黄丽红
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院人兽共患病防控制剂国家地方联合工程实验室更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 一株H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Guangdong/W8/2011(H4N6)的全基因组测序及遗传进化分析被引量：2
- 2013年
- 为了解H4N6亚型禽流感病毒A/duck/Guangdong/W8/2011(H4N6)的来源、特征及分子演化规律,对该病毒进行了全基因组序列扩增,结合GenBank中已收录的H4N6亚型流感病毒及其他相关毒株序列进行了遗传进化分析。结果显示,该病毒的HA基因裂解位点附近的氨基酸序列为PEKASR↓GLF,符合典型低致病性禽流感病毒的特征。该病毒的HA、NA、PB2、PA和M基因与我国周边国家和地区的H4N6毒株亲缘关系较近,而其PB1、NP和NS基因与国内不同亚型的禽流感毒株亲缘关系较近;同时这些周边国家和地区均是候鸟迁徙的重要栖息地,这表明A/duck/Guangdong/W8/2011(H4N6)可能是由国外H4N6毒株随候鸟迁徙传入我国,并在鸭体内与其他禽流感毒株发生基因重组形成的重组病毒。
- 张长辉亓文宝田进李华楠黄丽红焦培荣徐成刚廖明
- 关键词：禽流感病毒进化分析
- H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法的建立被引量：5
- 2015年
- 【目的】H9亚型禽流感是重要的人兽共患性传染病,该亚型病毒为H7N9亚型和H10N8亚型流感病毒提供了6个内部基因(PB2、PB1、PA、NP、M、NS),并且一直处于动态重组过程中。因此,建立针对H9亚型禽流感的型特异性电化学发光免疫的高通量快速检测方法,加强H9亚型流感的监测,具有重要意义。【方法】用钌联吡啶标记H9亚型AIV的单克隆抗体,用MPI-E型电致化学发光分析系统评价钌标单抗标记效率;用生物素标记H9亚型AIV的多克隆抗体,HABA法检测抗体生物素化的效率;待测抗原与钌标单抗作用1 h后,将此抗原-抗体复合物与通过生物素-链霉亲和素系统固定在磁微球表面的多克隆抗体反应,最后加入反应底物三丙胺后即可在电化学分析系统进行发光检测。优化生物素化多抗和钌标单抗最佳工作浓度,确定临界值和反应谱,对所建立的方法进行敏感性、特异性和重复性试验。攻毒后3 d和5 d,采集攻毒组和空白对照组鸡只的88份咽拭子和肛拭子,分别用电化学发光免疫检测方法和鸡胚病毒分离法进行检测和比较。【结果】钌标抗H9亚型AIV单克隆抗体的标记效率为每个单抗Ig G分子上结合21个Ru2+,且间接免疫荧光方法证明其仍具有生物活性;生物素化兔抗H9N2亚型AIV多克隆抗体的标记效率为每个Ig G分子上结合了6个生物素分子,且Western blotting试验证明其仍保持生物活性;该方法的检测临界值为28.3,可疑区间为23.4—33.2;阴性和阳性变异系数均小于10%;检测限为5×104EID50,能够特异性地检测H9亚型AIV,不与其他亚型流感病毒(H1、H3、H4、H5和H6亚型)和其他类型的禽源病毒(NDV、IBV和IBDV)反应。3 h内即可完成检测,与鸡胚病毒分离法的符合率为86.4%。【结论】所建立的H9亚型AIV型特异性电化学发光免疫检测方法可以用于临床样品检测,对H9亚型禽流感的监测和防控具有重要意义。
- 亓文宝李芳李华楠黄丽红和君穆光慧罗开健廖明
- 关键词：H9亚型禽流感
