黄晓慧
- 作品数：12 被引量：47H指数：4
- 供职机构：安徽农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家级星火计划安徽省高等学校省级质量工程项目安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 22株猪圆环病毒2型安徽分离株全基因组遗传进化分析被引量：4
- 2021年
- 为了解安徽地区猪圆环病毒2型(PCV2)的分子流行病学及流行毒株遗传变异情况,本研究应用DNA Star软件,针对22株PCV2安徽分离株和26株Gen Bank登录的PCV2参考毒株,进行全基因组核苷酸序列、ORF1和ORF2核苷酸序列及其推导的氨基酸序列的同源性分析,并运用MEGA 6.0软件构建系统进化树。结果显示,22株PCV2安徽分离株基因组全长均为1 767 bp,相互之间的核苷酸序列相似度为94.6%~99.8%,与Gen Bank登录的26株PCV2参考毒株之间的核苷酸序列相似度为92.4%~99.8%。PCV2安徽分离株的ORF1核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与参考毒株之间的相似度分别为94.3%~100%和85.4%~100%,ORF2核苷酸序列及其推导的氨基酸序列相似度分别为85.9%~99.9%和76.9%~100%。ORF2编码的Cap蛋白氨基酸序列在8~30、44~91、121~140及190~224几个区域存在突变,且有部分变异位点位于抗原表位区。22株PCV2安徽分离株分布于两个基因亚型,8株属于PCV2b,14株属于PCV2d。结果表明,PCV2安徽分离株的全基因组核苷酸序列较稳定且彼此间亲缘关系密切。ORF2的变异程度远高于ORF1,PCV2d基因亚型已经逐渐过渡成为安徽地区的主要流行毒株。Cap蛋白氨基酸序列在免疫反应区域内的变异可能影响PCV2的免疫原性。本研究结果丰富了安徽地区猪圆环病毒病的分子流行病学资料,同时也为有效防控该病提供了一定的参考依据。
- 黄晓慧程琼程琼王勇魏建忠孙裴
- 关键词：猪圆环病毒2型全基因组ORF2
- 某猪场腹泻仔猪沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验被引量：7
- 2014年
- 针对安徽某猪场腹泻仔猪,分别采集5头不同窝的肛拭子和肠道内容物样品,利用常规法结合PCR技术进行沙门氏菌的分离鉴定,玻片凝集试验和ERIC-PCR技术确定分离株的血清型与基因型,标准K-B纸片法进行20种抗生素敏感试验。结果显示,4头腹泻仔猪(4份肠道内容物样品、1份肛拭子样品)均分离到沙门氏菌,阳性检出率为80%,涉及明斯特沙门氏菌、纽兰沙门氏菌、新斯托夫沙门氏菌和乌干达沙门氏菌4种血清型,其中1头同时检出4种血清型沙门氏菌;8株沙门氏菌分离株为同一基因群,分属2个基因型,亲缘关系较近,对20种抗生素均敏感。结果表明,该猪场仔猪腹泻与不同血清型沙门氏菌的混合感染有一定的关系,母猪的清洁卫生与猪舍的消毒到位不容忽视,临床上常用抗生素可用于防治或减缓仔猪腹泻的发生。
- 谢倩姚明黄晓慧陆萍焦安心孙裴魏建忠李郁
- 关键词：腹泻仔猪沙门氏菌血清型基因型药敏试验
- 副猪嗜血杆菌安徽分离株的耐药性与转铁结合蛋白A免疫原性研究
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilusparasuis，HPS)是猪上呼吸道的一种共栖菌，在特定条件下可侵入机体而引起严重的以多发性浆膜炎、关节炎、脑膜炎、肺炎、高热及高死亡率为主要特征的全身性疾病，被称为副猪嗜血杆菌病或...
- 黄晓慧
- 关键词：副猪嗜血杆菌耐药性免疫原性多发性浆膜炎
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌转铁结合蛋白A基因的分段表达及其免疫原性分析被引量：3
- 2011年
- 本研究旨在获得副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)转铁结合蛋白A基因(tbpA)的表达产物(TbpA),并对其免疫原性进行分析鉴定。采用生物信息学方法预测HPS的TbpA抗原表位,根据GenBank上发表的HPS(SH0165株)tbpA的核苷酸序列设计合成3对引物,用PCR从安徽省HPS分离株(LJ3)tbpA中分段扩增出tbpA1、tbpA2和tbpA3,并连接到pET-32a(+)载体上,经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定和测序确认,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中,进行IPTG诱导表达。利用SDS-PAGE检测目的蛋白,Western blotting分析重组蛋白的免疫活性;通过小鼠免疫攻毒保护试验和血清杀菌力试验,鉴定重组蛋白的免疫原性以及诱导机体产生保护性免疫反应的能力。结果表明,从HPS(LJ3)tbpA中扩增出与预期设计的1 140、897、666bp大小相符的3个片段(tbpA1、tbpA2、tbpA3),扩增产物连接载体得到重组质粒,在大肠杆菌中实现表达,获得大小为62、54、44ku的目的蛋白(rTbpA1、rTbpA2、rTbpA3),均能与HPS阳性血清反应。rTbpA1与甲醛灭活菌体对小鼠免疫攻毒的保护率分别为20%和40%,但rTbpA1引起小鼠平均死亡时间显著延迟,兔抗rTbpA1与兔抗HPS(LJ3)血清具有同样显著的杀菌活性。结果显示,成功表达的rTbpA1、rTbpA2、rTbpA3均具有良好的反应原性,其中rTbpA1更具有良好的免疫原性以及诱导机体产生保护性免疫反应的能力,可望成为副猪嗜血杆菌病疫苗和血清学检测的候选成分。
- 辛伟李郁黄晓慧魏建忠
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 某猪场腹泻仔猪沙门氏菌的分离鉴定与药敏试验
- 针对安徽某猪场仔猪腹泻病例,分别采集5头不同窝的肛拭子和肠道内容物样品,利用常规法结合PCR技术进行沙门氏菌的分离鉴定,玻片凝集试验和ERIC-PCR技术确定分离株的血清型与基因型,标准K-B纸片法进行20种抗生素敏感试...
- 姚明黄晓慧陆萍焦安心孙裴魏建忠李郁
- 关键词：腹泻仔猪沙门氏菌血清型基因型药敏试验
- 文献传递
- 安徽部分地区规模化猪场伪狂犬病血清流行病学调查被引量：14
- 2017年
- 为了解安徽地区不同规模猪场猪伪狂犬野毒(PRV-gE)的感染情况,为防控猪伪狂犬病(PR)提供科学依据,本调查应用ELISA方法,对2012年8月~2015年12月来自224个不同规模猪场的11 855份血清样品进行PRV-gE抗体检测。结果显示,血清样品总阳性率为14.03%,2012年8月~2015年12月分别为2.76%、5.12%、11.61%、26.61%;育肥猪、哺乳仔猪、母猪、保育猪、后备母猪及公猪依次为31.02%、29.27%、27.46%、22.29%、22.22%、18.52%,皖北、皖南和江淮地区分别为28.59%、9.59%、6.49%。猪场总阳性率为41.96%,大型规模场、中等规模场、小型规模场及散养户分别为4.74%、17.00%、23.15%,皖北、皖南和江淮地区分别为48.48%、35.71%、38.53%。结果表明,安徽地区猪群中PRV感染逐年上升,皖北地区样品阳性率显著高于其他地区,其中小型规模场及散养户的感染尤为严重,育肥猪和种猪带毒是伪狂犬病持续存在的重要原因,养殖方式、疫苗免疫、生物安全等因素均对PR的流行产生影响。
- 黄晓慧吴华健华耀魏建忠孙裴李郁
- 关键词：伪狂犬病酶联免疫吸附试验血清学调查
- 2012-2014年安徽地区不同规模猪场PR野毒感染血清学调查
- 引言 猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的一种高度接触性传染病,可引起种猪繁殖障碍,仔猪呼吸道综合征、神经症状、腹泻、生长发育受阻等主要症状,同...
- 黄晓慧储霞飞李郁孙裴魏建忠
- 安徽地区不同规模猪场猪伪狂犬病毒感染情况调查与分析
- 2020年
- 了解安徽地区不同规模猪场猪群中猪伪狂犬病毒(PRV)感染情况,为制定科学的猪伪狂犬病防控措施提供决策参考。本调查应用PCR技术,对2013-2017年安徽地区336个疑似感染PRV野毒的不同规模猪场的897份样品进行了PRV病原的检测。结果显示,PRV阳性检出率为15.50%(139/897),2013年、2014年、2015年、2016年与2017年的病原阳性率分别为1.11%(1/90)、5.35%(9/168)、28.64%(55/192)、21.39%(43/201)和12.60%(31/246),其中2013年与2014年之间差异不显著,其它年份之间差异显著;仔猪、保育、育肥、母猪与公猪的阳性率分别为17.90%(29/162)、24.42%(32/132)、14.51%(9/62)、(48/206)、18.68%(17/91),各生长阶段间的差异不显著;大规模养殖场、中等规模养殖场与小规模养殖场的及散养户的阳性率为12.87%(35/272)、15.38%(18/117)和19.88%(34/171),小规模养殖场及散养户与其它规模养殖场相比差异显著。本次调查结果表明,PRV在安徽地区各规模化猪场依然普遍存在。猪群各生长阶段均有PRV感染,小型规模场及散养户的感染尤为严重。提示应进一步提升猪伪狂犬病的免疫预防水平,定期进行病原学、血清学检测,做好综合防治工作。
- 黄晓慧耿鹤鸣李郁
- 关键词：猪伪狂犬病毒
- 副猪嗜血杆菌转铁结合蛋白A基因的原核表达与鉴定被引量：3
- 2012年
- 为获得副猪嗜血杆菌(HPS)转铁结合蛋白A基因(tbpA)的表达产物,根据GenBank发表的HPS(SH0165株)tbpA的核苷酸序列设计合成1对特异性引物,以HPS血清13型安徽分离株(LJ3)的基因组DNA为模板,利用PCR扩增tbpA基因,然后将其克隆至pET-SUMO载体,构建重组原核表达质粒pET-SUMO-tbpA,通过PCR鉴定和测序确认,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)中,并进行IPTG诱导表达和His-Ni-resin纯化目的蛋白。经SDS-PAGE检测,获得了110ku的表达产物,与预期大小的转铁结合蛋白A(TbpA)的分子质量一致。Western-blot分析表明,表达产物与HPS阳性血清能发生反应,显示表达产物具有良好的免疫活性。结果表明,成功表达的TbpA为研制HPS新型疫苗和诊断试剂奠定了基础。
- 黄晓慧辛伟魏建忠连凯琪郑海学朱启运才学鹏李郁
- 关键词：副猪嗜血杆菌原核表达
- 199株猪链球菌临床分离株血清型、毒力基因及多位点序列分型分析被引量：5
- 2022年
- 【背景】猪链球菌(Streptococcus suis,SS)血清型、基因型众多,毒力因子复杂。【目的】了解SS临床分离株血清型、毒力基因分布、分子分型特征及其之间的相关性。【方法】针对199株SS临床分离株,应用PCR技术进行血清分型和毒力基因检测,采用多位点序列分型方法(multilocus sequence typing,MLST)进行基因分型,并分析SS血清型、毒力基因型和序列型(sequence type,ST型)的流行特点及其关联性。【结果】199株SS临床分离株分属于16种血清型(1、2、3、4、6、7、8、9、10、12、15、16、21、24、29和30型),主要以2、4、3型为主,分别占26.13%(52/199)、14.57%(29/199)和12.06%(24/199),未定型(NT)菌株占21.61%(43/199)。共鉴定出72种ST型,其中ST1、ST94、ST117、ST7、ST28和ST87为主要ST型,分别占12.56%(25/199)、11.56%(23/199)、9.56%(19/199)、9.04%(18/199)、6.03%(12/199)和3.01%(6/199),另有24种新发现的ST型(ST1224−ST1227,ST1229−ST1235,ST1241−ST1242,ST1300−ST1310);分为12个克隆群(cloning complexes,CC)和32个单个ST型。199株SS分离株中毒力基因fbps的检出率最高,为96.98%(193/199);共有19种毒力基因型,其中66株(33.17%)epf‒/mrp‒/sly‒/gapdh+/fbps+/orf2+型SS为优势毒力基因型。【结论】近年来SS的优势血清型为2、4和3型;ST型具有明显的遗传异质性种内分化程度较高且与ST型存在一定交叉性;毒力基因分布情况存在差异,毒力基因型呈现多样化。本研究对SS临床分离株的流行特征进行探究,为猪SS病诊断、治疗和制定防控措施提供科学依据。
- 黄晓慧韩雪姣刘雪兰刘雪兰孙裴孙裴魏建忠
- 关键词：猪链球菌血清型毒力基因
