明显细胞毒性,拥有良好的生物相容性。结论 3%PVA水凝胶具有与自然玻璃体相似的光学、物理和流变性能,拥有良好的生物相容性,能很好地模拟自然玻璃体的性能。
- 冯松福陈晗陆晓和高前应
- 关键词：聚乙烯醇水凝胶玻璃体替代物
- 羊膜和结膜基质诱导胚胎干细胞分化为上皮样细胞的初步研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察小鼠胚胎干细胞在保存人羊膜及兔眼表结膜基质上分化的情况。方法36只新西兰兔随机分为3组,每组12只。A组:将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的小鼠ES-GFP细胞用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后行实验兔结膜下移植;B组:将小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜上共培养4d,用BrdU标记后移植到实验兔结膜缺损区;C组:采用保存羊膜移植到实验兔兔结膜缺损区。分别于移植后1、2、3、4,6和8周,摘取各组实验眼行荧光显微镜、组织学和免疫组织化学检查,荧光检测ES-GFP细胞在组织中的荧光表达,组织学检查移植到结膜基质的ES-GFP细胞的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况;免疫组织化学检测移植到结膜基质的带有BrdU标记的ES-GFP细胞CK3/CK12和CK13的表达。结果小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜后能在羊膜上贴附生长,与羊膜共培养4 d后部分ES-GFP细胞分化为多角形上皮样细胞,免疫组化显示β1整合素阳性。将负载有ES-GFP细胞的羊膜移植到兔结膜缺损区,术后荧光显微镜可在结膜上皮层检测到绿色荧光带,免疫组织化学检测结膜上皮层CK13表达阳性,CK3/CK12表达阴性,在重建的结膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞,未见异常增殖细胞。结论采用保存人羊膜负载小鼠ES细胞行兔结膜移植,小鼠ES细胞能在兔结膜基质存活并增殖。
- 黄丹平葛坚高前应卢蓉郑健樑
- 关键词：胚胎干细胞羊膜结膜上皮细胞
- 胚胎干细胞联合羊膜移植治疗早期严重眼化学伤的实验研究被引量：6
- 2005年
- 【目的】探讨应用胚胎干细胞联合羊膜移植治疗早期严重眼化学伤。【方法】将培养的表达绿色荧光蛋白的胚胎干细胞(ES—GFP细胞)接种于羊膜,5-溴脱氧尿嘧啶(Brdu)标记后对严重化学伤模型眼行胚胎干细胞羊膜移植,实验共分3组,对照组、单纯羊膜移植、羊膜+ES细胞移植组,每组12只12眼,通过荧光示踪、病理学、免疫组织化学等检查,观察胚胎干细胞的生长分化和移植治疗效果。【结果】ES-GFP细胞能贴附在羊膜上呈集落状生长,移植治疗术后第14天,角膜溃疡穿孔:对照组5眼、单纯羊膜移植2眼、羊膜+ES细胞移植组0眼,对照组和羊膜+ES细胞移植组比较,P=O.037<0.05:角膜新生血管和角膜混浊:对照组、单纯羊膜7植组和羊膜+ES细胞移植组得分分别为3.57±0.53,2.20±0.41,1.40±0.36,和3.72±0.49.2.8±0.42,2.25±0.45, 羊膜+ES细胞移植组与对照组和单纯羊膜移植组比较P均<0.01:病理学等检查羊膜+ES细胞移植组:角膜表面羊膜呈均匀红染的纤维样结构,羊膜下多层上皮样细胞,角膜基质少量细胞浸润,新生血管少见,后弹力层轻度肿胀,上皮细胞.AE-5染色阳性,细胞核内可见BrdU阳性颗粒,荧光显微镜检查角膜上皮层可见绿色荧光带。【结论】以羊膜为载体培养ES细胞,移植到早期严重眼化学伤的眼表,ES细胞诱导分化为角膜上皮样细胞。
- 龙崇德葛坚高前应袁钊辉陶靖喻瓴
- 关键词：胚胎干细胞羊膜眼化学伤
- 多巴胺对兔实验性形觉剥夺性近视形成的影响被引量：13
- 2001年
- 目的研究多巴胺对实验性近视形成的影响。方法 ７日龄幼兔 ５２只，分 Ａ，Ｂ，Ｃ ３组。 Ａ组 ２０只，单纯缝合眼睑；Ｂ组１６只，缝合眼睑＋玻璃体内注射多巴胺；Ｃ组１６只，缝合眼睑＋玻璃体注射生理盐水。结果Ａ，Ｃ两组中两眼玻璃体腔长度、眼轴长度和玻璃体腔长度／眼轴长度间均有非常显著的统计学差异（Ｐ＜０．００１），前房深度和晶状体厚度无统计学差异。巩膜胶原纤维在Ａ，Ｃ两组中明显变细，而在Ｂ组中改变较轻。结论形觉剥夺能导致眼球的轴性延长，玻璃体腔延长和ＶＣＬ／ＡＬ增大是其形态学原因，巩膜纤维的变细、延长是其病理学原因之一，而多巴胺能部分阻止这些改变。
- 高前应高如尧王培杰郭延奎卢佩勇蒙艳春朱涛李力
- 关键词：多巴胺形觉剥夺近视
