何晓青
- 作品数：51 被引量：199H指数：7
- 供职机构：北京林业大学生物科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生环境科学与工程农业科学更多>>
- “微生物学”课程教学改革探索
- 2022年
- “微生物学”是生物专业学生的必修课程,具有内容更新快、实践性强等特点,因此对“微生物学”课程开展教学改革存在必要性。目前,“微生物学”课程的教学工作存在理论性强、教学方法陈旧、考核方式有局限性等问题。基于国家林业发展的需求,实现为社会培养合格的复合型人才的目标,在深刻总结“微生物学”课程教学过程存在问题的基础上,对“微生物学”课程进行了教学改革。具体改革措施包含以下3个方面:①课前,凝练与拓展教学内容,注重学生科研思维的建立和科研热情的培养;②课上,采用灵活多样的教学方法开展教学活动,充分发挥学生在课上的积极主动性,建立更强的师生互动关系;③课后,完善与优化评价体系,激励教师提升教学能力和水平,促进学生平衡发展。通过上述教学改革策略的实施,不仅显著改善了教师的教学效果,赋予了该课程更大的吸引力;同时,提高了学生的综合能力,深化了学生对“微生物学”基础知识的掌握程度,激发了学生对微生物前沿知识探索的热情。
- 郑菲国辉何晓青
- 关键词：微生物学教学改革教学效果
- 基因编辑技术对大肠杆菌yjjW基因点突变的两步法策略被引量：1
- 2021年
- 【目的】为了实现对大肠杆菌靶基因的点突变,本研究将同源重组系统与CRISPR-Cas9技术相结合,探索一种高效、简捷的两步法策略。【方法】将靶基因的上下游同源臂和标记基因(amp)与pKOV质粒连接,获得pKOV-HR重组质粒。将pKOV-HR转化至大肠杆菌,借助其自身RecA重组系统,介导DNA发生同源重组,获得靶基因敲除菌株。随后,靶基因的点突变采用pSGKP-km和pCasKP-apr双质粒系统。首先,设计与amp结合具有定向引导作用的spacer序列,并利用overlap PCR获得带有靶基因点突变的同源臂,将spacer和同源臂与pSGKP-km质粒连接,获得重组质粒pSGKP-km-spacer-HR;接着,将pSGKP-km-spacer-HR和pCasKP-apr质粒转化至上述敲除菌株;最后,利用质粒表达的Cas9切割蛋白和λ-Red重组蛋白,发生DNA同源重组,获得靶基因点突变菌株。【结果】利用上述方法,既成功获得了大肠杆菌yjjW敲除菌株D7ΔyjjW::ampR,又实现了yjjW第24位碱基T到C的点突变,获得点突变菌株D7yjjW-24。【结论】本研究建立了一种高效、简捷的大肠杆菌靶基因点突变方法,amp基因的插入提供了有效的筛选标记,此外该方法建立的重组质粒pSGKP-km-spacer,可应用于同种菌株其他靶基因的点突变,能够缩短后续实验操作,为基因编辑技术的发展提供了科学理论以及实验操作基础。
- 张琦梁雅静张宇馨陈玲慧韩钟娆李贝贝金一何晓青
- 关键词：大肠杆菌同源重组点突变
- 微生物的木聚糖酶及其生物漂白研究进展被引量：29
- 2003年
- 微生物用来代谢木聚糖的酶系是研究自然界中第 2种最丰富的多聚糖 (木聚糖 )的重要工具 .近年来 ,国际上对微生物分解木聚糖系统的研究日益关注 ,主要研究工作集中在不同条件下微生物木聚糖酶的诱导产生和调节机制 ,酶的提纯、鉴定 ,木聚糖酶基因的分子克隆和表达 ,以及木聚糖酶在加工工业上 ,尤其是纸浆漂白方面的应用 .该文综述了木聚糖复杂的结构 ,微生物木聚糖酶的生物合成、固定化、固态发酵、酶的协同作用、基因的分子克隆以及其潜在的应用价值 ,并简要综述了微生物木聚糖酶的生物漂白机制、选择标准以及木聚糖酶技术的应用前景 .
- 谢响明何晓青
- 关键词：木聚糖木聚糖酶生物漂白
- 北京农村饮用水中病原细菌污染特征的研究被引量：3
- 2010年
- 为了探讨北京农村地区饮用水中病原细菌的污染特征，2008年9月～2009年12月对该地区居民饮用水中的细菌总数、耐热大肠菌群和总大肠菌群3项细菌学指标进行了检测。结果表明：水样中细菌总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群的数量均存在超标现象，平均超限值百分率分别为5．67％，80．77％和25．OO％。分散式供水的3项细菌学指标的超标率均高于集中式供水。不同水源类型微生物指标超标率由高到低依次为山泉水、浅井水、深井水。不同取水方式中，微生物指标超标率由高到低依次为手压泵取水、机器取水、缸内储水。由此得出，农村居民饮用水细菌指数均有超标，存在着不同程度的污染，应采取相应措施，使农村饮用水微生物学指标合格。
- 程莉何晓青张德友王东红饶凯峰谢响明虞睿
- 关键词：农村生活饮用水超标率污染特征
- 北方某市城区水环境中轮状病毒的初步检测被引量：17
- 2007年
- 轮状病毒(Rotavirus,RV)是引起全世界婴幼儿肠胃炎的最主要病原体.在我国,儿童秋季腹泻发病达到高峰,也主要由轮状病毒引起.论文改进了RT-nested-PCR检测水中轮状病毒的方法,于2006年10月对北方某市城区水环境(包括污水、地表水和饮用水)中的轮状病毒进行了初步检测.结果表明,该市某污水厂进水和不同工艺段出水、主要公园的景观水体、主要自来水厂进水和出水以及城区管网水,均检出轮状病毒.综合分析从水源到管网的过程,认为管网水中的轮状病毒可能与水源水污染有关.管网水中有轮状病毒检出,说明秋季该市饮用水中存在潜在的轮状病毒传染源.同期对管网水进行的细菌学指标检测,没有发现总大肠菌群、耐热大肠菌群、粪链球菌,可见目前城市供水水质标准中的细菌学指标并不能准确反映病毒污染状况.
- 程莉何晓青李伟马梅王子健谢响明
- 关键词：轮状病毒污水地表水饮用水
- 核酸技术在立枯丝核菌分类与生态学研究中的应用被引量：4
- 2005年
- 立枯丝核菌是一种传播广、危害大的土传病原菌,对其展开的研究已涉及各个方面并逐渐深入,近几年借助于核酸技术对其所展开的研究更成为热点。对核酸技术在立枯丝核菌的分类学研究(主要包括G+Cmol%含量测定、核酸杂交、各种DNA指纹技术、特异PCR扩增、测序DNA的序列分析)、监测群体动态变化的生态学研究(实时荧光PCR技术)中的应用作一简要的介绍。
- 邢楠谢响明何晓青
- 关键词：立枯丝核菌分类学生态学
- 高产漆酶丝孢菌筛选及产漆酶性质初探
- 丝孢菌(Hyphomycetes)主要生于腐木,枯枝、树皮、落叶等植物残体上及土壤中,为自然界中重要的生物降解菌,具有较强的分泌木质素降解酶能力。迄今为止,世界范围内已报道该类真菌仅几十种,而我国则鲜见产漆酶丝孢菌的报道...
- 王祎宁谢响明赵国柱杨暖何晓青李志茹
- 文献传递
- 三种典型肠病毒的分子检测及其在北京地区水环境中的来源和分布规律
- 本论文以北京地区引起婴幼儿腹泻的轮状病毒、星状病毒和诺如病毒为研究对象，研究三种病毒灵敏、快速的分子检测方法，并对北京地区水环境中病毒的污染特征，在不同类型水体中的分布规律，在不同季节的变化规律，及其可能的来源进行了系统...
- 何晓青
- 关键词：肠病毒水环境分子检测污染特征
- 基于esp基因和JCV标记的MST方法在五大流域典型水源地中的应用被引量：1
- 2015年
- 非点源污染目前已经成为影响水体环境的重要污染。微生物源示踪技术(microbial source tracking,MST)是解决非点源污染的一项新技术,它可以确定污染的宿主来源。肠球菌esp基因和多瘤病毒JCV可以作为检测水体中人源粪便污染的分子标记,其灵敏度和特异性都很高。为分析五大流域水源地是否受到人源粪便的污染,对辽河、海河、淮河、长江和黄河五大流域典型水源地水样进行采集和检测,选取人源粪便特异病原微生物肠球菌的esp基因和多瘤病毒JCV建立了相应的MST分子检测方法。结果表明,五大流域的典型水源地采样点均有可能受到了人源粪便的污染,可为当地相关部门提供技术支持和数据参考。
- 王敬琦孔维文刘婷婷陈南杨柏云何晓青
- 关键词：水源地MST
- 体外诱导耐万古霉素金黄色葡萄球菌及分子机制被引量：2
- 2016年
- 【目的】通过前期体外诱导获得耐万古霉素金黄色葡萄球菌,从基因突变方面对万古霉素耐药性菌株进行研究。【方法】通过低浓度万古霉素逐步诱导13株敏感性金黄色葡萄球菌,用琼脂稀释法和E-test法检测所有菌株对万古霉素的耐药性(最低抑菌浓度,MIC),PCR扩增与万古霉素耐药性密切相关的4个重要基因:rpo B、vra S、gra R和gra S,并测序分析,比较诱导前后不同菌株的基因序列。【结果】通过60 d的体外诱导实验,13株对万古霉素敏感性金黄色葡萄球菌中有6株被诱导为中介耐药金黄色葡萄球菌(Vancomycin intermediate Staphylococcus aureus,VISA),7株菌被诱导之后对万古霉素仍处于敏感状态,MIC<4 mg/L。检测诱导前后所有菌株的rpo B、vra S、gra R和gra S基因发现:有3株VISA的rpo B基因同时有L466S和H481N的突变,gra S基因同时有R232K的突变。【结论】对万古霉素敏感的金黄色葡萄球菌经过较长时间的体外诱导可发展为VISA。在已检测的重要基因中,rpo B和gra S的突变对耐药性的发展很可能起关键作用,而vra S和gra R对这一过程没有显著影响。
- 王玉冰李晓丽王伟轩陈南何晓青金一谢响明
- 关键词：金黄色葡萄球菌万古霉素基因突变
