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不同转染法用于第三代慢病毒包装系统包装效率的比较: 2011年; 目的比较分别经磷酸钙转染法和脂质体转染法建立的第三代慢病毒包装系统的包装效率.方法制备并纯化完整的重组慢病毒三质粒系统：转移质粒（PXZ171）、包装质粒（△NRF）以及包膜蛋白质粒（VSV-G）.分别用磷酸钙法和脂质体法将三质粒共转染包装细胞293T,72 h后收集病毒上清,批量快速测定法测定病毒滴度并进行比较.结果磷酸钙转染法所产病毒滴度约达到脂质体转染法的1/10.结论磷酸钙转染法获取的病毒滴度稍低,但价格相对便宜,病毒产量亦可满足实验要求.比较适合在普通实验室中开展.; 井超徐铁军; 关键词：慢病毒转染 293T细胞

酪氨酸激酶受体B基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定: 2013年; 目的构建有效抑制酪氨酸激酶受体B（TrkB）基因的RNA干扰慢病毒表达载体。方法根据大鼠TrkB基因的不同部位设计4对短发卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）寡核苷酸片段，克隆到慢病毒干扎载体pXZRNAi1．0中，构建shRNA慢病毒表达载体pXZRNAi-shTrkB-1，2，3，4。获得较高滴度的慢病毒颗粒后感染大鼠神经干细胞，应用实时荧光PCR和Westernblot方法检测对TrkB的干扰效果。结果酶切鉴定和测序结果提示慢病毒载体的寡核苷酸链插入正确。包装浓缩慢病毒颗粒的滴度为8．6×105cfu／ml，对神经干细胞感染效率可达80％。与未感染组相比，转染pXZRNAi-shTrkB-3和4的神经干细胞中TrkBmRNA表达水平分别为（66．7±5．5）％和（76．8±4．9）％，TrkB蛋白的表达水平分别为（68．5±4．3）％和（78．2±5．1）％，均差异有统计学意义（p〈0．05）。结论成功构建可高效沉默TrkB基因的pXZRNAi-shTrkB慢病毒载体，为研究TrkB在神经干细胞中的作用提供了有力工具。; 李梅赵玉井超耿德勤庄柏翔樊红彬; 关键词：酪氨酸激酶受体B 慢病毒载体 RNA干扰神经干细胞

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井超