丛国正
- 作品数：105 被引量：317H指数：9
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 细胞凋亡信号传导通路的研究进展被引量：23
- 2010年
- 细胞凋亡是机体维持自身稳定的一种基本生理机制,是有许多基因产物及细胞因子参与的一种有序的细胞自我消亡形式。细胞凋亡发生过程的启动和进行受到精确调控,具有独特而复杂的信号系统。各种凋亡信号通过信号传导通路传至细胞内,激活靶分子而产生细胞效应,引发细胞凋亡。一般认为,细胞凋亡存在3条主要通路:线粒体通路、内质网通路和死亡受体通路,各通路间互相联系,共同调节细胞凋亡。
- 刘萍丛国正独军政邵军军林彤常惠芸
- 关键词：细胞凋亡信号传导死亡受体线粒体内质网
- 一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种用于牛基因组位点特异性重组的RNA干扰载体及其构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明的干扰载体依次包括以下相连的各部分：HSV-TK表达元件、用于载体线性化的酶切位点、与牛的scaffold序列上游进行...
- 常惠芸马延滨邵军军高闪电赵付荣丛国正林彤独军政
- 文献传递
- 口蹄疫病毒前导蛋白的研究进展被引量：4
- 2007年
- FMDV基因组编码的所有蛋白质是以多聚蛋白质的形式产生的。前导蛋白是FMDV基因组编码的第一个具有酶切活性的蛋白质。它是剪切多聚蛋白质的共翻译分子内部的一个蛋白酶。FMDV是在多聚蛋白质的N端剪切前导蛋白。此外,前导蛋白不仅能剪切病毒编码的多聚蛋白,而且能降解宿主细胞中特定的蛋白质,由此极大提高了病毒的毒力。前导蛋白可以抑制I型干扰素的分泌,降低免疫监视系统对FMDV的监视能力,以此逃避宿主的非特异性免疫系统的攻击。关于前导蛋白与细胞凋亡的关系,细胞凋亡产生的eIF4G片段与前导蛋白裂解eIF4G产生的碎片是不同的。
- 周建华丛国正高闪电常惠芸
- 关键词：口蹄疫病毒
- 牛A型口蹄疫广谱多表位疫苗及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种牛A型口蹄疫广谱多表位重组疫苗及其制备方法和应用，属于兽用疫苗研究领域。本研究采用全新的反向疫苗学研究理念和策略，将国内流行毒株与我国接壤国家最近流行的牛A型口蹄疫病毒代表毒株的主要抗原表位进行合理的串联...
- 常惠芸邵军军林彤丛国正独军政高闪电
- 文献传递
- 口蹄疫病毒感染细胞的研究进展被引量：11
- 2005年
- 口蹄疫是引起偶蹄动物的急性发热性水泡性疾病,具有高度接触传染性,对发病国家和地区经济有破坏性作用和不良的政治影响。口蹄疫病原体为小RNA病毒科的口蹄疫病毒,是一类单股正链RNA病毒,该病毒有多种血清型及其亚型,相互之间无交叉保护力或保护力极其有限。目前,口蹄疫病毒感染的分子机理还不是很清楚。口蹄疫病毒感染细胞的过程主要包括病毒与细胞的吸附、病毒穿透细胞壁进入细胞、病毒粒子的脱衣壳、病毒RNA的翻译转录、病毒基因组的复制以及病毒粒子的成熟过程,最后是成熟的病毒粒子衣壳包装成为完整病毒。文章就口蹄疫病毒感染细胞的过程做一概述。
- 沈小燕常惠芸丛国正刘永生王建华谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒基因复制口蹄疫
- SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VP1及其C端的表达、纯化和反应原性分析被引量：2
- 2010年
- 目的：表达SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VPl及其C端，进行反应原性分析并制备多克隆抗体。方法：以SAT2型口蹄疫病毒南非地区分离株结构蛋白VPl编码区的重组克隆载体为模板，设计特异性引物，扩增VPl基因及其C端编码区，然后将该其分别克隆至原核表达载体pET-30a（＋）中，转化大肠杆菌工程菌株BL21（DE3）plysS，经IPTG诱导，以金属离子螯合层析法对表达的VPl、VP1C端融合蛋白进行纯化，经Westernblot对其反应原性进行分析。用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体，以ELISA方法测定抗体效价。结果：实现了SAT2型口蹄疫病毒结构蛋白VPl及其C端的高效表达，表达产物主要以包涵体的形式存在。SDS—PAGE显示纯化的目的蛋白分别在相对分子质量35000和19000处有单一目的条带，具有较高的纯度。Western blot结果显示，纯化的VP1及其C端均可与牛SAT2型FMDV阳性血清反应，而与阴性对照血清无交叉反应。结论：用纯化的VPl及VP1C融合蛋白免疫新西兰大耳白兔制备的多克隆抗体效价达1：12800以上，具有较高的特异性。
- 高闪电常惠芸独军政邵军军丛国正林彤韩雪清谢庆阁
- 关键词：原核表达
- 口蹄疫病毒受体牛源β1亚基基因的分子特征被引量：3
- 2006年
- 从口蹄疫病毒试验感染康复牛肺组织中克隆了β1亚基基因,并对其核苷酸和推导氨基酸序列进行了比较分析。结果显示,牛β1亚基基因的编码区含有2 397个核苷酸,编码798个氨基酸,含有10个潜在的糖基化位点,其中信号肽由20个氨基酸组成,胞外域由708个氨基酸组成,跨膜区由29个氨基酸组成,胞浆域由41个氨基酸组成。与GenBank中的牛β1基因的同源性达99.5%,从起始密码子开始共有12个碱基发生了变化,引起第217、247、268、281、321、691、709位的氨基酸改变,分别由F、S、W、V、H、Y、V变为S、P、R、G、Y、C、G。牛β1基因与猪、猩猩、猫、犬、人、小鼠和鸡的β1基因核苷酸序列同源性分别为93.8%、89.3%、91.6%、90.2%、89.6%、85.4%、75.6%,推导氨基酸序列同源性分别为98.2%、93.7%、97.5%、96.7%、94.2%、93.2%、84.1%。牛与猪β1亚基同源性最高。
- 独军政常惠芸易华山丛国正邵军军林彤才学鹏谢庆阁
- 关键词：口蹄疫病毒受体分子特征
- A型口蹄疫病毒型特异性抗原的可溶性原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2010年
- 目的可溶性表达A型口蹄疫病毒型特异性结构蛋白VP1,制备型特异性的兔抗A型FMDV VP1多克隆抗体。方法以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1基因重组克隆载体pGEM-AVP1为模板,设计表达引物,经PCR扩增获得上游带有OmpT信号肽编码序列的VP1基因编码区,将其克隆至该表达载体pET-30a(+)中,构建可溶性原核表达载体pET-30a-OmpT-AVP1。将该重组质粒转化大肠杆菌工程菌株BL21-(DE3)-plysS,经IPTG诱导表达,以金属离子螯合层析法对可溶性表达的VP1融合蛋白进行纯化,然后用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体,以ELISA、Western blot和间接免疫荧光法分别对多克隆抗体进行鉴定。结果 SDS-PAGE电泳分析显示pET-30a-OmpT-AVP1重组菌经诱导后表达一Mr约为33 000的VP1融合蛋白,与预期结果相符。目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带。Western blot分析结果显示,VP1蛋白可与豚鼠抗A型口蹄疫病毒阳性血清反应。用纯化VP1蛋白免疫新西兰大耳白兔制备的多克隆抗体效价达1∶12 800以上,具有较高的型特异性,并且可与同型FMDV细胞培养物中的病毒抗原发生反应。结论制备了具有高亲和性和特异性的兔抗A型FMDV结构蛋白VP1多克隆抗体,为A型FMDV易感动物的抗体筛查及病原鉴定奠定了基础。
- 高闪电常惠芸独军政丛国正邵军军林彤
- 关键词：A型口蹄疫病毒原核表达可溶性
- 口蹄疫病毒免疫逃避机制研究进展被引量：1
- 2011年
- 口蹄疫(FMD)是偶蹄动物的一种剧烈的接触传染性疾病。病毒可以进化出不同的方法逃避机体免疫系统的清除,处于一种潜在感染状态,这种现象叫做免疫逃避。免疫逃避可以阻断机体的先天性免疫应答以及获得性免疫应答,这主要是通过诱导免疫细胞凋亡、抑制免疫效应分子功能、抑制抗原呈递实现的。全面深入地研究口蹄疫发病及免疫机制将有助于高保护力疫苗的研制,同时为口蹄疫的生物疗法提供可能。
- 马延滨高闪电丛国正常惠芸
- 关键词：FMDV免疫抑制细胞凋亡免疫逃避
- A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达·纯化及活性检测(英文)被引量：4
- 2010年
- [目的]表达口蹄疫病毒结构蛋白VP1,并对其进行纯化和相关活性的检测。[方法]以A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1重组质粒pGEM-VP1为模板,用特异性表达引物扩增其编码区,经酶切后与pGEX-4T-1、pPROExHTb等原核表达载体相连,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS表达菌株,经IPTG诱导表达,以实现VP1蛋白的表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达并对2种载体重组菌进行超声裂解,取上清和沉淀电泳,用金属螯合亲合层析法对His-VP1进行纯化。[结果]SDS-PAGE电泳分析显示pPRO-VP1诱导后目的条带为33Ku,与预期结果相符;目的蛋白纯化后,在电泳图片上显示较为清晰的单一条带;His-VP1可与A型口蹄疫病毒豚鼠灭活阳性血清发生特异性的反应。[结论]表达及纯化了具有高特异性的A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1,为深入研究结构蛋白VP1在口蹄疫病毒致病机制中的作用奠定了基础。
- 李菁林彤高闪电丛国正独军政邵军军常惠芸
- 关键词：A型口蹄疫病毒
